公司細(xì)胞廣泛用于國(guó)內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
產(chǎn)品名稱(chēng) | 生長(zhǎng)特性 | 貨號(hào) |
非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-C;Vero-HCV-C | 貼壁生長(zhǎng) | EY-X63658 |
細(xì)胞名稱(chēng) 非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-C;Vero-HCV-C
形態(tài)特性: 上皮樣細(xì)胞
生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)
特征特性: Vero-HCV-C細(xì)胞整合有丙型肝炎病毒的Core基因,能穩(wěn)定表達(dá)C蛋白,是HCV基礎(chǔ)研究的*摸型。它由武漢大學(xué)病毒學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室于2008年構(gòu)建并保存。
培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS
傳代方法: 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況: C25
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè): 陰性
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí), 以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Paniculidine C
CAS No.:97399-95-6
中文名:
分子式:C13H17NO
庚;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書(shū) 訂購(gòu)|咨詢(xún) 類(lèi)固5α還原酶2(SRD5α2) 規(guī)格: 0.1g
代鋅;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書(shū) 訂購(gòu)|咨詢(xún) 類(lèi)固5α還原酶2(SRD5α2) 規(guī)格: 0.25g
啶對(duì)照品;有報(bào)告 訂購(gòu)|咨詢(xún) 類(lèi)固生成因子1(SF1) 規(guī)格: 100mg
L谷;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書(shū) 訂購(gòu)|咨詢(xún) 類(lèi)固合成急性調(diào)節(jié)蛋白(STAR) 規(guī)格: 0.1g
煙酰;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書(shū) 訂購(gòu)|咨詢(xún) 類(lèi)(TPS) 規(guī)格: 0.25g
箭藿苷A 訂購(gòu)|咨詢(xún) 類(lèi)(TPS) 規(guī)格: HPLC≥98%;5mg
瓜子金皂苷V 訂購(gòu)|咨詢(xún) 類(lèi)(TPS) 規(guī)格: HPLC≥95%;20mg
桔梗皂苷D2 訂購(gòu)|咨詢(xún) 類(lèi)(TPS) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
介芬 訂購(gòu)|咨詢(xún) 類(lèi)(TPS) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
育亨賓 訂購(gòu)|咨詢(xún) 類(lèi)(TPS) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
(+)松蘿 訂購(gòu)|咨詢(xún) 類(lèi)β2(TPSβ2) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
白藜蘆 訂購(gòu)|咨詢(xún) 類(lèi)γ1(TPSγ1) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
格列 訂購(gòu)|咨詢(xún) 類(lèi)δ1(TPSδ1) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
突厥 訂購(gòu)|咨詢(xún) 類(lèi)脂肪酶A(LPHA) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
水甘草 訂購(gòu)|咨詢(xún) 類(lèi)粘蛋白2(ORM2) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
1羥基2,3,4,7四氧基山山 訂購(gòu)|咨詢(xún) 前B淋巴細(xì)胞基因1(VPREB1) 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg
毛地黃素 訂購(gòu)|咨詢(xún) 前B淋巴細(xì)胞基因3(VPREB3) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
雷帕 訂購(gòu)|咨詢(xún) 前動(dòng)力蛋白2(PK2) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
AMBP/Alpha 1 microglobulin α1微球蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Glyburide/Gliebenclamide
A2BP1/Fox1 共濟(jì)失調(diào)蛋白2結(jié)合蛋白1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Glyburide/Gliebenclamide
RLLM1/C14orf166 胰腺癌轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白R(shí)LLM1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Glimepiride
ABC2/C17orf71 癌增強(qiáng)蛋白2抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Glimepiride
CA8 酶相關(guān)蛋白8抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Griseofulvin;Fulcin
CAB1 鈣通道電壓依賴(lài)性β1蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Griseofulvin
CDK5RAP3 周期素依賴(lài)性激酶5激活結(jié)合蛋白C53抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Sodium hyaluronate
CENPH 著絲粒蛋白H抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Hydrocortisone
銀 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱(chēng):Silverchloride 含量:BR,97%
磺酚S 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱(chēng):ChlorosulphonphenolS 含量:CP
甲基樹(shù)脂 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱(chēng):Merrifieldresin 含量:BR
甲芴基甲酯 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱(chēng):FMOCC1 含量:BR,99%
甲甲基酯 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱(chēng):CBZCL 含量:BR,98%
亞鉑鉀 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱(chēng):Potassiumchloroplatinite 含量:FGC,98.5%
亞銠銨 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱(chēng):Ammoniumhexachloroplatinate(IV) 含量:AR,86.8%
亞明T 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱(chēng):ChloramineTtrihydrate 含量:超純,99%
酰 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱(chēng):2Chloroeth* 含量:高純
青 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱(chēng):Cloxacillinsodiumsalthydrate 含量:高純,916ug/mg
非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-C;Vero-HCV-C凍干兔血漿規(guī)格:0.5ml*10用途:用于金黃色葡萄球菌的血漿凝固酶試驗(yàn)(GB、SN標(biāo)準(zhǔn))。
瑞氏染色液規(guī)格:5ml/支*8用途:用于細(xì)菌瑞氏染色
吐溫稀釋液規(guī)格:250g用途:用于樣品制備水稀釋
UVM培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于李氏菌的增菌培養(yǎng)
1/2B5培養(yǎng)基(不含瓊脂和蔗糖)規(guī)格:250g用途:用于植物組織培養(yǎng)(不含瓊脂和蔗糖)
煌綠乳糖膽鹽肉湯(BGLB)顆粒規(guī)格:300ml/袋*10用途:用于大腸菌群、大腸桿菌的測(cè)定(GB、SN標(biāo)準(zhǔn))
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過(guò)細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái),吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。