公司細(xì)胞廣泛用于國內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實驗項目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
膀胱移行細(xì)胞癌;UM-UC-3 | 貼壁生長 | EY-X63876 |
細(xì)胞名稱 膀胱移行細(xì)胞癌;UM-UC-3
形態(tài)特性: 上皮樣;多角
生長特性: 貼壁生長
特征特性:
培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法: 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況: PN
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 陰性
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
RAS癌基因家族檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人骨髓瘤細(xì)胞;NCI-H929形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Ras-related protein Rap-1A
透明質(zhì)結(jié)合蛋白2檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 昆蟲細(xì)胞;SDM形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣 Hya]uronate binding protein 2
馬尿檢測試劑盒細(xì)胞名稱: EB病感染的人外周淋巴細(xì)胞;JVM-2形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Hippuric acid
Smad同源物1檢測試劑盒細(xì)胞名稱: /人胚肺成纖維細(xì)胞;2BS形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣Smad1
裂殖子表面蛋白1檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 昆蟲細(xì)胞;BGE1-L15B形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Merozoite Surface protein-1
甲狀腺免疫球蛋白檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人外周淋巴細(xì)胞;U266B1形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Thyroglobulin
軟骨間層蛋白2檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠骨髓纖維原細(xì)胞;M2-10B4形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣Cartilage intermediate layer protein 2
隱球菌檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人結(jié)腸腺癌細(xì)胞;SW48形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣crypto coccus antigen
B類清道夫受體2檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人肺腺癌細(xì)胞;NCI-H441形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣Scavenger Receptor Class B Member 2
白細(xì)胞介素28B檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人外周血淋巴細(xì)胞;CCRF-SD形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣Interleukin 28B
肽基精氨脫亞氨酶4檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人皮膚T淋巴瘤細(xì)胞;Hut78形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣protein-arginine deiminase type-4
肝X受體β檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人胰腺癌細(xì)胞;PANC-1形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣Liver X Receptor β
趨化因子c-c-基元配體19檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 小鼠肝癌細(xì)胞;Hepa1-6[Hepa1-6]形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣Chemokine C-C-Motif Ligand 19
α-pro-GDNF檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人惡性黑色素瘤細(xì)胞;A375[A-375]形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣α-pro-GDNF
β-pro-GDNF檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 大鼠嗜性粒細(xì)胞性白血病細(xì)胞;RBL-1形態(tài)特性: 淋巴母細(xì)胞樣β-pro-GDNF
豬肉銚蟲檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人橫紋肌肉瘤細(xì)胞;A-204形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣Taenia solium
著絲粒蛋白檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 人黑色素瘤細(xì)胞;A875形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣centromere proteins
膀胱移行細(xì)胞癌;UM-UC-3脫水長春38390-45-3英文名:3',4'-Anhydrovinblastine
英文別名:3',4'-Didehydroisoleurosine
CAS登錄號:38390-45-3
分子式:C46H56N4O8
分子量:792.96
分子結(jié)構(gòu):
外觀:白色晶體
規(guī)格:20 mg/支
純度:≥ 98%
用途:用于含量測定/鑒定/藥理實驗等。
提取來源:夾竹桃科植物長春花中提取修飾
溶解性:可溶于性水溶液,不溶于。
藥理藥效:能干擾增殖細(xì)胞紡錘體的形成,使有絲分裂停止于中期。并有免疫抑制作用。
貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光
有效期: 2年
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。