胱抑素CElisa試劑盒測定方法比較
1、胱抑素CElisa試劑盒概述
胱抑素CElisa試劑盒在雞蛋清中分離純化得到高純度的半蛋白酶抑制劑(cysteine proteinase inhibitor ,CPI) ,后被命名為胱抑素C.它由122 個氨基酸組成,帶正電荷,等位點(diǎn)為9.3,是一種堿性非糖化的低分子蛋白,相對分子質(zhì)量為13300.胱抑素C 是半蛋白酶抑制劑家族中的一員,編碼血清胱抑素 C的基因位于20 號染色體短臂,長約615kb,屬于管家基因,能在所有有核細(xì)胞中以恒定的速率轉(zhuǎn)錄表達(dá)。胱抑素C 是一種分泌性蛋白,廣泛存在于各種體液中,如腦脊液、唾液、尿液、精液等, 其中精液和腦脊液中的濃度zui高, 尿液中zui低[1],胱抑素C 能夠自由通過腎小球, 并且由腎小管重吸收后降解,生理情況下幾乎沒有影響胱抑素C穩(wěn)定的因素。胱抑素具有產(chǎn)生速率恒定、只能通過腎小球?yàn)V過排泄,在腎小管內(nèi)*被重吸收降解[2],這一特點(diǎn)使得血清胱抑素 C成為引人注目的腎臟腎小球?yàn)V過率(glomerular filtration rate. GFR)的替代標(biāo)志物。
2、胱抑素CElisa試劑盒測定
2.1 胱抑素CElisa試劑盒測定方法比較
胱抑素C的測定目前有單向免疫擴(kuò)散法(RID)、放射免疫法(RIA)、時間分辨熒光免疫法( TRFIA)、酶免疫測定法( EIA)、乳膠顆粒增強(qiáng)免疫比濁法(PETIA)等。
從測定速度方面講,RID法、RIA法、TRFIA法、ELISA法均較耗時,PETIA法則只需幾分鐘就可完成整個分析過程。從靈敏度而言,RID法zui差,而RIA法、TRFIA法、ELISA法均優(yōu)于PETIA法。RIA法存在放射性污染,F(xiàn)TFIA法需要較貴的儀器,ELISA法無法適應(yīng)臨床大批量的標(biāo)本的需求。PETIA法可實(shí)現(xiàn)自動化,雖檢測靈敏度差些,但可達(dá)到150ug/L,遠(yuǎn)遠(yuǎn)底低于健康人的下限,可滿足臨床的要求[3].
2.2胱抑素CElisa試劑盒干擾因素分析
大量國內(nèi)外文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)血清胱抑素 C受影響因素較小,Gokkusu等認(rèn)為其不受性別,肌肉量的變化和慢性炎癥的影響是一種理想的內(nèi)源性標(biāo)志物[4],余洪立報(bào)導(dǎo)PETIA法測定血清胱抑素 C 當(dāng)<150μmol/ L ,Hb < 112g/ L ,TG< 815mmol/ L時 ,結(jié)果不受干擾[3].
目前對文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)血清胱抑素 C測定有影響的因素較少,Newman認(rèn)為甾體類激素治療可能對血清胱抑素 C測定有影響,但未說明有什么影響[5].向禮賢報(bào)導(dǎo)惡性腫瘤患者(如:結(jié)直腸癌)血清胱抑素 C可以升高,類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎用非甾體類抗炎藥和抗風(fēng)濕類藥物治療病人血清胱抑素 C水平升高[1].
3、胱抑素CElisa試劑盒臨床應(yīng)用
3.1胱抑素CElisa試劑盒在反映腎臟腎小球?yàn)V過率方面的應(yīng)用
由于血清胱抑素 C以恒定速率釋放入血,*從腎小球?yàn)V過,在腎小管中幾乎全被吸收,上皮細(xì)胞將其*分解代謝,它既不返回血液循環(huán),也不分泌至腎小管,只經(jīng)腎臟排除,不受性別、飲食、炎癥和體質(zhì)量等因素的影響,因此反映GFR時具有*的優(yōu)勢。
3.2 在兒科疾病中的應(yīng)用
由于小兒肌肉量少, 血肌酐(SCr )的測定結(jié)果很低, 致使SCr測定的度差, 因此, 4 歲以下兒童(SCr 的參考值2. 0——4. 0mg/ L) 難于通過用SCr 來測定有較小變化腎臟腎小球?yàn)V過率。另一方面, 1 歲以上兒童血清或血清胱抑素 C濃度已很穩(wěn)定,近于成人水平。所以血清胱抑素 C是反映兒童GFR 受損的靈敏標(biāo)記物,更適應(yīng)兒童腎病患者的診斷。
3.3 在糖尿病中的應(yīng)用
約三分之一的糖尿病患者發(fā)展為腎衰需要腎透析,必須以可靠的腎臟腎小球?yàn)V過率清除率來評價(jià)糖尿病患者的腎功能狀況。臨床通常以檢測SCr來評估GFR ,而SCr對輕度的腎功能損傷缺乏足夠的靈敏度并存在盲區(qū),血清胱抑素 C能對輕度的腎功能損傷反應(yīng)靈敏,并對檢測GFR 有較好的相關(guān)性,所以在糖尿病患者中定期檢測血清胱抑素 C可以動態(tài)觀察病情的發(fā)展。
3.4 在中的應(yīng)用
對于的病人很可能導(dǎo)致腎功能損害,因?yàn)樗幬飳δI小管有一定的損傷,當(dāng)腎功能受到損害時,藥物更容易積蓄并導(dǎo)致多方面的毒副作用,因此對進(jìn)行藥物治療的病人及時關(guān)注其腎臟功能的狀況,以適當(dāng)調(diào)整藥物劑量。一些研究[1——3]一致地認(rèn)為對病人檢測血清胱抑素 C比檢測SCr更有意義。
3.5 在心血管疾病中的應(yīng)用[6]
胱抑素C 參與了心血管系統(tǒng)諸多的病理、生理過程,它的作用機(jī)制涉及抗炎、抑制酶原與激素前體的活性等,而且由于它產(chǎn)生的恒定性,有可能在某些心血管疾病中成為診斷與檢測的分子指標(biāo)。
3.6 在腎移植中的應(yīng)用
腎臟腎小球?yàn)V過率可作為衡量急、慢性排斥對免疫抑制藥物的腎毒性觀察指標(biāo)之一,用一敏感、可靠和簡便的指標(biāo)來檢測GFR 的變化對移植腎患者是極為有效的診斷工具,而胱抑素 C 無疑是比肌酐更為敏感的GFR的檢測指標(biāo)。
3.7 在診斷腎源性胸水方面的應(yīng)用
引起胸水的原因很多,如腎源性,肝源性,心源性,炎癥,腫瘤及內(nèi)分泌代謝等。從多種病因中鑒別出腎源性胸水往往比較困難。Donej等用同一種方法同時測定血清和胸水中的血清胱抑素 C的濃度,發(fā)現(xiàn)在漏出性胸水中,血清血清胱抑素 C和胸水血清胱抑素 C均明顯升高,且兩者比值接近1.0,為腎源性胸水(r=0.954),而非其他原因所致的胸水。腎功能不全患者合并胸水,若為滲出液,兩者均明顯升高,尿毒癥性胸膜炎可能性大。兩者比值很高或很低,可以排除腎源性胸水的診斷。
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