細胞名稱 小鼠骨肉瘤成骨細胞;K7M2wt[K7M2-WT]
形態(tài)特性:
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 抗原表達:CD31陽性;產物:八因子、整合唾液酸蛋白(BSP)、biglyan、decorrin、villin2(ezrin)。骨唾液酸蛋白,biglyan,decorrin,和osteopontin的表達顯示其骨家族細胞特性。
培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)優(yōu)質胎牛血清,10%
傳代方法: 消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
傳代情況: PN
凍存條件: 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 陰性
公司細胞廣泛用于國內院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產品詳細介紹:
產品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
小鼠骨肉瘤成骨細胞;K7M2wt[K7M2-WT] | 貼壁生長 | EY-X63874 |
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冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
粘膜相關上皮趨化因子檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;HumanIgM形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣mucosae associated epithelia chemokine
6-硫羥基褪黑素檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;HumanIgG形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣6-hydroxymelatonin sulfate
前動力蛋白2檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;HumanP16形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Prokineticin 2
氮末端腦鈉肽前體檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;IKBKB形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣N-terminal pro-BNP
維生素H受體檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;HPRT形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Vitamin H receptor
再生胰島衍生蛋白1β檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;IFN-gamma形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Regenerating Islet Derived Protein 1 Beta
再生胰島衍生蛋白3β檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;IGF1R形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Regenerating Islet Derived Protein 3 Beta
絲裂原激活蛋白激酶激酶6檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;IKBKE形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣mitogen activated protein kinase 6
孤兒G蛋白偶聯(lián)受體檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;IL-11形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣orphan G protein-coupled receptors
葉受體自身IgG抗體檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;IL-16形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Folate receptor autoantibodies IgG antibody
葉受體自身IgM抗體檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;IL-10形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Folate receptor autoantibodies IgM antibody
葉受體自身IgA抗體檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠淋巴瘤細胞;IL-6形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Folate receptor autoantibodies IgA antibody
D-精氨檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;InfluenzaAvirusNucleoprotein形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣D-Arginine
酰基輔酶A脫氫酶檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠L細胞;IL-1a形態(tài)特性: 成纖維細胞樣acyl-coenzyme A dehydrogenase
極長鏈脂酰基coA脫氫酶檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;IL-8形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣very long chain acyl-COA dehydrogenase
腺苷環(huán)化酶關聯(lián)蛋白2檢測試劑盒細胞名稱: 鼠B淋巴瘤細胞;6A8/6F10/1A6形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Cyclase Associated Protein 2
羧肽酶E檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;INHA(Inhibinalpha)形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Carboxypeptidase E
小鼠骨肉瘤成骨細胞;K7M2wt[K7M2-WT]長春新57-22-7英文名:Vincristine
英文別名:22-oxo-vincaleukoblastine
CAS登錄號:57-22-7
分子式:C46H56N4O10
分子量:824.96
分子結構:
外觀:白色針晶
規(guī)格:20 mg/支
純度:≥ 98%
用途:用于含量測定/鑒定/藥理實驗等。
提取來源:夾竹桃科植物長春花
溶解性:溶于和乙醇。
熔點:211~216℃
旋光度:+42°()
藥理藥效:可用于治療急性白血病,尤其是兒童急性白血病,對急性淋巴細胞白血病療效顯著。惡性淋巴瘤。細胞腫瘤。小細胞肺癌,尤文肉瘤、腎母細胞瘤、神經母細胞瘤。癌、慢性淋巴細胞白血病、消化道癌、黑色素瘤及多發(fā)性骨髓瘤等。
貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光
有效期: 2年