公司細胞廣泛用于國內(nèi)院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產(chǎn)品詳細介紹:
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
卵巢上皮細胞癌細胞;OV-1063 | 貼壁生長 | EY-X63847 |
細胞名稱 卵巢上皮細胞癌細胞;OV-1063
形態(tài)特性: 上皮細胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細胞源自一位57歲患有轉(zhuǎn)移性狀囊腺癌的女性,角蛋白陽性,CEA和B38.1陽性,分泌CEA和CA-125。
培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
傳代方法: 1:10傳代
傳代情況: P14
凍存條件: 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 培養(yǎng)法(-)
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冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
死亡關聯(lián)蛋白激酶1檢測試劑盒細胞名稱: 抗人fusion單抗雜交瘤細胞;1F4E6A2形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Death Associated Protein Kinase1
Copine 3檢測試劑盒細胞名稱: 抗人磷脂酰肌醇蛋白聚糖前體蛋白單抗雜交瘤細胞;3A11C7H4D5形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Copine 3
Epigen檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;IIIF9形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Epigen
T細胞受體檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;2G9B9H6A2形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣T cell receptor
白介素2受體α鏈檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;2D6C1C2C5形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣interleukin-2 receptor alpha
多聚蛋白1檢測試劑盒細胞名稱: 抗人TATAbox結(jié)合蛋白反應蛋白單抗雜交瘤細胞;1E2D6形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Recombinant Multimerin 1
α1-B-糖蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;IIB11形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣alpha-1-B Glycoprotein
G蛋白結(jié)合蛋白5檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;D7C5E2形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Guanylate binding protein 5
生精蛋白I檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;IF4B7形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Semenogelin I
HLA-DRB5檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;IE3A10C8E5形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Major Histocompatibility Complex, Class II, DR beta 5
胰羧肽酶B檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;ID7形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Carboxypeptidase B
巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶2檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;2E8E9E10F2形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣fucosyltransferase 2
抗滋養(yǎng)細胞膜抗體檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;2F1-F6形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Anti-trophoblast cell antibody
磷脂酰肌醇激酶-3催化亞基α基因檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;2F1-D4-F6形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣phosphoinositide-3-kinase catalytic alphapolypeptide gene
p110α檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;1H6形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣ptdine-3-kinase subunit p110-alpha
白介素10檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;1H8形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Interleukin 10
極低密度脂蛋白-檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;1F3形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣very low density lipoprotein cholesterol
卵巢上皮細胞癌細胞;OV-1063單咖啡酰灑石67879-58-7英文名:2-Caffeoyl-L-tartaric acid
英文別名:(2R,3R)-2-[[(E)-3-(3,4-Dihydroxyphenyl)-1-oxo-2-propenyl]oxy]-3-hydroxybutanedioic acid
CAS登錄號:67879-58-7
分子式:C13H12O9
分子量:312.23
分子結(jié)構(gòu):
外觀:白色晶體
規(guī)格:20 mg/支
純度:≥ 98%
用途:用于含量測定/鑒定/藥理實驗等。
提取來源:菊科紫錐菊屬植物紫錐菊( E chinacea pur purea ( L . ) Moench)
溶解性:可溶于、DMSO等溶劑。
熔點:1123~ 125℃
藥理藥效:有抗細菌、 抗病、 抗腫瘤、 抗真菌和抗炎活性。
貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光
有效期: 2年
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。