資源名稱: 哈茨木霉
種屬: Trichoderma harzianum Rifai
提供形式: 凍干管,斜面培養(yǎng)物
安全等級: 1
模式菌株: no
應(yīng)用領(lǐng)域: 土壤真菌,有較強(qiáng)的纖維分解能力,對多種真菌有拮抗作用,是良好的生防菌。
培養(yǎng)基: 綜合PDA:馬鈴薯煮汁1000mL,二氫鉀二氫鉀 3g,鎂 1.5g,葡萄糖 20g,*1 10mg,瓊脂 20g,pH自然。馬鈴薯煮液:200g馬鈴薯,去皮,切塊,放入蒸餾水中煮沸30min,取濾液定容至1000mL,備用。121℃,15min。
傳代方法: ①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌水或培養(yǎng)基充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。
②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。
生長條件: 26℃,好氧。
存儲條件: 2-8℃冷藏
規(guī)格參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
哈茨木霉 | Trichoderm | EY-J963387 |
?
低溫存法:
①簡單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過1~2個(gè)月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3~4個(gè)月;②液氮超低溫保存法,將生長穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí),即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法保存。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級種子,把一級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為二級發(fā)酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為三級發(fā)酵。同樣道理,使用三級種子的發(fā)酵,稱為四級發(fā)酵。
綜合微生物的培養(yǎng)方法,包括以下步驟:
(1)前期準(zhǔn)備:(A)滅菌處理;(B)制備Biolite水;(C)檢查設(shè)備和材料;
(2)按比例配制培養(yǎng)材料;
(3)導(dǎo)入曝氣,進(jìn)行繁殖培養(yǎng);
(4)取液觀察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養(yǎng);
(5)分離并檢測;
(6)取液儲存;通過該綜合微生物培養(yǎng)方法簡單可操作性強(qiáng),培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以內(nèi),菌類穩(wěn)定不發(fā)生突變,且繁殖快速。
Chaetomium│globosum Kunze 中文名稱:球毛殼霉Chaetomium│globosum Kunze分離基物:馬尾松土壤提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:28存儲條件:定期移植法 純度:98%
Agrocybe│pediades (Fr.) Fayod 中文名稱:平田頭菇10-2Agrocybe│pediades (Fr.) Fayod分離基物:子實(shí)體提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:28存儲條件:定期移植法 純度:98%
Acidovorax│avenae subsp. citrulli (Schaad et al.) Willems et 中文名稱:燕麥?zhǔn)染鞴蟻喎NAcidovorax│avenae subsp. citrulli (Schaad et al.) Willems et分離基物:西瓜葉片提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:68生長條件:28存儲條件:定期移植法 純度:98%
Colletotrichum│ampelinum Cavara 中文名稱:葡萄炭疽盤孢菌Colletotrichum│ampelinum Cavara分離基物:果實(shí)提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:25-29存儲條件:定期移植法 純度:98%
Phyllosticta│lycopersici Peck 中文名稱:番茄葉點(diǎn)菌Phyllosticta│lycopersici Peck分離基物:葉片提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:26-28存儲條件:定期移植法 純度:98%
Botryosphaeria│ribis Grossenb. & Duggar 中文名稱:貝氏葡萄座腔菌梨化型Botryosphaeria│ribis Grossenb. & Duggar分離基物:蘋果提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:99%
Cochliobolus│lunatus R.R. Nelson & F.A. Haasis 中文名稱:新月彎孢霉Cochliobolus│lunatus R.R. Nelson & F.A. Haasis分離基物:月季提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:99%
Phomopsis│rojana Gaja 中文名稱:柿苗擬莖點(diǎn)霉Phomopsis│rojana Gaja分離基物:柿提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長條件:25存儲條件:定期移植法 純度:98%
哈茨木霉Bcl-xL Bcl-xL蛋白抗體*2-甲氧基噻吩IFN- Beta (Interferon Beta) human 干擾素-β抗原
BBC3/PUMA p53正向細(xì)胞凋亡調(diào)控因子抗體*2-甲氧基噻吩PSCA 前列腺干細(xì)胞抗原
phospho-Bcl-xL(Ser62) 磷化Bcl-xL(pSer62)抗體*2,3-二苯基喹喔啉ADH/AVP peptide 抗利尿激素/血管升壓素抗原(和肽素)
BCHE (NT) 丁酰膽酯酶抗體(N端)對甲苯磺酰胺2,3-二苯基喹喔啉PRRSV M protein 豬藍(lán)耳病病M蛋白
BCHE 丁酰膽酯酶單克隆抗體對羥基苯R)-3-氨基-1-芐基Newcastle disease virus/HRP 雞新城疫疫苗(雞瘟4型混合病)偶聯(lián)辣根過氧化物酶
BCHE (CT) 丁酰膽酯酶抗體(C端)*(R)-3-氨基-1-芐基sIgA 大鼠分泌型IgA(抗原)
BDNF 腦源神經(jīng)營養(yǎng)因子抗體*(S)-1-芐基-3-氨基Melamine/KLH 三聚氰胺與血藍(lán)蛋白偶聯(lián)物
BECN1 BECLIN-1抗體* (S)-1-芐基-3-氨基Melamine/BSA 三聚氰胺與牛血清白蛋白偶聯(lián)物