兔痘病毒PCR試劑盒步驟注意事項(xiàng):
1.基礎(chǔ)程序;
2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;
3.反應(yīng)時(shí)間;
4.循環(huán)次數(shù);
5.PCR 反應(yīng)液的配制;
6.PCR技術(shù)的基本原理;
7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);
8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;
9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
?
以下是兔痘病毒PCR試劑盒步驟的詳細(xì)說明書:
產(chǎn)品名稱 | 兔痘病毒PCR試劑盒步驟 |
英文名稱 | Rabbit Pox Virus(RPV)PCR |
編號(hào) | EY00P1080 |
使用方法:
注:兔痘病毒PCR試劑盒步驟所有試劑使用前需*解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等,具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
取N個(gè)(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。
組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
以下是兔痘病毒PCR試劑盒步驟的相關(guān)產(chǎn)品,了解更多進(jìn)口PCR試劑盒點(diǎn)擊進(jìn)入。
雜交瘤(B類);Z1510A2G6A2F8
DDR1 Others Mouse 小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
LLC 小鼠肺癌細(xì)胞
HBL-100人整合SV40基因的上皮細(xì)胞 HBL-100 iegration of SV40 gene in breast epithelial cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
SHH Protein Human 重組人 SHH / Sonic hedgehog 蛋白 (aa 1-197, His 標(biāo)簽)
人成纖維細(xì)胞;HFF Hepa 1-6, 小鼠肝癌細(xì)胞 Mouse
人星形膠質(zhì)細(xì)胞 Human
CM-R104大鼠腦膜細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
7130 人絨毛間葉成纖維細(xì)胞(HVT)( 5×105 )
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;BALB/C 3T3 小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
野生型人c-kit受體細(xì)胞株;A7d
CD9 Others Human 人 CD9 / Tspan-29 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
MCF-7(MCF7)(ATCC來源), 人癌細(xì)胞
MDA-MB-231(ATCC來源), 人癌細(xì)胞
Raji,人Butt's淋巴瘤細(xì)胞
Saos-2,人成骨肉瘤細(xì)胞
靛基質(zhì)試驗(yàn)用培養(yǎng)基 英文名稱; Indole Test Medium 規(guī)格; 250g
酵母菌、霉菌、念珠菌、青霉、曲霉檢驗(yàn)培養(yǎng)基 英文名稱; 規(guī)格;
察氏瓊脂 英文名稱; Czapek Dox Agar 規(guī)格; 250g
產(chǎn)毒培養(yǎng)基 英文名稱; Toxin-Producing Medium 規(guī)格; 250g
高鹽察氏瓊脂 英文名稱; Salt Czapek Dox Agar 規(guī)格; 250g
馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA)顆粒 Potato Dextrose Agar 300ml/袋*10
李氏菌增菌肉湯(LB1,LB2)基礎(chǔ)顆粒 Listeria Enrichment Broth Base 225ml/袋*10
乳糖蛋白胨培養(yǎng)液顆粒 Lactose Peptone Broth 300ml/袋*10
LB肉湯顆粒 LB Broth 300ml/袋*10
改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基顆粒 Martin Agar Medium, Modified 250g
兔痘病毒PCR試劑盒步驟察氏瓊脂 用于青霉,曲霉鑒定及保存菌種用(GB標(biāo)準(zhǔn))用途:用于青霉、曲霉鑒定及保存菌種用。成分(g/L)鈉 3.0 1.0鎂 0.5 0.5亞鐵 0.01蔗糖 30.0瓊脂 15.0用法稱取本品 50.0g,加熱溶解于1000ml 蒸餾水中,分裝后 116℃高壓滅菌 20 分鐘,備用。注明:高壓滅菌后有沉淀物。
產(chǎn)毒培養(yǎng)基 用于青霉,曲霉的產(chǎn)毒培養(yǎng)用途:用于青霉、曲霉的產(chǎn)毒培養(yǎng)。成分(g/L)秈米 250.0用法稱取本品適量,分裝試管或三角瓶,121℃高壓滅菌 15 分鐘,備用。
高鹽察氏瓊脂 用于霉菌和酵母菌的計(jì)數(shù)(GB標(biāo)準(zhǔn))用途用于霉菌和酵母菌的計(jì)數(shù)。成分(g/L)鈉 2.0g 1.0g鎂 0.5g 0.5g亞鐵 0.01g蔗糖 30.0g氯化鈉 60.0g瓊脂 20.0g※請(qǐng)放置陰涼干燥處保存用 法稱取本品11.4克,加熱溶解于100ml蒸餾水中,115℃高壓滅菌20分鐘,備用。質(zhì)量控制和典型特征接種10-100個(gè)霉菌于28℃培養(yǎng)48-96小時(shí)應(yīng)生長良好。
玉米粉瓊脂 用于真菌培養(yǎng)用途:用于真菌的培養(yǎng)及鑒定。成分(g/L)玉米浸粉 7.0瓊脂 15.0pH值6.0 ± 0.2 25℃用法稱取本品 22.0g,加熱溶解于1000ml 蒸餾水中,121℃高壓滅菌 15 分鐘,備用。
需要自備的器材:
1.兔痘病毒PCR試劑盒步驟儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。
特點(diǎn):
1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對(duì)照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。