公司細(xì)胞廣泛用于國(guó)內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
產(chǎn)品名稱(chēng) | 生長(zhǎng)特性 | 貨號(hào) |
前列腺上皮細(xì)胞;RWPE-1 | 貼壁生長(zhǎng) | EY-X63649 |
細(xì)胞名稱(chēng) 前列腺上皮細(xì)胞;RWPE-1
形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)
特征特性: 該細(xì)胞1996年由WebberMM建立。
培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS
傳代方法: 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況: C5
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè): 陰性
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí), 以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
1-Methoxycarbonyl-β-carboline
CAS No.:3464-66-2
中文名:
分子式:C13H10N2O2
牛大力(美麗崖豆藤) 訂購(gòu)|咨詢(xún) 骨橋素(OPN) 規(guī)格: 2g
孕(P) 訂購(gòu)|咨詢(xún) 骨橋素(OPN) 規(guī)格: 3支/套,0.5ml/支
啤酒酵母菌 訂購(gòu)|咨詢(xún) 骨橋素(OPN) 規(guī)格: 凍干粉
阿莫林系統(tǒng)適用性對(duì)照品 訂購(gòu)|咨詢(xún) 骨橋素(OPN) 規(guī)格: 30mg
甘雙唑 訂購(gòu)|咨詢(xún) 骨橋素(OPN) 規(guī)格: 100mg/支
醋己鋅 訂購(gòu)|咨詢(xún) 骨橋素(OPN) 規(guī)格: 100mg
醋纖維素 訂購(gòu)|咨詢(xún) 骨調(diào)蛋白(OMD) 規(guī)格: 200mg
紅花 訂購(gòu)|咨詢(xún) 骨粘連蛋白(ON) 規(guī)格: 0.5g
那唑 訂購(gòu)|咨詢(xún) 骨粘連蛋白(ON) 規(guī)格: 50mg
訂購(gòu)|咨詢(xún) 骨粘連蛋白(ON) 規(guī)格: 50mg
山柰 訂購(gòu)|咨詢(xún) 骨膜蛋白(POSTN) 規(guī)格: 0.5g
甾 訂購(gòu)|咨詢(xún) 骨膜蛋白(POSTN) 規(guī)格: 20mg
綠萍 訂購(gòu)|咨詢(xún) 骨骼肌肌動(dòng)蛋白α1(ACTα1) 規(guī)格: 2g
阿利坦酯雜質(zhì)C 訂購(gòu)|咨詢(xún) 骨骼肌肌動(dòng)蛋白α1(ACTα1) 規(guī)格: 20mg
訂購(gòu)|咨詢(xún) 骨骼肌快肌肌鈣蛋白I(TNNI2) 規(guī)格: 500mg
杠柳苷 訂購(gòu)|咨詢(xún) 骨骼肌快肌肌鈣蛋白I(TNNI2) 規(guī)格: 20mg/支
甜菜 訂購(gòu)|咨詢(xún) 骨骼肌快肌肌鈣蛋白I(TNNI2) 規(guī)格: 50mg
鞣小檗 訂購(gòu)|咨詢(xún) 骨骼肌特異性受體酪激酶(MUSK) 規(guī)格: 50mg
CTBP2 C末端結(jié)合蛋白2抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Lapatinib base
PTGER1 前列腺素EP1受體抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Levonorgestrel
phosphoPLB/phospholamban(phospho Ser16+Thr17) 心臟蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Levonorgestrel
ASM/Acid sphingomyelinase 性神經(jīng)鞘脂酶抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Levosulpiride
IL1 Beta/IL1B 白介素1β抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Levosulpiride
BFAR/RNF47 環(huán)指蛋白47抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Levothyroxine Sodium
WISP1 Wnt1信號(hào)通路蛋白1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Lidocaine
Annexin A8 膜粘連蛋白8抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Lidocaine
卡波樹(shù)脂 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱(chēng):PolyacrylicresinⅢ 含量:AR,98%
卡芥 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱(chēng):BU 含量:親合層析純,1.95ug/ml
卡爾費(fèi)休試劑(含吡啶) 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱(chēng):KarlFlscherreagent 含量:BR,94%
卡拉膠類(lèi)型III 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱(chēng):KCarrageenanKarraType 含量:AR,98%
卡拉膠類(lèi)型V 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱(chēng):ICarrageenanIOTAType 含量:BR,98%
卡氏試液 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱(chēng):KarlFlscherreagent 含量:CP,99%
抗壞血 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱(chēng):VC 含量:顯色劑,80%
抗 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱(chēng):Zeocin 含量:USP級(jí),900050mcg/mg
抗痛素 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱(chēng):Antipaindihydrochloride 含量:生物技術(shù)級(jí),600u/mg
鈧 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱(chēng):Scandiumoxide 含量:BR,98%
前列腺上皮細(xì)胞;RWPE-1標(biāo)準(zhǔn)II號(hào)營(yíng)養(yǎng)瓊脂規(guī)格:250g用途:細(xì)菌計(jì)數(shù)、不含糖,可作血瓊脂基礎(chǔ)和傳代用
*瓊脂培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于紡織品微真菌影響評(píng)價(jià)試驗(yàn)
沙氏瓊脂培養(yǎng)基規(guī)格:BR250g詳情介紹
L-規(guī)格:10g用途:微生物指示劑
麥康凱瓊脂(MAC)規(guī)格:250g用途:用于腸道致病菌的選擇性分離培養(yǎng)
瓊脂培養(yǎng)基J規(guī)格:250g用途:用于沙門(mén)氏菌選擇性分離培養(yǎng)
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過(guò)細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái),吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。