植物茄呢醇磷酸酶2法由種類和變化可分為以下幾種
植物茄呢醇磷酸酶2法由種類和變化可分為以下幾種:
(一)雙抗體夾心法
(二)間接法
(三)競爭法
(四)雙位點一步法
(五)捕獲法測IgM抗體
(六)應(yīng)用親和素和的ELISA
ELISA試劑盒包被用緩沖液及zui適包被抗原濃度的優(yōu)化
1、包被緩沖液的優(yōu)化
包被抗原時,為了得到的包被效果,我們采用了碳酸鹽緩沖液(50mM ph9.6 )、磷酸鹽緩沖液(50mM ph7.6)、以及TRIS鹽酸緩沖液(50 mM ph7.6)三種緩沖液作為包被液,抗原包被濃度為5ug/ml,及2.5ug/ml,酶標(biāo)抗體工作濃度為1:400及1:300,用自動酶標(biāo)儀分析,選擇的包被緩沖液系統(tǒng)。同時為了保證緩沖液能夠保存,我們在包被液中添加了0.01%的硫柳汞作為防腐劑。
2、zui適抗原包被濃度的優(yōu)化
1、儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值
2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的Co III標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線,樣品的Co III含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。
3、檢測值范圍:0-800ng/ml
4、敏感度: ng/ml