鮭魚立克次氏體PCR試劑盒費(fèi)用注意事項：
1．基礎(chǔ)程序；
2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；
3．反應(yīng)時間；
4．循環(huán)次數(shù)；
5．PCR 反應(yīng)液的配制；
6．PCR技術(shù)的基本原理；
7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；
8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；
9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
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以下是鮭魚立克次氏體PCR試劑盒費(fèi)用的詳細(xì)說明書：
產(chǎn)品名稱 | 鮭魚立克次氏體PCR試劑盒費(fèi)用 |
英文名稱 | Piscirickettsia salmonisPCR |
編號 | EY00P1002 |
使用方法：
注：鮭魚立克次氏體PCR試劑盒費(fèi)用所有試劑使用前需*解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等，具體提取方法請參照相關(guān)說明書；陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取，可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備（PCR前準(zhǔn)備區(qū)）
取N個（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品）PCR反應(yīng)管，每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應(yīng)管)。
組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣（樣本處理區(qū)）
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
以下是鮭魚立克次氏體PCR試劑盒費(fèi)用的相關(guān)產(chǎn)品，了解更多進(jìn)口PCR試劑盒點(diǎn)擊進(jìn)入。
中國倉鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1
ULBP2 Others Human 人 ULBP2 / N2DL-2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
Ke-3 人腎癌細(xì)胞
MDA-MB-436人腺癌細(xì)胞 MDA-MB-436 human breast adenocarcinoma cells L-15培養(yǎng)基+10%FBS
FAM3C Protein Human 重組人 FAM3C / ILEI 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
小鼠雪旺細(xì)胞(MSC)(5×105) MDA-MB-231, 人癌細(xì)胞 Human
Pcc4 小鼠畸胎瘤細(xì)胞
人臍靜脈平滑肌細(xì)胞
人毛發(fā)干細(xì)胞(HHDPC)( 5×105 )
急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞;TALL-104 大鼠心肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;BE(2)-M17
CDH17 Others Human 人 CDH17 / Cadherin-17 / LI-cadherin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
NCI-H520 肺鱗癌
NCI-H524 人小細(xì)胞肺癌
NCI-H661 人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞
NCI-N87 人高分化胃癌細(xì)胞
M肉湯 英文名稱； M Broth 規(guī)格； 10ml*20支/包
改良月桂基硫酸鹽胰蛋白胨肉湯- 英文名稱； Modified Lauryl Sulfate Tryptose Broth- VancoMycin 規(guī)格； 10ml*20支/包
李氏增菌肉湯LB2 英文名稱； Listeria Enrichment Broth 規(guī)格； 10ml*20支/包
FB2增菌液 英文名稱； FB2 Enrichment Broth 規(guī)格； 10ml*20支/包
改良磷酸鹽緩沖液（PSB） 英文名稱； Phosphate Buffered Saline 規(guī)格； 10ml*20支/包
消毒滅菌效果評價培養(yǎng)基
營養(yǎng)肉湯(NB) Nutrient Broth 250g
醇類中和劑管 9ml*20
醇類中和劑管(帶棉簽） 10ml*20
醛類中和劑管（帶棉簽） 10ml*20
鮭魚立克次氏體PCR試劑盒費(fèi)用沙門氏菌顯色培養(yǎng)基(第二代) 用于沙門氏菌的顯色培養(yǎng)，沙門氏菌顯紫色沙門氏顯色培養(yǎng)基是公司改良的培養(yǎng)基，用于食品、水、牛奶、冰激凌和肉制品和其它樣品中沙門氏菌的快速檢測。沙門氏菌顯紫色，大腸桿菌和大腸菌群顯藍(lán)色，其它細(xì)菌顯黃色或無色。用法稱取本品 13g 加入200ml蒸餾水，加熱煮沸溶解并不停攪拌，加熱1-2分鐘。冷卻至45-50℃時，傾入無菌平皿。注意：制備好的培養(yǎng)基一定要保持表面干燥，可在37℃的培養(yǎng)箱中倒置放置1-2小時。貯存制備好的平板可保存2-5天，應(yīng)避免光線直接照射。干燥培養(yǎng)基應(yīng)放置于陰暗干燥處， 保存溫度2-8℃，注意避光保存。失效干燥培養(yǎng)基超過保質(zhì)期、結(jié)塊和顏色變化都不能使用。操作步驟1、按國家標(biāo)準(zhǔn)、SN標(biāo)準(zhǔn)、FDA標(biāo)準(zhǔn)或其它方法制備樣品液；2、取1ml樣品液加入9ml RVS肉湯或其它選擇性增菌肉湯中， 36℃±1℃增菌培養(yǎng)24±2小時；3、用3mm接種環(huán)取1環(huán)增菌液，劃線接種到沙門氏菌顯色培養(yǎng)基上，做2個平板；4、36±1℃培養(yǎng)22-24h，沙門氏菌顯紫色，大腸桿菌和大腸菌群顯藍(lán)色，其它細(xì)菌顯黃色或無色；5、對可疑菌落可劃線接種到營養(yǎng)瓊脂平板上，36±1℃培養(yǎng)12-16小時，挑取單菌落做沙門氏菌全套生化試驗和血清學(xué)試驗（本公司有生化鑒定管套裝）
MUCAP試劑 用該試劑檢測沙門氏菌的準(zhǔn)確率為97％以上用于沙門氏菌快速篩選4-甲基傘形酮辛脂(MUCAP)是行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)SN 0332-94規(guī)定使用的試劑。沙門氏菌可特異的分解該試劑中的辛酯, 使4-甲基傘形酮游離.游離的4-甲基傘形酮用長波紫外光燈照射發(fā)藍(lán)色熒光，從而使沙門氏菌得到證實(shí)．培養(yǎng)基中加有蔗糖，可排除發(fā)酵的沙雷氏菌的干擾；顯熒光的菌落再做氧化酶試驗，可排除呈陽性反應(yīng)的假單胞菌、嗜水氣單胞菌和志賀氏鄰單胞菌的干擾。用該試劑檢測沙門氏菌的準(zhǔn)確率為97％以上1.增菌：18-24小時（臨床檢驗可直接進(jìn)行下一步—分離培養(yǎng)2.分離培養(yǎng)：選用SS瓊脂或HE瓊脂分離培養(yǎng)24-48小時（視菌落生長情況而定，一般24小時即可）。如選用SS瓊脂須在培養(yǎng)基中補(bǔ)加1%的蔗糖。3.樣品檢驗：于每個可疑菌落上加一滴制備好的試劑，如10分鐘內(nèi)于長波紫外光下發(fā)藍(lán)色熒光則可初步判定沙門氏菌存在；4.排除假陽性：用鉑針取部分菌落涂于試紙條上進(jìn)行測試，沙門氏菌為陰性（此過程可省略）采用此方法平均用2天時間，較其他方法快24小時以上
三糖鐵瓊脂（TSI） 生化培養(yǎng)基，用于腸桿菌科細(xì)菌的生化反應(yīng)篩選（GB、SN標(biāo)準(zhǔn)）用途:用于腸桿菌科細(xì)菌的生化反應(yīng)篩選。成分(g/L)蛋白胨 15.0牛肉粉 3.0酵母粉 3.0氯化鈉 5.0月示胨 5.0乳糖 10.0葡萄糖 1.0蔗糖 10.0酚紅 0.025亞鐵 0.2硫代鈉 0.3瓊脂 12.0pH值7.4 ± 0.1 25℃用法稱取本品 64.5g,加熱溶解于1000ml 蒸餾水中,加熱煮沸 1分鐘,分裝于 16mm× 150mm 試管,121℃高壓滅菌 15分鐘制成斜面長 4-5cm,底部長2-3cm。
沙門氏志賀氏增菌液 用于志賀氏菌和沙門氏菌增菌培養(yǎng)用途:用于沙門氏菌、志賀氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)。成分(g/L)月示胨 2.0蛋白胨 8.0牛肉浸粉 3.5酵母浸粉 2.0葡萄糖 2.0 10.0硫代鈉 10.0鎂 0.7鹽 0.7 4.0 0.1牛膽鹽 5.5去氧膽酸鈉 1.5煌綠 0.005pH值 7.1 ± 0.1 25℃用法稱取本品 50.0g,加熱攪拌溶解于 1000ml 蒸餾水中,水浴煮沸 2-3 分鐘,分裝無菌試管,每管 10ml,備用。注：無需高壓滅菌。
需要自備的器材：
1．鮭魚立克次氏體PCR試劑盒費(fèi)用儀器：分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器（2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管、吸頭（10 µL、200 µL、1000 µL）、滅菌雙蒸水。
特點(diǎn)：
1.即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡單，定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化，特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照，便于分析試驗結(jié)果。
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