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產(chǎn)品名稱 | 大蹄蝠皮膚細胞；GRBS1 |
生長特性 | 貼壁生長 |
貨號 | EY-X63721 |
細胞名稱 大蹄蝠皮膚細胞；GRBS1
形態(tài)特性: 成纖維樣細胞
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細胞來源于一雄性大蹄蝠的皮膚組織。中國科學(xué)院昆明細胞庫于2004年建立。
培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)15%NBS
傳代方法: 1:2傳代；3-4天一次
傳代情況: P2
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 熒光法（-）
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產(chǎn)品特點:
1、 使用方便:不需昂貴設(shè)備。
2、 可以處理各種細菌菌體，包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
4、 采用溫和的中性裂解組分，保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩(wěn)定劑，提取的蛋白穩(wěn)定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時，背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑；每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性，包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA，與金屬螯和層析等兼容。
培養(yǎng)操作步驟 ：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；
4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程：
1.1主要試劑與儀器：倒置相差顯微鏡（日本 olympus imt-413），co2孵箱（日本yamato it-61）。
1.2 hek-293細胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存：
1.2.1 細胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液（37℃預(yù)熱，8～10倍體積）離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi)，在37℃、5％co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek－293細胞48h換液1次，細胞長至60%～70%融合時，用0.25%消化1～2min，將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散，為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次，獲得細胞懸液，然后加入倍量的培養(yǎng)基，溫和混勻，吸管分裝混合液，傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞，待細胞變圓、脫壁并浮起，加入少量培養(yǎng)基離心，再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液，用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù)，按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液＝(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生的細胞，以0.25％消化成單細胞懸液，計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中，每兩小時隨機取出3瓶細胞，吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞，加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞，取其平均值，按照公式：貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ，計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生的細胞用消化制成單細胞懸液，以1×104/孔接種于24孔板，每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔，計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。
8-(1,1-Dimethyl-2-propenyl)-3'-methoxykaempferol
CAS No.：1859979-00-2
中文名：
分子式：C21H20O7
6基24環(huán)基三嗪 對照 訂購|咨詢 粘脂蛋白2(MCOLN2) 規(guī)格： 200mg
地美唑 對照品 訂購|咨詢 粘脂蛋白3(MCOLN3) 規(guī)格： 200mg;99.9％
肝表面（HBs）抗體血漿國家標準品 訂購|咨詢 粘著斑激酶(FAK) 規(guī)格： 1.3IU/支，0.5ml/支
;Levodopa 訂購|咨詢 粘蛋白1(MUC1) 規(guī)格： 50mg
異連翹酯苷A;Isoforsythias 訂購|咨詢 粘蛋白1(MUC1) 規(guī)格： 20mg
異李素3O半乳糖苷;Isorha 訂購|咨詢 粘蛋白1(MUC1) 規(guī)格： 10mg
3基乳香 ;alphabosw 訂購|咨詢 粘蛋白1(MUC1) 規(guī)格： 20mg
原人參三;Protopanaxatri 訂購|咨詢 粘蛋白12(MUC12) 規(guī)格： 20mg
g薟精;Darutigel 訂購|咨詢 粘蛋白13(MUC13) 規(guī)格： 20mg
小豆蔻明;cardamonin 訂購|咨詢 粘蛋白17(MUC17) 規(guī)格： 20mg
;Aconitine 訂購|咨詢 粘蛋白2(MUC2) 規(guī)格： 20mg
1脫氧野尻;1Deoxyji 訂購|咨詢 粘蛋白2(MUC2) 規(guī)格： 20mg
山麥冬皂苷B;Liriopesides 訂購|咨詢 粘蛋白2(MUC2) 規(guī)格： 20mg
斯皮諾素;Spisin 訂購|咨詢 粘蛋白20(MUC20) 規(guī)格： 20mg
人參炔;Falcaril，Pana 訂購|咨詢 粘蛋白21(MUC21) 規(guī)格： 20mg
七葉皂苷 IIb;Escin IIb 訂購|咨詢 粘蛋白3(MUC3) 規(guī)格： 10mg
23羥基白樺;Anemosapoge 訂購|咨詢 粘蛋白4(MUC4) 規(guī)格： 20mg
青藤;Simenine 訂購|咨詢 粘蛋白4(MUC4) 規(guī)格： 20mg
Laminin Beta 2/Laminin S 層粘連蛋白β2抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Asulam
Plakophilin 1 橋粒斑菲素蛋白1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Bepotastine besilate
phosphoALK/CD246(Tyr1604) 間變型淋巴瘤激酶抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Sodium copper chlorophyllin
phosphoALK/CD246(Tyr1278/1282/1283) 間變型淋巴瘤激酶抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Neochlorogenic acid
phosphoALK/CD246(Tyr1586) 間變型淋巴瘤激酶抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Ivabradine HCl
SMOC2 分泌模塊鈣結(jié)合蛋白2抗體（平滑肌相關(guān)蛋白2） 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Xanthophyll
Sprouty 2 快速發(fā)育生長因子同源蛋白2抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Xanthophyll
THSD1 血小板跨膜反應(yīng)蛋白1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Xanthophyll
進口、國產(chǎn) 英文名稱:DOX 含量:BR
進口、國產(chǎn) 英文名稱:Lomefloxacinhydrochloride 含量:BR，500%
甘叔丁酯 進口、國產(chǎn) 英文名稱:Glycinetertbutylesterhydrochloride 含量:BR，98%
甘酯 進口、國產(chǎn) 英文名稱:GlycineethylesterHC1 含量:BR，98.5%
環(huán)胞啶 進口、國產(chǎn) 英文名稱:CycloC 含量:試劑級，99%
環(huán)氟哌 進口、國產(chǎn) 英文名稱:Ciprofloxacinhydrochloride 含量:BR，500u/mg
緩沖液 進口、國產(chǎn) 英文名稱:PotassiumchlorideHydrochloricacidBuffersolution 含量:BR，98%
鄰二 進口、國產(chǎn) 英文名稱:OPDHC1 含量:BR，98%
林肯 進口、國產(chǎn) 英文名稱:Lincomycinhydrochloride 含量:BR，150IU/mg
進口、國產(chǎn) 英文名稱:VB1 含量:BS
大蹄蝠皮膚細胞；GRBS1新生霉素50ug規(guī)格：50ug/支*5用途：作為添加劑使用
BM固體培養(yǎng)基規(guī)格：250g用途：用于醋鈣不動桿菌增菌培養(yǎng)
脫纖維羊血規(guī)格：50ml用途：每100ml HBPM0251中加入7ml脫纖維羊血
假單胞cfc選擇性培養(yǎng)基添加劑規(guī)格：1ml/支*5用途：每支添加于200ml HB8689中
2216E液體培養(yǎng)基規(guī)格：250g用途：用于海生細菌的培養(yǎng)
新生霉素（125ug/支）規(guī)格：1ml/支*5用途：每支添加于225ml志賀氏增菌肉湯－新生霉素中
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