細(xì)胞名稱 胚胎干細(xì)胞；SH.hEXl(46.xx)
形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細(xì)胞屬保藏，其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
傳代方法: 1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況: C5
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 陰性
公司細(xì)胞廣泛用于國內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究，作為實驗項目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹：
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
胚胎干細(xì)胞；SH.hEXl(46.xx) | 貼壁生長 | EY-X63701 |
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過細(xì)胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細(xì)胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來，吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時間過長，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落， 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉淀細(xì)胞，盡量去除細(xì)胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
Leuconolam
CAS No.：93710-27-1
中文名：
分子式：C19H22N2O3
1,5O二?？鼘?訂購|咨詢 基四氫葉環(huán)脫氫酶(FTCD) 規(guī)格： 20mg
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五味子酯 訂購|咨詢 高爾基體蛋白A4(GOLGA4) 規(guī)格： HPLC≥98%，20mg/vial
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楊梅素 訂購|咨詢 高爾基體蛋白A7(GOLGA7) 規(guī)格： HPLC≥98%；20mg/vial
灰氈毛忍冬皂苷 訂購|咨詢 高爾基體蛋白A8家族成員A(GOLGA8A) 規(guī)格： HPLC≥98%；20mg/vial
Mkl1/MRTFA myocardin相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Dioscin
Dlx5 同源轉(zhuǎn)錄因子DLX5抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Diosgenin
FXR2 脆性X相關(guān)蛋白2抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Diosgenin
PLC β1/Phospholipase C beta 1 酯酶Cβ1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Naringenin
EHZF/ZN521 鋅指蛋白521抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Naringenin
hnRNP R 異質(zhì)性核糖核蛋白R 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Jatrorrhizine
AKAP5 A激酶錨定蛋白5抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Quercetin dihydrate
CL3/CLC3 離子通道蛋白3抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Quercetin
鐵蛋白（馬脾） 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:HSF 含量:BR，100u/mg
鐵 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Ironpowder 含量:AR，99%
銅 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Copper 含量:BR，99.5%
亢 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:R41400 含量:BR
頭孢Ⅳ 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Cephalexinmonohydrate 含量:BR，500u/mg
V 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Cefazolinsodiumsalt 含量:USP級
頭孢 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:CTX 含量:BR，17Taboru/mg
噻肟 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Ceftriaxonesodium 含量:BR，27.5u/mg
透鈣石 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Calciumhydrogenphosphatedihydrate 含量:CP，98%
土當(dāng)歸 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Oleanolicacid 含量:CP，600目
胚胎干細(xì)胞；SH.hEXl(46.xx)維生素C（抗壞血）規(guī)格：10g詳情介紹
雙岐桿菌生化用基礎(chǔ)培養(yǎng)基規(guī)格：250g用途：用于雙歧桿菌生化試驗用基礎(chǔ)培養(yǎng)基
GVPC瓊脂基礎(chǔ)規(guī)格：GVPC瓊脂培養(yǎng)基添加劑詳情介紹
醛類中和劑管規(guī)格：9ml*20支/包用途：用于消劑的中和
幽門螺旋桿菌培養(yǎng)基（液體）規(guī)格：250g用途：用于幽門螺旋桿菌的培養(yǎng)
蠟樣芽孢桿菌顯色平板（9cm）規(guī)格：10個/包詳情介紹
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