產(chǎn)品及特點:
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,使每個循環(huán)變得“可見”。本產(chǎn)品就是以探針法熒光定量 RT-PCR 技術(shù)為基礎(chǔ)開發(fā)的專門檢測探針法熒光定量PCR試劑盒的試劑盒。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
犬小孢子菌探針法PCR熒光定量試劑盒 | Microsporum canis | EY00P9095 |
運輸及保存: 低溫運輸,-20℃保存,保存期限為12個月。
自備試劑:樣品 RNA。
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
染料法
探針法
可進行相對,定量表達分析,定性分析,SNP檢測等
實驗報告
電泳圖 ·標準曲線
溶解曲線 ·擴增曲線
完整的實驗過程、試劑、儀器及分析報告
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使用方法
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供無傳染性的 DNA 段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個樣品,設(shè)置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是 NC(樣品制備陰性對照)??梢杂?0μL陽性對照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費贈送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝,該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板,省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做1次重復(fù),則標記N+9個PCR 管,其中N+2個用于上步得到的 N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照(用水做模板),6個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做1次重復(fù),則標記N+4 個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1個用于PCR陽性對照(用第4號管的陽性對照稀釋液做模板)。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
酸性綠3五指柑(標準品) Hex*
酸性綠 50 五指毛桃(標準品) Diphenyl Carbonate
酸性綠A西北甘草異黃酮 Dibenzyl Sulfoxide
西貝母堿(標準品) Ethylene Glycol Diphenyl Ether
西貝母堿苷(標準品) Hexadec*
西伯利亞遠志口山酮B(標準品) Oleamide
靛藍西伯利亞遠志糖A5 n-Oct*
甲基藍西伯利亞遠志糖A6 Stearamide
伊文思藍;埃文斯藍西藏棱子芹(標準品) Butyl Phthalyl Butyl Glycolate
曲利苯藍西河柳(標準品) Bis(2-ethylhexyl) Isophthalate
維多利亞藍B,堿性藍 26西紅花(標準品) Triamyl Phosphate
考馬斯亮藍R250西紅花苷II(標準品) Tris(2-chloroethyl) Phosphate
考馬斯亮藍R250西紅花苷I(標準品) Tris(1,3-dichloro-2-propyl) Phosphate
考馬斯亮藍G250西青果(標準品) Tris(2-butoxyethyl) Phosphate
考馬斯亮藍G250西(標準品) 2-Ethylhexyl Diphenyl Phosphate
犬小孢子菌探針法PCR熒光定量試劑盒雄激素受體(AR)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)金雀花堿,野靛堿 質(zhì)量規(guī)格:0.98500ML
芳香烴受體(AhR)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)金雀花堿,野靛堿 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR500ML
核因子κB受體激活因子(RANκ)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)金雀花堿,野靛堿 質(zhì)量規(guī)格:>98%,可用于細胞培養(yǎng)500ML
胃泌素(GT)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)金雀花堿,野靛堿(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR500ML
低密度脂蛋白(VLDL)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)金雀花堿,野靛堿(標準品) 質(zhì)量規(guī)格:>98,BR500ML
成纖維細胞生長因子4(FGF4)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 質(zhì)量規(guī)格:>99%500ML
成纖維細胞生長因子4(FGF4)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR500ML
成纖維細胞生長因子6(FGF6)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 質(zhì)量規(guī)格:0.98500ML