公司細胞廣泛用于國內(nèi)院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產(chǎn)品詳細介紹:
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
正常前列腺基質(zhì)永生化細胞;WPMY-1 | 貼壁生長 | EY-X63900 |
細胞名稱 正常前列腺基質(zhì)永生化細胞;WPMY-1
形態(tài)特性: 成肌細胞
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 肌成纖維基質(zhì)細胞株,WPMY-1,與RWPE-1cells(ATCCCRL-11609)一樣,來源于同一張成人前列腺組織切片的周圍區(qū)域的基質(zhì)細胞。通過一個pRSTV質(zhì)料結(jié)構(gòu),用SV40大T抗原對基質(zhì)細胞進行永生化。WPMY-1細胞,與RWPE-1細胞及其它上皮細胞衍生株一樣,屬于來源于同一個前列腺的一系列細胞株。由于它們來源于同一個前列腺的周圍區(qū)域,WPMY-1細胞株對于研究分泌和基質(zhì)與上皮細胞相互作用尤其有用。
培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)優(yōu)質(zhì)胎牛血清,5%
傳代方法: 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況: P(41+5)
凍存條件: 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 陰性
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冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
細胞周期蛋白依賴性激酶4檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株;XYCDY-1BV-1E6形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Cyclin-dependent kinase 4
表皮生長因子受體3檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株;HE4-2B8形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Epidermal growth factor receptor 3
神經(jīng)肽Y受體Y1檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株;14853-1hz-5/C377形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣NPY1R
神經(jīng)肽Y受體Y2檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株;HL-003HumanNormalCervicalEpithelialcellHNCE/HL-003形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣NPY2R
蛋白酶3抗體檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株;W5形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Protease 3 antibody
M型磷脂酶A2受體抗體檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株;CR-M01形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣M phospholipase A2 receptor antibody
神經(jīng)肽檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株;8G3-B5-SP20形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣neuropeptide
組蛋白H1檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株;6B3-C5-SP20形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Histone H1
胰島素樣生長因子2-mRNA結(jié)合蛋白2檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株;3553-1hz-6M456/4B7_111202形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Insulin-like growth factor 2-mRNA binding protein 2
序列相似家族19成員A5檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株;3553-1hz-6M456/1J4_111128形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Family With Sequence Similarity 19, Member A5
EB病早期抗原檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株;5737-1RE-4M4/4N5_111218形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Epstein-Barr Virus early antigen
EB病核心抗原檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株;5163-1RE-4M1234/4L17_111016形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣EBNA
血清粘蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株;DES1B7形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣seromucoid
早期生長因子檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株;MT9C10形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Egr-1
補體因子Ba檢測試劑盒細胞名稱: 人膽管癌細胞;LIPF178C形態(tài)特性: 上皮樣complement factor Ba
ACLY檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株;DCBX5B1形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣ATP-citrate synthase
臂板蛋白3A檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞株;8D6形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Semaphorin-3A
正常前列腺基質(zhì)永生化細胞;WPMY-1積雪草464-92-6中文別名:亞細亞
英文名:Asiatic acid
CAS登錄號:464-92-6
分子式:C30H48O5
分子量:488.70
分子結(jié)構(gòu):
外觀:白色結(jié)晶
規(guī)格:20 mg/支
純度:≥ 98%
用途:用于含量測定/鑒定/藥理實驗等。
提取來源:傘形科植物積雪草Centella asiatica 的全草。
溶解性:溶于水、、DMSO,難溶于,。
熔點:242-244℃
旋光度:+53.9°()
藥理藥效:本品具有改善抑郁癥、抗癌、防治心肌梗死、腦血栓,腦梗塞,增強記憶,皮膚增白等作用。
貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光
有效期: 2年
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。