公司細(xì)胞廣泛用于國內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實驗項目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
中國倉鼠卵巢細(xì)胞;TPO-CHO-I | 貼壁生長 | EY-X63690 |
細(xì)胞名稱 中國倉鼠卵巢細(xì)胞;TPO-CHO-I
形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細(xì)胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件: DMEM/F12(1:1):Ham'sF12/DMEMedium(DMEH-16/F-1250%Mixturew/oHEPES,withNEAAMedium)10%FBS
傳代方法: 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況: C3
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 陰性
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Harmine
CAS No.:442-51-3
中文名:去氫駱駝蓬
分子式:C13H12N2O
毛蕊異黃苷 訂購|咨詢 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白6(IGFBP6) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/vial
菊苣 訂購|咨詢 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白6(IGFBP6) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/vial
斯皮諾素 訂購|咨詢 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白6(IGFBP6) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg/vial
6,7二羥基香 訂購|咨詢 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白6(IGFBP6) 規(guī)格: ≥98%,20mg/vial
肌 訂購|咨詢 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白7(IGFBP7) 規(guī)格: 20mg
積雪草苷 訂購|咨詢 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白7(IGFBP7) 規(guī)格: 20mg
白鮮 訂購|咨詢 胰島素樣生長因子不穩(wěn)定亞基(IGFALS) 規(guī)格: 10mg
甘油三油酯 訂購|咨詢 胰島素樣蛋白3(INSL3) 規(guī)格: 20mg
瓜子金皂苷 訂購|咨詢 胰島素樣蛋白3(INSL3) 規(guī)格: 20mg
β胡蘿卜素 訂購|咨詢 胰島素樣蛋白3(INSL3) 規(guī)格: 20mg
黃芪皂苷I 訂購|咨詢 胰島素樣蛋白5(INSL5) 規(guī)格: 10mg
和厚樸 訂購|咨詢 胰島素樣蛋白5(INSL5) 規(guī)格: 20mg
桑根C 訂購|咨詢 胰島素樣蛋白6(INSL6) 規(guī)格: 20mg
訂購|咨詢 胰脂肪酶(PL) 規(guī)格: 20mg
25羥基原人參二 訂購|咨詢 胰脂肪酶(PL) 規(guī)格: 10mg
遼東楤木皂苷Ⅹ 訂購|咨詢 胰脂肪酶(PL) 規(guī)格: 20mg
番茄紅素 訂購|咨詢 胰高血糖素(GC) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
去芹菜糖桔梗皂苷D 訂購|咨詢 胰高血糖素(GC) 規(guī)格: 10mg
Caspase 5 半胱蛋白酶蛋白5抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Ranitidine HCl
FEM1A 前列腺素E受體4相關(guān)蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Fluorescein disodium salt
LANPL 富含亮樣性核蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml DLuciferin sodium salt
MALT1 粘膜相關(guān)淋巴組織淋巴瘤轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml 2',7'Dichlorofluorescein Sodium Salt
NALP12 NALP12抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Azure I
NALP6 富含亮重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Azure II
NLRP7 富含亮重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Azure A chloride
NLRP9 富含亮重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白9抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Triclosan
司班20 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Span20 含量:BS
司班40 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Span40 含量:BR
司班60 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Span60 含量:BS,85%
司班80 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Span80 含量:AR,85%
司班85 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Span85 含量:AR,87%
絲脂 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:phosphatidylserine 含量:BR,20%
四基硼 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:NaTBP 含量:CP,95%
四硼鉀 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Potassiumtetraphenylborate 含量:AR,98%
四銨 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Tetrapropylammoniumbromide 含量:BR,98%
四醋鉛 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Lead(IV)acetate 含量:CP,98.5%
中國倉鼠卵巢細(xì)胞;TPO-CHO-IMUG快速鑒定大腸試劑規(guī)格:5ml*10支/盒用途:用于快速鑒定大腸桿菌
可溶性淀粉瓊脂規(guī)格:250g用途:用于微生物的淀粉水解試驗
煌綠乳糖膽鹽肉湯BGLB(含小倒管)規(guī)格:10ml*20支/包用途:用于大腸菌群、大腸桿菌的測定
乳糖發(fā)酵管規(guī)格:1ml*20用途:用于生化鑒定
BPLS瓊脂規(guī)格:250g用途:用于各種標(biāo)本中沙門氏菌選擇性分離培養(yǎng)
3%化鈉MR-VP培養(yǎng)基規(guī)格:1ml/支20用途:用于副溶血性弧菌的甲基紅和V-P試驗(GB標(biāo)準(zhǔn))
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。