產(chǎn)品及特點(diǎn):
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,使每個(gè)循環(huán)變得“可見”。本產(chǎn)品就是以探針法熒光定量 RT-PCR 技術(shù)為基礎(chǔ)開發(fā)的專門檢測探針法熒光定量PCR試劑盒的試劑盒。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
唇飾帶線蟲探針法PCR熒光定量試劑盒 | Cheilospirura hamulosa | EY00P8804 |
運(yùn)輸及保存: 低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限為12個(gè)月。
自備試劑:樣品 RNA。
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
染料法
探針法
可進(jìn)行相對,定量表達(dá)分析,定性分析,SNP檢測等
實(shí)驗(yàn)報(bào)告
電泳圖 ·標(biāo)準(zhǔn)曲線
溶解曲線 ·擴(kuò)增曲線
完整的實(shí)驗(yàn)過程、試劑、儀器及分析報(bào)告
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使用方法
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供無傳染性的 DNA 段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個(gè)樣品,設(shè)置N+2個(gè)提取,多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽性對照),一個(gè)是 NC(樣品制備陰性對照)??梢杂?0μL陽性對照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費(fèi)贈送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝,該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板,省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9. 如果做定量分析并且只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR 管,其中N+2個(gè)用于上步得到的 N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對照(用水做模板),6個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+4 個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1個(gè)用于PCR陽性對照(用第4號管的陽性對照稀釋液做模板)。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
N-叔丁氧羰基-N'-芴甲氧羰基-D-2,3-二氨基酸溴化溴代膽酰 Bromocholine Bromide >99.0%(T) Clofentezine
5-氯-1H-吡咯并[3,2-C]吡啶4-氯芐溴 4-Chlorobenzyl Bromide >97.0%(GC) Clofentezine solution
N-芐氧羰基-去甲托品酮4-氯芐溴 4-Chlorobenzyl Bromide >97.0%(GC) Clofentezine solution
2-溴-3-甲酸甲酯1-溴-3-氯烷 1-Bromo-3-chloropropane >99.0%(GC) Carboxine
3-苯甲氧基-5-溴吡啶1-溴-3-氯烷 1-Bromo-3-chloropropane >99.0%(GC) Cyclohexanol
3-甲酰肼溴氯酚藍(lán) Bromochlorophenol Blue Dacthal
*正酯.鹽酸鹽1-溴-2-氯乙烷 1-Bromo-2-chloroethane >98.0%(GC) 1-Chlorooctane
Fmoc-L-八氫吲哚-2-甲酸1-溴-2-氯乙烷 1-Bromo-2-chloroethane >98.0%(GC) Dodecane
拉坦前列腺素2-溴乙 2-Bromoethanol >95.0%(GC) Bismuth solution
雙(三苯基膦)二羰基鎳2-溴乙 2-Bromoethanol >95.0%(GC) Copper solution
1,4-二(2-苯乙烯)苯2-溴乙烷磺酸鈉 Sodium 2-Bromoethanesulfonate >97.0%(T) Copper solution
1-Boc-5-氯吲哚2-溴乙烷磺酸鈉 Sodium 2-Bromoethanesulfonate >97.0%(T) Cobalt standard
4,7-二溴-5,6-二氟-苯并噻二唑溴乙烷 Bromoethane >99.0%(GC) Chromium Standard
5-溴-2-甲基*乙酯溴乙烷 Bromoethane >99.0%(GC) Erbium standard
DL-3-氨基-3-(2-萘基)酸1-溴十二烷 1-Bromododecane >98.0%(GC) Gold solution
唇飾帶線蟲探針法PCR熒光定量試劑盒金屬硫蛋白1(MT1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)* 質(zhì)量規(guī)格:>99%500 ml
干擾素γ(IFNγ)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)* 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品1ml(500X)
白介素6(IL6)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)*(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,進(jìn)分6次/盒
磷酸烯式酮酸羧激酶1(PCK1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)* 質(zhì)量規(guī)格:>99%,II晶型
腎上腺髓質(zhì)素(ADM)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)* 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,I晶型
腎上腺髓質(zhì)素(ADM)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)* 質(zhì)量規(guī)格:>99%3×1ml
白介素2受體β(IL2Rβ)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)*(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%
白介素2受體β(IL2Rβ)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)鹽酸* 質(zhì)量規(guī)格:>98%