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大鼠肝細胞;IAR20
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  大鼠肝細胞;IAR20的詳細資料:

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產品名稱

大鼠肝細胞;IAR20

生長特性

貼壁生長

貨號

EY-X63308

細胞名稱  大鼠肝細胞;IAR20
形態(tài)特性: 圓形、多角

生長特性: 貼壁生長

特征特性:

培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)20%FBS

傳代方法: 1:3傳代;3~4天1次。

傳代情況: C5

凍存條件: 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測: 培養(yǎng)法(-)
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產品特點:
1、 使用方便:不需昂貴設備。
2、 可以處理各種細菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。 
培養(yǎng)操作步驟
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布; 
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片); 
3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時; 
4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中; 
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。 
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,并經過鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程:
1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生的細胞,以0.25%消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數生的細胞用消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。
人導管癌細胞;MDA-MB-134Ⅵ形態(tài)特性: 上皮細胞樣生長特性: 松散貼壁生長Anti-HMGB1 Polyclonal Antibody

人肺腺癌細胞;NCI-H2009形態(tài)特性: 上皮細胞樣生長特性: 貼壁生長Anti-Phospho-H2AFX-S139 Polyclonal Antibody

豬腎細胞;PK(15)形態(tài)特性: 上皮細胞樣生長特性: 貼壁生長Anti-PGC Polyclonal Antibody

大鼠胰島β細胞瘤細胞;RIN-m5F形態(tài)特性: 上皮細胞樣生長特性: 貼壁生長Anti-CBX3 Polyclonal Antibody

小鼠骨髓瘤細胞;P3/NSI/1-Ag4-1形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-Cyclin B1 Polyclonal Antibody

雜交瘤(B類);Z51B3C10H12A12G2F7E7形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-MOCS3 Polyclonal Antibody

SV-40轉化肺成纖維細胞;WI38/VA13形態(tài)特性: 上皮細胞樣生長特性: 貼壁生長Anti-BAG2 Polyclonal Antibody

小鼠B細胞雜交瘤細胞;W6/32形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-LDHA Polyclonal Antibody

人肺腺癌細胞;SPC-A1形態(tài)特性: 上皮細胞樣生長特性: 貼壁生長Anti-ACTG1 Polyclonal Antibody

人滑膜肉瘤細胞;SW982形態(tài)特性: 多角生長特性: 貼壁生長Anti-KRT10 Polyclonal Antibody

非洲綠猴腎細胞;VeroE6形態(tài)特性: 上皮細胞樣生長特性: 貼壁生長Anti-PAX2 Polyclonal Antibody

雜交瘤(B類);Z51B3C10H12A12G2F7B5形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣生長特性: 懸浮生長Anti-RRAGD Polyclonal Antibody

人結直腸腺癌細胞;NCI-H716形態(tài)特性: 上皮細胞樣生長特性: 懸浮生長,聚團,少數貼壁Anti-NR3C1 Polyclonal Antibody

T淋巴細胞白血病細胞;HuT78形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣;圓形生長特性: 懸浮生長Anti-PEG3 Polyclonal Antibody

人癌細胞;ZR-75-30[ZR7530]形態(tài)特性: 上皮樣;多角生長特性: 貼壁生長Anti-ANPEP Polyclonal Antibody

人結直腸腺癌細胞;SK-CO-1形態(tài)特性: 上皮細胞樣生長特性: 貼壁生長Anti-KCTD17 Polyclonal Antibody
大鼠肝細胞;IAR20大鼠血紅素氧合酶2(HO-2)ELISA試劑盒Cyclin-D1ELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

大鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA試劑盒Cyclin-D2ELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

大鼠蛋白激酶B(PKB)ELISA試劑盒Cyclin-D3ELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

大鼠磷肌醇3激酶(PI3K)ELISA試劑盒CYFRA21-1ELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

大鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA試劑盒CYP21AELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

大鼠受體(TR)ELISA試劑盒CYP21BELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

大鼠抗受體(ATR)ELISA試劑盒CYP2E1ELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

大鼠抗復合物(TAT)ELISA試劑盒CYP450ELISAKit產品規(guī)格:48T/96T。

產品相關關鍵字: 大鼠肝細胞 IAR20
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