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產(chǎn)品名稱 | 小鼠淋巴結(jié)血管上皮細胞;2F-2B |
生長特性 | 貼壁生長 |
貨號 | EY-X63865 |
細胞名稱 小鼠淋巴結(jié)血管上皮細胞;2F-2B
形態(tài)特性: 上皮樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性:
培養(yǎng)條件:
傳代方法:
傳代情況:
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 陰性
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產(chǎn)品特點:
1、 使用方便:不需昂貴設(shè)備。
2、 可以處理各種細菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程:
1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生的細胞,以0.25%消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生的細胞用消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。
分泌型磷脂酶A2-X檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞;IIC4形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣secreted phospholipase A2-X
Spexin檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞;1B8形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Spexin
唾液催產(chǎn)素檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞;A8形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Salivary oxytocin
β2巨球蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞;S-71-9形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣β2 macroglobulin
胸腺表達趨化因子檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞;S-163-6形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣thymus expressed chemokine
再生胰島衍生蛋白4檢測試劑盒細胞名稱: 豬腎傳代細胞;PK15-B1形態(tài)特性: 上皮細胞樣Regenerating Islet-derived 4 Alpha;pancreatic Stone Protein;pancreatic Thread Protein
p物質(zhì)前提檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞;HTK形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣pro-SP
EB病包膜糖蛋白gp350抗體檢測試劑盒細胞名稱: 荷斯坦奶牛胎兒成纖維細胞;HumanCellline1D3形態(tài)特性: 成纖維細胞樣Epstein-Barr virus gp350 antibody
MG29抗體檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞;AMVP形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣MG29 antibody
組胺釋放因子檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞;ACV1形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Histamine Releasing Factor
map2k5檢測試劑盒細胞名稱: 人胚腎293細胞;HIK293ar形態(tài)特性: 上皮細胞樣map2k5
支原體IgG抗體檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞;CS-H形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Mycoplasma IgG antibody
衣原體抗體IgG檢測試劑盒細胞名稱: 人肺腺癌放后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移細胞;HumanCellline4D33形態(tài)特性: 上皮細胞樣Chlamydia antibody IgG
肌醇抗體檢測試劑盒細胞名稱: 人肺腺癌未經(jīng)放細胞;HumanCellline1D356形態(tài)特性: 上皮細胞樣Inositol antibody
Kruppel樣因子7檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞;Z1A5形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Kruppel Like Factor 7
甲胎蛋白異質(zhì)體2檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞;H2H5形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Alpha-Fetoprotein Lens Culinaris Agglutinin2
空腹血糖檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞;H1H8形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣gluose
小鼠淋巴結(jié)血管上皮細胞;2F-2B紫菀10376-48-4英文名:Shionone
英文別名:2(1H)-Chrysenone,hexadecahydro-1,4b,6a,8,10a,12a-;hexamethyl-8-(4-methyl-3-pentenyl)-,(1R,4aS,4bS,6aS,8R,10aR,10bS,12aS)-;
CAS登錄號:10376-48-4
分子式:C30H50O
分子量:426.72
分子結(jié)構(gòu):
外觀:白色粉末
規(guī)格:20 mg/支
純度:≥ 98%
用途:用于含量測定/鑒定/藥理實驗等。
提取來源:菊科植物紫菀 Aster tataricus L. f.的干燥根及根莖
溶解性:可溶于、等有機溶劑,不溶于水。
藥理藥效:潤肺下氣,消痰止咳。
貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光
有效期: 2年