公司細(xì)胞廣泛用于國(guó)內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
產(chǎn)品名稱 | 生長(zhǎng)特性 | 貨號(hào) |
恒河猴腎細(xì)胞;MMK3 | 貼壁生長(zhǎng) | EY-X63737 |
細(xì)胞名稱 恒河猴腎細(xì)胞;MMK3
形態(tài)特性: 上皮樣,多角形
生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)
特征特性: 該細(xì)胞來源于一雌性獼猴的腎組織。2000年由中國(guó)科學(xué)院昆明細(xì)胞庫(kù)建立。
培養(yǎng)條件: M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS
傳代方法: 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況: P3
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè): 熒光法(-)
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Kaempferol 3-O-sophoroside
CAS No.:19895-95-5
中文名:酚-3-O-槐糖苷
分子式:C27H30O16
蘇木素 訂購(gòu)|咨詢 葡萄糖6異構(gòu)酶(GPI) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
羥基吳茱萸 訂購(gòu)|咨詢 葡萄糖6脫氫酶(G6PD) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
?;蛆Z去氧膽 訂購(gòu)|咨詢 葡萄糖6脫氫酶(G6PD) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
次 訂購(gòu)|咨詢 葡萄糖6脫氫酶(G6PD) 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg
氧醉椒素 訂購(gòu)|咨詢 葡萄糖6脫氫酶(G6PD) 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg
訂購(gòu)|咨詢 葡萄糖6酶催亞基(G6PC) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
獨(dú)活素 訂購(gòu)|咨詢 葡萄糖6酶催亞基(G6PC) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
巴馬亭紅 訂購(gòu)|咨詢 葡萄糖苷木糖基轉(zhuǎn)移酶1(GXYLT1) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
25氧基澤瀉A 訂購(gòu)|咨詢 葡萄糖苷木糖基轉(zhuǎn)移酶2(GXYLT2) 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg
基正壬 訂購(gòu)|咨詢 葡萄糖苷酶β(GUSβ) 規(guī)格: HPLC≥95%;0.1ml
野馬追內(nèi)酯A 訂購(gòu)|咨詢 葡萄糖苷酶β(GUSβ) 規(guī)格: HPLC≥95%;20mg
原花青素B1 訂購(gòu)|咨詢 葡萄糖苷酶β(GUSβ) 規(guī)格: HPLC≥95%;5mg
葉黃素 訂購(gòu)|咨詢 葡萄糖苷酶β(GUSβ) 規(guī)格: HPLC≥95%;20mg
蔗糖 訂購(gòu)|咨詢 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(GLUT1) 規(guī)格: HPLC≥98%;50mg
異補(bǔ)骨脂查爾 訂購(gòu)|咨詢 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(GLUT1) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
甘草二銨 訂購(gòu)|咨詢 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白10(GLUT10) 規(guī)格: UV≥98%;20mg
齊墩果3OβD葡萄糖( 1→3 訂購(gòu)|咨詢 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白11(GLUT11) 規(guī)格: HPLC≥98%;5mg
二十八 訂購(gòu)|咨詢 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白12(GLUT12) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
NOC2L NOC2家族樣蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Rutin
PSRC1 富含脯/絲卷曲螺旋蛋白1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Rutin
Band3/CD233 紅細(xì)胞陰離子交換蛋白1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Neosperidin dihydrochalcone
ART4/CD297 二腺苷核糖基轉(zhuǎn)移酶4抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Neosperidin dihydrochalcone
B3GALNT1 β1,3半乳糖轉(zhuǎn)移酶3抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Oxymatrine
Blood Group Lewis a 血型抗原Lewis A抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Oxymatrine
Cyclophilin F 親環(huán)蛋白(親環(huán)素)PPIF抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Andrographolide
DAP3 死亡相關(guān)蛋白3抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Andrographolide
茚 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Acridone 含量:3N,99.9%
熒 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Fluorescamine 含量:USP級(jí),98%
熒光紅 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Fluorescein 含量:BR,95%
熒光素酶(細(xì)菌) 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:LuciferasefromBacteria 含量:精制級(jí),40u/mg
熒光素酶(螢火蟲) 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Luciferasefirefly 含量:BR,200U/mg
熒光指示劑F254 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Zincsilicate 含量:SP
螢光素 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Fluoresceindisodiumsalt 含量:BR
硬樹脂 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Gumcopal 含量:BR,99%
硬脂 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Octadecylamine 含量:CP,99.85%
硬脂 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:1Octadecanol 含量:CP,98%
恒河猴腎細(xì)胞;MMK3無(wú)菌采樣袋(12cm*18cm)(帶壓條)規(guī)格:100個(gè)/包用途:用于樣品的采樣(小號(hào)采樣袋)
敏感紙片規(guī)格:20片用途:炭疽桿菌檢測(cè)用配套試劑
吖啶黃素(2.25mg)規(guī)格:1ml/支*5用途:每支添加于225ml HB4186中
細(xì)菌蛋白胨規(guī)格:250g用途:培養(yǎng)基原材料,提供細(xì)菌生長(zhǎng)所需的生長(zhǎng)因子
無(wú)機(jī)磷細(xì)菌培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于測(cè)定磷細(xì)菌肥料中磷細(xì)菌分解無(wú)機(jī)磷的效能
WLN培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于釀造和工業(yè)發(fā)酵過程中細(xì)菌、酵母菌和霉菌培養(yǎng)
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。