產(chǎn)品及特點:
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,使每個循環(huán)變得“可見”。本產(chǎn)品就是以探針法熒光定量 RT-PCR 技術(shù)為基礎(chǔ)開發(fā)的專門檢測探針法熒光定量PCR試劑盒的試劑盒。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
偽中間型葡萄球菌探針法PCR熒光定量試劑盒 | Staphylococcus pseudintermedius | EY00P9375 |
運輸及保存: 低溫運輸,-20℃保存,保存期限為12個月。
自備試劑:樣品 RNA。
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
染料法
探針法
可進行相對,定量表達分析,定性分析,SNP檢測等
實驗報告
電泳圖 ·標(biāo)準(zhǔn)曲線
溶解曲線 ·擴增曲線
完整的實驗過程、試劑、儀器及分析報告
?
使用方法
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供無傳染性的 DNA 段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個樣品,設(shè)置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是 NC(樣品制備陰性對照)??梢杂?0μL陽性對照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費贈送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝,該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板,省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個PCR 管,其中N+2個用于上步得到的 N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照(用水做模板),6個用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+4 個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1個用于PCR陽性對照(用第4號管的陽性對照稀釋液做模板)。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
氨基三乙酸(標(biāo)準(zhǔn)品)次氯酸鈉溶液 ACS,available chlorine 5.00 %Human UBQLN1(Ubiquilin-1) ELISA Kit
2-巰基(標(biāo)準(zhǔn)品)硫代乙酸鈉 AR,80.0%Human NFKB2(Nuclear factor NF-kappa-B p100 subunit) ELISA Kit
1,3-(標(biāo)準(zhǔn)品)硫代乙酸鈉 BRHuman CCDC82(Coiled-coil domain-containing protein 82) ELISA Kit
二甘(標(biāo)準(zhǔn)品)硫代乙酸鈉 98%Human APOC4(Apolipoprotein C-IV) ELISA Kit
氯噻(標(biāo)準(zhǔn)品)亞硝基鐵化鈉 AR,99.0%Human S100A2(Protein S100-A2) ELISA Kit
力克拉敏(標(biāo)準(zhǔn)品) ARHuman COMT(Catechol O-methyltransferase) ELISA Kit
雜質(zhì)(4-氨基-6-氯-1,3-苯基二硫酰)(標(biāo)準(zhǔn)品)丁二酸鈉 AR,99.0%Human CCT8L1P(Putative T-complex protein 1 subunit theta-like 1) ELISA Kit
鹽酸地芬尼多雜質(zhì)(烯化合物)(標(biāo)準(zhǔn)品)亞硝基鐵化鈉 99.98% metals basisHuman DHFR(Dihydrofolate reductase) ELISA Kit
雜質(zhì)Ⅰ(標(biāo)準(zhǔn)品)亞磷酸三苯酯 CP,97%Human IFNA10(Interferon alpha-10) ELISA Kit
二氧六環(huán)(標(biāo)準(zhǔn)品)亞磷酸三苯酯 98%Human IFNA8(Interferon alpha-8) ELISA Kit
(標(biāo)準(zhǔn)品)四氫糠 AR,98.0%Human S100A10(Protein S100-A10) ELISA Kit
雜質(zhì)(標(biāo)準(zhǔn)品)四氫糠 CPHuman PRNP(Major prion protein) ELISA Kit
氯羥喹系統(tǒng)適用性試驗對照品四氫糠 99%Human EGFL7(Epidermal growth factor-like protein 7) ELISA Kit
富馬酸酮替芬雜質(zhì)I(10-甲氧基-4-(1-甲基-4-哌啶基)-4H-苯并[4.5]環(huán)庚[1.2-b]噻吩-4-)(標(biāo)準(zhǔn)品)四甲基 ARHuman STAT5B(Signal transducer and activator of transcription 5B) ELISA Kit
5-硝基糠二乙酸酯(標(biāo)準(zhǔn)品)甲苯二異酸酯 98%(劇品)Human EBI3(Interleukin-27 subunit beta) ELISA Kit
偽中間型葡萄球菌探針法PCR熒光定量試劑盒鈣蛋白酶13(CAPN13)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)乙酸二己基銨(約0.5mol/L的水溶液)[離子對色譜級] 質(zhì)量規(guī)格:含量測定
核黃素轉(zhuǎn)運蛋白2(RFT2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)乙酸二己基銨(約0.5mol/L的水溶液)[離子對色譜級] 質(zhì)量規(guī)格:檢查
R-脊椎蛋白4(RSPO4)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)1-烷磺酸鈉[離子對色譜級] 質(zhì)量規(guī)格:含量測定
硫氧還蛋白1(SRXN1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)1-烷磺酸鈉[離子對色譜級] 質(zhì)量規(guī)格:含量測定
Trihydrophobin 1蛋白(TH1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)1-丁烷磺酸鈉[離子對色譜級] 質(zhì)量規(guī)格:含量測定
MRG結(jié)合蛋白(MRGBP)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)1-丁烷磺酸鈉[離子對色譜級] 質(zhì)量規(guī)格:UV法含量測定
Paralemmin 2蛋白(PALM2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)1-戊烷磺酸鈉[離子對色譜級] 質(zhì)量規(guī)格:含量測定
原鈣黏素22(PCDH22)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)1-戊烷磺酸鈉[離子對色譜級] 質(zhì)量規(guī)格:供TCL鑒別用