公司細胞廣泛用于國內(nèi)院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產(chǎn)品詳細介紹:
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
乳腺癌細胞;BC-023 | 貼壁生長 | EY-X63672 |
細胞名稱 乳腺癌細胞;BC-023
形態(tài)特性: 上皮樣細胞
生長特性: 貼壁生長
特征特性: BC-023乳腺癌細胞由中國人種乳腺癌組織經(jīng)培養(yǎng)選擇獲得,于2007年建立鑒定,是乳腺癌基礎研究和臨床研究的材料。
培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS;50u/ml試劑胰島素
傳代方法: 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況: C5
凍存條件: 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 陰性
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冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Stephanine
CAS No.:517-63-5
中文名:千金藤
分子式:C19H19NO3
對羥基桂 訂購|咨詢 神經(jīng)膠質(zhì)纖維性蛋白(GFAP) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
醛 訂購|咨詢 神經(jīng)膠質(zhì)纖維性蛋白(GFAP) 規(guī)格: HPLC≥98%;0.5ml
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王不留行黃苷 訂購|咨詢 神經(jīng)膠質(zhì)纖維性蛋白(GFAP) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
小豆蔻明 訂購|咨詢 神經(jīng)膠質(zhì)蛋白(GLDN) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
棕矢素 訂購|咨詢 神經(jīng)疾病靶標酯酶(NTE) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
黃芪多糖 訂購|咨詢 神經(jīng)調(diào)節(jié)肽U受體1(NMUR1) 規(guī)格: HPLC≥70%;20mg
羊藿次苷I 訂購|咨詢 神經(jīng)調(diào)節(jié)素1(NRG1) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
熊去氧膽 訂購|咨詢 神經(jīng)調(diào)節(jié)素1(NRG1) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
L脯 訂購|咨詢 神經(jīng)調(diào)節(jié)素1(NRG1) 規(guī)格: HPLC≥99%;200mg
11羥基柳杉 訂購|咨詢 神經(jīng)調(diào)節(jié)素2(NRG2) 規(guī)格: HPLC≥98%;5mg
二酰菊苣 訂購|咨詢 神經(jīng)調(diào)節(jié)素2(NRG2) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
澳洲茄邊 訂購|咨詢 神經(jīng)調(diào)節(jié)素3(NRG3) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
桑皮苷C 訂購|咨詢 神經(jīng)調(diào)節(jié)素4(NRG4) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
灰氈毛忍冬皂苷 訂購|咨詢 神經(jīng)調(diào)節(jié)素4(NRG4) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
香葉木素7O葡萄糖苷 訂購|咨詢 神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT3) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
左旋 訂購|咨詢 神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT3) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
皂苷A 訂購|咨詢 神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT3) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
ZDHHC17/HIP14 NFκB激活蛋白205抗體 現(xiàn)貨供應 0.1ml Carfilzomib/PR171
FANK1 HSD13蛋白抗體 現(xiàn)貨供應 0.1ml CEP18770
Destrin 19/ADF 肌動蛋白解聚因子19抗體 現(xiàn)貨供應 0.1ml Managlinat Dialanetil/CS917
Neurotensin/NTS 神經(jīng)緊張素抗體 現(xiàn)貨供應 0.1ml Nolatrexed dihydrochloride
NESG1/CCDC19 鼻咽上皮細胞特異性蛋白1抗體 現(xiàn)貨供應 0.1ml PD 173074
FOXL2 小瞼裂綜合征蛋白BPES抗體 現(xiàn)貨供應 0.1ml PH797804
XPC DNA補充修復XPC細胞蛋白抗體 現(xiàn)貨供應 0.1ml Tifluadom/KC5103
EPHA10 酪蛋白激酶受體A10抗體 現(xiàn)貨供應 0.1ml Valacyclovir HCl
偏硼鎂 進口、國產(chǎn) 英文名稱:Magnesiumboratemonohydrate 含量:BR,98%
偏硼鉛 進口、國產(chǎn) 英文名稱:Lead(II)borate 含量:AR,98.5%
偏銻 進口、國產(chǎn) 英文名稱:Sodiumantimonate 含量:CP,98.5%
嘌呤核苷酶 進口、國產(chǎn) 英文名稱:Purinenucleosidephosphorylase 含量:BR,50u/ul
品紅 進口、國產(chǎn) 英文名稱:Fuchsinbasic 含量:生物技術級,65%,柑橘來源
蘋果 進口、國產(chǎn) 英文名稱:DLMalicacid 含量:CP,99%
蘋果脫氫酶 進口、國產(chǎn) 英文名稱:MDH 含量:BR,300u/mg,液體
葡甲 進口、國產(chǎn) 英文名稱:Meglumine 含量:高純,98%
葡聚糖酶 進口、國產(chǎn) 英文名稱:βDextranase 含量:BR,4000BAEEu/mg,大豆
葡糖 進口、國產(chǎn) 英文名稱:DGlucosamineHC1 含量:高純,98%
乳腺癌細胞;BC-023BCYE瓊脂基礎規(guī)格:可溶性焦磷鐵用途:0.025g每支含量
GC瓊脂規(guī)格:250g用途:用于淋球菌的分離培養(yǎng)
乳桿菌肉湯培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于乳桿菌增菌培養(yǎng)
硫乙醇鹽流體培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于藥品,生物制品無菌試驗,培養(yǎng)基,厭氧菌
李氏菌增菌肉湯規(guī)格:萘啶用途:4.0mg
伊紅美藍瓊脂培養(yǎng)基(Levine)規(guī)格:250g用途:弱選擇性培養(yǎng)基、用于分離腸道致病菌,特別是大腸桿菌
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。