營養(yǎng)缺陷型的鑒定方法
(1)營養(yǎng)缺陷型菌株的鑒定 營養(yǎng)缺陷型的鑒定方法通常有以下兩種:一個培養(yǎng)皿上加一種營養(yǎng)物質(zhì),測定許多缺陷型菌株對該種生長因子的缺陷情況;在同一培養(yǎng)皿上測定一種缺陷型菌株對許多生長因子的需求情況,稱生長譜測定。ELISA試劑盒營養(yǎng)缺陷型菌株的鑒定步驟包括測定缺陷型菌株所需生長因子類別;測定缺陷型菌株在該大類中具體需要哪種生長因子;進一步用單一生長因子進行復證試驗。
①缺陷型類別的測定通常以下列物質(zhì)代表氨基酸、維生素、核酸堿基:氨基酸混合物、酪素水解物或蛋白胨代表氨基酸組;酵母浸出液,其中氨基酸、維生素、嘌呤、嘧啶都有;維生素混合物,代表維生素組;核酸堿基混合物或用酵母核酸(用o.1%堿水解液),代表嘌呤、嘧啶類。
將待測微生物的菌懸液加到MM中制成平板,凝固后分別用圓濾紙片沾上以上四類物質(zhì),覆于平板標定的位置上,培養(yǎng)后觀察濾紙片周圍生長情況。根據(jù)出現(xiàn)混濁的生長圈可以初步確定缺陷型所需生長因子屬于哪一大類。ELISA試劑盒
②缺陷型所需生長因子的測定通常采用分組測定法。即將21種氨基酸組合6組,每6種氨基酸歸一組;或?qū)?5種維生素組臺5組,每5種維生素歸一組。將營養(yǎng)缺陷型菌株和基本培養(yǎng)基混合制成平板,把5組或6組生長因子直接點到同一平板上,或用濾紙片沾取覆于平板上。培養(yǎng)后觀察生長圈,確定該營養(yǎng)缺陷型菌株缺陷的生長因子。
上述方法是測定少數(shù)幾個營養(yǎng)缺陷型菌株時常用的方法。如要測定幾十個或上百個營養(yǎng)塊陷型菌株時,可用在一個平皿中加一種或一組生長因子的方法。該法只能鑒別單缺菌株。如要鑒別雙缺或多缺菌株,可以采用在每一培養(yǎng)肛中都缺一種生長因子的方法。ELISA試劑盒
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