細胞名稱 胚胎干細胞;E1C1
形態(tài)特性: 上皮細胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
傳代方法: 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況: C5
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 陰性?
產(chǎn)品名稱 | 胚胎干細胞;E1C1 |
生長特性 | 貼壁生長 |
貨號 | EY-X63708 |
產(chǎn)品特點:
1、 使用方便:不需昂貴設(shè)備。
2、 可以處理各種細菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程:
1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生的細胞,以0.25%消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生的細胞用消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。
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(Z)-Akuammidine
CAS No.:113973-31-2
中文名:
分子式:C21H24N2O3
人參皂苷Rg1 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP1) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
β蛻皮激素 對照品 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP1) 規(guī)格: 50mg
氧咪唑 對照品 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP10) 規(guī)格: 200mg;99.7%
地克珠利 對照品 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP10) 規(guī)格: 100mg;99.5%
肝表面(HBs)抗體免疫球蛋白國家標準 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP10) 規(guī)格: 2.5IU/支,0.5ml/支
紫草苷;Lithosprmoside 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP10) 規(guī)格: 20mg
氧;Oxoglaucine 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶11(MMP11) 規(guī)格: 10mg
茵芋;Skimmianine 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶11(MMP11) 規(guī)格: 20mg
銀鍛苷;Tiliroside 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶12(MMP12) 規(guī)格: 20mg
原人參二;Protopanaxdiol 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶12(MMP12) 規(guī)格: 20mg
β;βAsarone 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶12(MMP12) 規(guī)格: 20mg
;Thymopentin 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP13) 規(guī)格: 50mg
五味子素;Schisandrin A 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP13) 規(guī)格: 20mg
;Tacrolimus 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP13) 規(guī)格: 20mg
四氫小檗;Tetrahydroberb 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP13) 規(guī)格: 20mg
蘇丹紅Ⅳ;Sudan IV;Solven 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP13) 規(guī)格: 20mg
豆寇單甘油酯;Momyristi 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP13) 規(guī)格: 20mg
七葉皂苷 IIa;Escin IIa 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP13) 規(guī)格: 10mg
EDIL3 表皮生長因子樣重復(fù)折疊1結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Deoxycorticosterone acetate
GLMN/FK506 binding protein associated protein FK506結(jié)合蛋白相關(guān)蛋白抗體(相關(guān)蛋白) 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml TetrahydroLBiopterin (dihydrochloride)
Aryl Hydrocarbon Receptor/AHR 芳香烴受體抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Ambrisentan
MEOX 2 間充質(zhì)同源盒蛋白2抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Ambrisentan
EphA3/Eph receptor A3 酪蛋白激酶受體A3抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Dronedarone HCL
EphA6/Eph receptor A6 酪蛋白激酶受體A6抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Dronedarone
EphA7/Eph receptor A7 酪蛋白激酶受體A7抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Ranolazine HCl
EphA8/Eph receptor A8 酪蛋白激酶受體A8抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Ranolazine HCl
無水羊毛脂 進口、國產(chǎn) 英文名稱:Lanolin 含量:GR
無水鋇 進口、國產(chǎn) 英文名稱:Bariumoxide 含量:CP,99%
無水鉑 進口、國產(chǎn) 英文名稱:Platinum(IV)oxide 含量:BR,99%
五羥基己 進口、國產(chǎn) 英文名稱:SodiumDgluconate 含量:BR,95%
五水亞 進口、國產(chǎn) 英文名稱:Sodiumphosphitedibasicpentahydrate 含量:BR,95%
五肽促胃液素 進口、國產(chǎn) 英文名稱:Pentagastrin 含量:BR,98%
五二鈳 進口、國產(chǎn) 英文名稱:Niobium(V)oxide 含量:BR,45%
戊基萘 進口、國產(chǎn) 英文名稱:Oxyvanadiumphthalocyanine 含量:試劑級,98%,二水物
戊脈安 進口、國產(chǎn) 英文名稱:(±)Verapamilhydrochloride 含量:超純,80%,液體
戊 進口、國產(chǎn) 英文名稱:Valericacid 含量:CP,98%
胚胎干細胞;E1C1MLCB寒天培地顆粒規(guī)格:250g用途:用于沙門氏菌分離培養(yǎng)
XLT4瓊脂規(guī)格:250g用途:用于食品中致病菌,特別是沙門氏菌分離培養(yǎng)
BCYE-CYS瓊脂基礎(chǔ)規(guī)格:100g用途:用于軍團菌的選擇性分離培養(yǎng)(ISO標準)
酪蛋白葡萄糖肉湯規(guī)格:250g用途:用于霉菌、酵母菌等的增菌培養(yǎng)
酵母浸粉規(guī)格:250g用途:培養(yǎng)基原材料,提供細菌生長所需的族
鳥氨脫羧酶肉湯規(guī)格:1ml*20用途:用于生化鑒定