操作流程示意:
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小鼠高遷移率族蛋白B1ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明產(chǎn)品別名:小鼠高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA檢測(cè)試劑盒 價(jià)格低,質(zhì)量有保證。產(chǎn)品種類多,主要包括:人,大鼠,小鼠,兔,豬,犬,雞,猴,牛,馬,植物等ELISA試劑盒 英文名稱:Mouse High mobility group protein B1,HMGB-1 ELISA Kit 規(guī)格: 48T/96T。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 價(jià)格 |
小鼠高遷移率族蛋白B1ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明 | Mouse High mobility group protein B1,HMGB-1 ELISA Kit | 來(lái)電可享受優(yōu)惠 |
組成:
(1)小鼠高遷移率族蛋白B1ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液;
(2)洗滌液,在板式ELISA中,常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水;
(3)酶標(biāo)記的抗原或抗體(結(jié)合物);
(4)酶的底物;
(5)陰性對(duì)照品和陽(yáng)性對(duì)照品(定性測(cè)定中),elisa試劑盒參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清(定量測(cè)定中);
(6)已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑)
樣本處理及要求:
1. 小鼠高遷移率族蛋白B1ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。
仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟:
1、小鼠高遷移率族蛋白B1ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,依次進(jìn)行稀釋數(shù)倍。
2、加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3、溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4、配液:將30倍(48T 的20 倍)濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6、加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7、溫育:操作同3。
8、洗滌:操作同5。
9.在確保酶標(biāo)板底無(wú)水滴及孔內(nèi)無(wú)氣泡后,立即用酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)測(cè)量各孔的光密度 (O.D. 值)。
10、顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘.
11、終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
12、測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
H-半胱酸-甘酸-OH,英文名或英文縮寫(xiě):Cys-Gly,級(jí)別:BR,98%,規(guī)格:100克
(*)(易)potewwium perchlorate
AntibodySignalEnhancer抗體信號(hào)增強(qiáng)劑蛋白組學(xué)級(jí)透明液體,搖晃時(shí)有氣泡RTsigma
4-甲酯... Methyl 4-(aminomethyl)benzoate hydroch... 6232-11-7 5G 通用試劑
坐同 Furczolidonq 67-42-8
錄亞明T,英文名或英文縮寫(xiě):Chloramine T trihydrate,級(jí)別:超純,99%,規(guī)格:100毫克
Agarose,TypeA 100g Spannish原裝
Antipaindixy7nochloride抗痛素100克生物技術(shù)級(jí),600u/mg
啊匹松油脂 L cPIqZON GRqcSq L 1678-0-3
Sulforhodaminep磺酰羅丹明B細(xì)胞培養(yǎng)試劑染料100毫克BS
免疫血清兔抗HRPshēng huà shì jì容量:100克
PseudomonasIsolationAgar 500g原裝 BD 292710
俾氏麥棕Y250毫克保存:-20℃
2-羌基-5-氧基本加醋 5-Mqthoxysclicylic ccid 61--4
BES,wo7iumSALTBES 鈉高純級(jí)100G66992-27-6RT
多葉唐松草 Thalicum foliolosum DC. Protopine 原堿 130-86-9 C20H19NO5 ≥98%
D(十)-D(tqn)-cnxy7nousglucosq100mg/支
準(zhǔn)葛爾烏頭減 Songorine 509-24-0 20mg HPLC≥98% 準(zhǔn)格爾烏頭減 509-24-0用于含量測(cè)...
UV法含量測(cè)定100572-200401常溫,避光50mg
Didanosine地丹諾辛標(biāo)準(zhǔn)品69655-05-6200mg
小鼠高遷移率族蛋白B1ELISA檢測(cè)試劑盒說(shuō)明二十七碳酸 Heptacosanoic acid 分 子 量:410.7200 CAS編號(hào):7138-40-1 分子式:C27H54O2; CH3(CH2)25COOH 物理化學(xué)性質(zhì):
云南松Pinus yunnanensis Massonianoside B none 188300-19-8 C25H32O10 β-六六六(C14072000
含量測(cè)定α-蒎烯110897-200001常溫,避光0.1ml
Carvedilol標(biāo)準(zhǔn)品72956-09-3200mg
四葉蘿芙木Rauvolfia teaphylla 10-xy7noxydixy7noperaksine 10-羥基二氫派利文堿 451478-47-0 C19H24N2O3 ≥97%