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產(chǎn)品名稱 | 類成纖維細(xì)胞系;CNLMG-B5538SKIN |
生長(zhǎng)特性 | 貼壁生長(zhǎng) |
貨號(hào) | EY-X63695 |
細(xì)胞名稱 類成纖維細(xì)胞系;CNLMG-B5538SKIN
形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)
特征特性: 該細(xì)胞屬保藏,其特征特性尚未公開(kāi)。
培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS
傳代方法: 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況: C8
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè): 陰性
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產(chǎn)品特點(diǎn):
1、 使用方便:不需昂貴設(shè)備。
2、 可以處理各種細(xì)菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時(shí)間縮短至30分鐘-1小時(shí)。
4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。
6、 紫外檢測(cè)蛋白濃度時(shí),背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程:
1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開(kāi),吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長(zhǎng)至60%~70%融合時(shí),用0.25%消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生的細(xì)胞,以0.25%消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ,計(jì)算貼壁率。
1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生的細(xì)胞用消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。
Harmaline
CAS No.:304-21-2
中文名:駱駝蓬
分子式:C13H14N2O
大黃素;1,8二羥基3氧基 訂購(gòu)|咨詢 脂肪酶K(LIPK) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
菊苣 訂購(gòu)|咨詢 脂肪酶M(LIPM) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
桑皮苷A 訂購(gòu)|咨詢 脂肪酶N(LIPN) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
龍膽苦苷 對(duì)照品 訂購(gòu)|咨詢 脂肪去飽和酶1(FADS1) 規(guī)格: 20mg;97.3%
對(duì)基 對(duì)照品 訂購(gòu)|咨詢 脂肪去飽和酶1(FADS1) 規(guī)格: 100mg
莫能菌素 對(duì)照品 訂購(gòu)|咨詢 脂肪去飽和酶2(FADS2) 規(guī)格: 150mg
抗A,抗B血型定型試劑(單克隆抗體) 訂購(gòu)|咨詢 脂肪去飽和酶2(FADS2) 規(guī)格:
豬去氧膽;Hyodeoxycholic 訂購(gòu)|咨詢 脂肪去飽和酶3(FADS3) 規(guī)格: 100mg
異香草;Isovanillic Aci 訂購(gòu)|咨詢 脂肪合酶(FASN) 規(guī)格: 20mg
一枝蒿庚素;Bullatine G;so 訂購(gòu)|咨詢 脂肪合酶(FASN) 規(guī)格: 10mg
印;Indaconitone 訂購(gòu)|咨詢 脂肪合酶(FASN) 規(guī)格: 20mg
異李素;Isorhamnetin 訂購(gòu)|咨詢 脂肪合酶(FASN) 規(guī)格: 20mg
a細(xì)辛;aAsarone 訂購(gòu)|咨詢 脂肪轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白5(FATP5) 規(guī)格: 20mg
細(xì)辛脂素;()asarinin 訂購(gòu)|咨詢 脂肪轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白5(FATP5) 規(guī)格: 20mg
無(wú)水檸檬;Citric acid 訂購(gòu)|咨詢 脂肪轉(zhuǎn)移酶1(LIPT1) 規(guī)格: 100mg
10脫基巴卡III;10Dea 訂購(gòu)|咨詢 脂肪轉(zhuǎn)移酶2(LIPT2) 規(guī)格: 20mg
蘇木素;Hematoxylin 訂購(gòu)|咨詢 脂素1(LPIN1) 規(guī)格: 20mg
蘇丹紅Ⅲ;Sudan III;Solve 訂購(gòu)|咨詢 脂素1(LPIN1) 規(guī)格: 20mg
CCDC5 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Tetraxetan/DOTA/1,4,7,10Tetraazacyclododecane1,4,7,10tetraacetic acid
BMP9 骨形態(tài)發(fā)生蛋白9抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Lamivudine
BMPER BMP內(nèi)皮細(xì)胞調(diào)節(jié)蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Lamivudine
Angiotensin II type 1A receptor 血管緊張素Ⅱ1A型受體抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Trifluop dihydrochloride
Entactin/Nidogen 巢蛋白1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Trifluop dihydrochloride
Cyclin M2/NM2 周期素M2抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Corticosterone
FRS2 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體底物2抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Corticosterone
FER/TYK3 酪蛋白激酶3抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Disulfiram
性酶 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:ACP 含量:生物技術(shù)級(jí),99%
性錳 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Manganousdihydrogenphosphate 含量:CP
性羅丹明B 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:LissaminerhodamineB 含量:BS
性綠5 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:LightgreenSFyellowish 含量:AR,404.5%
性綠O 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:NaphtholgreenB 含量:AR,98%
性紫43 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Alizarinviolet3B 含量:FMP
隨機(jī)引物 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Randomprimers 含量:BR,40u/ul
梭菌蛋白酶 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:ClostripainfromClostridiumhistolyticum 含量:BR
進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:Carbenicillindisodiumsalt 含量:BR
進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱:SCarboxymethylLCysteine 含量:BR,99%
類成纖維細(xì)胞系;CNLMG-B5538SKIN氨基脫羧酶對(duì)照規(guī)格:1ml*20用途:用于生化鑒定
解磷細(xì)菌培養(yǎng)基(有機(jī)磷細(xì)菌培養(yǎng)基)規(guī)格:250g用途:用于利用有機(jī)磷細(xì)菌的分離培養(yǎng)
賴氨脫羧酶培養(yǎng)基規(guī)格:5g用途:生化培養(yǎng)基,賴氨脫羧酶試驗(yàn)
藥敏紙片規(guī)格:15μg/片,20片/瓶用途:用于藥物體外敏感性試驗(yàn)
醋鹽瓊脂規(guī)格:250g用途:用于細(xì)菌醋鹽試驗(yàn)
BCYE-Cys瓊脂基礎(chǔ)規(guī)格:可溶性焦磷鐵用途:0.025g每支含量