細(xì)胞名稱 臍靜脈細(xì)胞融合細(xì)胞；EA.hy926
形態(tài)特性: 內(nèi)皮細(xì)胞
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 在PEG脅迫下，將原代培養(yǎng)的人臍靜脈細(xì)胞與抗硫的A549株融合，構(gòu)建了人臍靜脈細(xì)胞株,EA.hy926。融合子在HAT培養(yǎng)基上生長并以八因子相關(guān)抗原篩選。EA.hy926已經(jīng)過100次以上的群體倍增(PDLs)。電鏡照片顯示W(wǎng)eibel-Palade小體的細(xì)胞質(zhì)分布以及組織特異性的細(xì)胞器，分化的內(nèi)皮細(xì)胞特性如血管生成，體內(nèi)平衡/血栓形成，血壓及炎癥反應(yīng)。
培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%
傳代方法: 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況: PN5
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 陰性
公司細(xì)胞廣泛用于國內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究，作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹：
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
臍靜脈細(xì)胞融合細(xì)胞；EA.hy926 | 貼壁生長 | EY-X63902 |
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí)， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率；
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；
2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；
5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液，用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次，以去除殘余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution，略蓋過細(xì)胞即可，室溫放置 0.5～2min， 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察，細(xì)胞明顯收縮，并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化；或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來，吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下細(xì)胞，即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足，則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過長，未及吹打細(xì)胞，細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落， 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000～2000g 離心 1min，沉淀細(xì)胞，盡量去除細(xì)胞消化液后，加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞，即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。
抗類固醇生成細(xì)胞抗體檢測試劑盒細(xì)
L-精氨酰GFAP (GA5) Mouse mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)2-氟-5-
Nω-(甲氧基-2,3,6-三磺?；?-L-AceCS1 (D19C6) Rabbit mAb溴-2-羥基吡啶
N'-硝基-L-(L-NNA)AceCS1 (D19C6) Rabbit mAb溴-羥基吡啶
Nα-甲酰-L-WAVE-2 (D2C8) XP® Rabbit mAb*硫
L-天冬酰，無水物（標(biāo)準(zhǔn)品）WAVE-2 (D2C8) XP® Rabbit mAb1-Boc-2-氨甲基哌啶
L-天冬素/L-天冬酰FastScan™ Total Btk ELISA Kit2-巰基-5-甲氧基并咪唑
N'-（*基）-L-天冬酰Glucocorticoid Receptor (D8H2) XP® Rabbit mAb雙環(huán)己酮草酰二腙
L-天冬氨酸-1-芐酯Glucocorticoid Receptor (D8H2) XP® Rabbit mAb環(huán)丁酸
L-天1-甲酯α-E-Canin (D9R5E) Rabbit mAb氟酚
L-天冬氨酸-β-甲酯鹽酸鹽Phospho-Acetyl-CoA Carboxylase (Ser79) Antibody氨甲基吡啶
S-甲基-L-半Phospho-Acetyl-CoA Carboxylase (Ser79) Antibody嗎啉胍
S-*基-L-半Acetyl-CoA Carboxylase Antibody1,8-辛二
L-1-甲酯RhoE (4) Mouse mAb2,2'-脫水尿苷
L-二酯鹽酸鹽Annexin A7 Antibody四甲基氟化銨
L--5-甲酯ALDH1A1 (D9J7R) XP®Rabbit mAb2,2,2-三氟鹽酸鹽
N-酰-L-ALDH1A1 (D9J7R) XP®Rabbit mAb2-羥基-5-溴吡
N'-Cbz-L-RCC2 Antibody2-四氫糠酸甲酯
N-酰-L-氨酸p115 RhoGEF (D25D2) XP® Rabbit mAb噠-
L-脯氨酰GFAP (GA5) Mouse mAb2-(甲氧基羰基)酸
N-酰-L-賴氨酸/N6-三氟?；?L-賴氨酸GFAP (GA5) Mouse mAb2-甲基喹啉鹽酸鹽
O-芐基-L-Phospho-Myosin Light Chain 2 (Ser19) Antibody二酸甲酯酰
O-叔丁基-L-Phospho-Myosin Light Chain 2 (Ser19) Antibody七氟丁酸
Idelalisib;CAL101Phospho-Myosin Light Chain 2 (Ser19) Antibody5-溴-2-氟-6-甲基吡啶
O-叔丁基-L-Myosin Light Chain 2 Antibody全氟丁基磺酰氟
(標(biāo)準(zhǔn)品)Kindlin-1 (D1K4C) Rabbit mAbalpha-基-鄰-
Cdc45 Antibody吡唑甲酸酯
L-a-氨基己二酸EpCAM (D4K8R) XP® Rabbit mAb1H-吡唑-酸
L-環(huán)基氨酸EpCAM (D4K8R) XP® Rabbit mAb溴吡啶-5-甲
L-高氨酸Phospho-Myosin Light Chain 2 (Thr18/Ser19) Antibody吲哚-2-羧酸酯
L-高Phospho-Myosin Light Chain 2 (Thr18/Ser19) Antibody1H-吡唑-甲酸
L-正Phospho-Myosin Light Chain 2 (Ser19) Mouse mAb左旋對羥基甲酯
L-叔Phospho-Myosin Light Chain 2 (Ser19) Mouse mAbBoc-D-
L-茶氨酸Acetyl-CoA Carboxylase (C83B10) Rabbit mAb(溴基)*基
L-茶氨酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Acetyl-CoA Carboxylase (C83B10) Rabbit mAb4,5-二甲基-1,二氧雜環(huán)戊-2-酮
D-葡萄糖酸PhosphoPlus® RIP (Ser166) Antibody Duet酯鹽酸鹽
L-三氟氨酸Mouse Anti-rabbit IgG (Conformation Specific) (L27A9) mAb五氟酸鈉鹽
素瘤細(xì)胞；B16-Muc1形態(tài)特性: 梭形DFGF
臍靜脈細(xì)胞融合細(xì)胞；EA.hy926芝麻素607-80-7中文別名：脂麻素、芝麻脂素、芝麻明
英文名：Sesamin
CAS登錄號：607-80-7
分子式：C20H18O6
分子量：354.36
分子結(jié)構(gòu)：
外觀：白色結(jié)晶粉末
規(guī)格：20 mg/支
純度：≥ 98%
用途：用于含量測定/鑒定/藥理實(shí)驗(yàn)等。
提取來源：脂麻科植物脂麻Sesamum indicum L. 的種子
溶解性：易溶于、乙、，微溶于、。幾乎不溶于水、性溶液和鹽。
熔點(diǎn)：122～123℃
旋光度：+64.5°(c=1.75，)
藥理藥效：芝麻素對流感病、仙臺病和結(jié)核桿菌有抑制作用。農(nóng)業(yè)上用作除蟲菊酯的增效劑。臨床觀察對氣管炎有一定療效。用于抗病、殺菌劑、抗氧化劑、殺蟲增效劑、治療氣管炎。
貯存條件： 4℃冷藏、密封、避光
有效期： 2年
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