運(yùn)輸及保存: 低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限為12個(gè)月。
自備試劑:樣品 RNA。
分類(lèi):熒光定量PCR試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)基因名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
染料法
探針?lè)ā?/font>
可進(jìn)行相對(duì),定量表達(dá)分析,定性分析,SNP檢測(cè)等
實(shí)驗(yàn)報(bào)告
電泳圖 ·標(biāo)準(zhǔn)曲線
溶解曲線 ·擴(kuò)增曲線
完整的實(shí)驗(yàn)過(guò)程、試劑、儀器及分析報(bào)告?
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
馬源性成分探針?lè)≒CR熒光定量試劑盒 | 50次 | EY00P9548 |
使用方法
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供無(wú)傳染性的 DNA 段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個(gè)樣品,設(shè)置N+2個(gè)提取,多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽(yáng)性對(duì)照),一個(gè)是 NC(樣品制備陰性對(duì)照)??梢杂?0μL陽(yáng)性對(duì)照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購(gòu)本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費(fèi)贈(zèng)送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝,該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板,省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9. 如果做定量分析并且只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR 管,其中N+2個(gè)用于上步得到的 N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照(用水做模板),6個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+4 個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),1個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照(用第4號(hào)管的陽(yáng)性對(duì)照稀釋液做模板)。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照,并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加)
產(chǎn)品及特點(diǎn):
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,使每個(gè)循環(huán)變得“可見(jiàn)”。本產(chǎn)品就是以探針?lè)晒舛?RT-PCR 技術(shù)為基礎(chǔ)開(kāi)發(fā)的專門(mén)檢測(cè)探針?lè)晒舛縋CR試劑盒的試劑盒。
骨鈣素(37-49),人1-萘甲 98%Human TNS4 ELISA Kit
骨鈣素(45-49),人NA-酸酐 99%Human TMOD3 ELISA Kit
骨鈣素(7-19),人順-5-降烯-endo-2,3-二羧酸 98%Human MCHR2(Melanin-concentRating hormone receptor 2) ELISA Kit
成骨生長(zhǎng)肽5-降烯-2-羧酸 99%Human TNK1 ELISA Kit
骨抑制素,人2-基-5-降烯 98%Human TNP1 ELISA Kit
骨抑制素(1-5),人,牛,狗,大鼠,小鼠,兔,馬5-硝基苊 85.0%Human TMPRSS5 ELISA Kit
骨抑制素(1-5)酰,人,牛,狗,大鼠,小鼠,兔,馬3-辛基噻吩 98%Human EEF1A1(Elongation factor 1-alpha 1) ELISA Kit
骨抑制素酰,人9-苯基咔唑 98%Human TNFAIP8L2 ELISA Kit
卵巢 – 1,綿羊9, 9′-螺雙芴 98%Human TNIP1 ELISA Kit
卵巢-2,綿羊二亞芐叉酮 98%Human TNK1 ELISA Kit
卵清蛋白(257-264)抗原肽3-酸叔丁酯 97%Human TNIP2 ELISA Kit
卵清蛋白肽三特丁基膦 1.0 M in tolueneHuman TMEM54 ELISA Kit
卵清蛋白(323-339)噻吩-2,3-二甲 98%Human TMEM55B ELISA Kit
胃泌酸調(diào)節(jié)素,人,大鼠,小鼠alpha-三聯(lián)噻吩 99%Human TMEM59 ELISA Kit
P1三(二亞芐基酮)二鈀,氯加合物 98%Human PMCHL1(Putative pro-MCH-like protein 1) ELISA Kit
馬源性成分探針?lè)?/font>PCR熒光定量試劑盒血管抑制蛋白2(VASH2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)2-溴-1,3,5-三異基苯(96.0 %) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
血管抑制蛋白1(VASH1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)2,2'-雙(三氟甲基)二氨基聯(lián)苯(98.0%) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
糖基-2-磺基轉(zhuǎn)移酶(UST)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)2,2'-雙(三氟甲基)二氨基聯(lián)苯(98.0%) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
尿苷二磷酸糖基轉(zhuǎn)移酶8(UGT8)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)2,2'-雙(三氟甲基)二氨基聯(lián)苯(98.0%) 質(zhì)量規(guī)格:>85%,分子生物學(xué)級(jí)
泛醌蛋白4(UBQLN4)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)1,3-二咔唑-9-基苯(98%) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
泛醌蛋白3(UBQLN3)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)1,3-二咔唑-9-基苯(98%) 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
泛醌蛋白2(UBQLN2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)苯(AR,≥99.5%) 質(zhì)量規(guī)格:BR
泛醌蛋白1(UBQLN1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)苯(CP,≥99%) 質(zhì)量規(guī)格:>90%,BS