操作流程示意:
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大鼠羧甲基賴(lài)氨酸ELISA檢測(cè)試劑盒品牌產(chǎn)品別名:大鼠羧甲基賴(lài)氨酸(CML)ELISA檢測(cè)試劑盒 價(jià)格低,質(zhì)量有保證。產(chǎn)品種類(lèi)多,主要包括:人,大鼠,小鼠,兔,豬,犬,雞,猴,牛,馬,植物等ELISA試劑盒 英文名稱(chēng):Rat Carboxymethyl lysine,CML ELISA Kit 規(guī)格: 48T/96T。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 價(jià)格 |
大鼠羧甲基賴(lài)氨酸ELISA檢測(cè)試劑盒品牌 | Rat Carboxymethyl lysine,CML ELISA Kit | 來(lái)電可享受優(yōu)惠 |
組成:
(1)大鼠羧甲基賴(lài)氨酸ELISA檢測(cè)試劑盒品牌結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液;
(2)洗滌液,在板式ELISA中,常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水;
(3)酶標(biāo)記的抗原或抗體(結(jié)合物);
(4)酶的底物;
(5)陰性對(duì)照品和陽(yáng)性對(duì)照品(定性測(cè)定中),elisa試劑盒參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清(定量測(cè)定中);
(6)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑)
樣本處理及要求:
1. 大鼠羧甲基賴(lài)氨酸ELISA檢測(cè)試劑盒品牌血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。
仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟:
1、大鼠羧甲基賴(lài)氨酸ELISA檢測(cè)試劑盒品牌標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支,依次進(jìn)行稀釋數(shù)倍。
2、加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3、溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4、配液:將30倍(48T 的20 倍)濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6、加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7、溫育:操作同3。
8、洗滌:操作同5。
9.在確保酶標(biāo)板底無(wú)水滴及孔內(nèi)無(wú)氣泡后,立即用酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)測(cè)量各孔的光密度 (O.D. 值)。
10、顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.
11、終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
12、測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。
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鈉,英文名或英文縮寫(xiě):D-(+)-Tartaric acid diwo7ium salt,級(jí)別:BR,98%,規(guī)格:20毫克
Middlebrook7H9Broth 500g原裝 BD 271310
2-Nonanone甲基庚基甲酮1克色標(biāo),99.5%
二本同-4,4’-二羧醋 BqNZOPHqNONq-4,4'-DICcRBOXYLIC cCID 964-68-1
D-ValineD-2-基-3-甲基戊酸5克BR,99%
大鼠羧甲基賴(lài)氨酸ELISA檢測(cè)試劑盒品牌偶氮二環(huán)己基甲,英文名或英文縮寫(xiě):VAZO88,級(jí)別:AR,規(guī)格:500毫克
8005-2-5色素醇溶Solvent black 7
毒莠定,英文名或英文縮寫(xiě):Picloram,級(jí)別:高純,99%,規(guī)格:10U
燦爛黃 Brilliant Yellow,70% 3051-11-4 5G 通用試劑
D-木同糖.(2-8℃) 95% D-XYLULOSq 221-84-8