細(xì)胞名稱 胚胎干細(xì)胞;E1C4
形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細(xì)胞屬保藏,其特征特性尚未公開。
培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
傳代方法: 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況: C5
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 陰性
公司細(xì)胞廣泛用于國內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實驗項目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
胚胎干細(xì)胞;E1C4 | 貼壁生長 | EY-X63707 |
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
Humantenine
CAS No.:82375-29-9
中文名:胡蔓藤乙
分子式:C21H26N2O3
平貝母 訂購|咨詢 接觸蛋白4(TN4) 規(guī)格: 5g
(豬) 訂購|咨詢 接觸蛋白4(TN4) 規(guī)格: 46Iu/支
大麥芽;4(2二基基基) 訂購|咨詢 接觸蛋白5(TN5) 規(guī)格: HPLC≥95%,20mg/支
齊墩果3OβD葡萄糖( 1→3 訂購|咨詢 接觸蛋白6(TN6) 規(guī)格: HPLC≥98%;5mg/支
人參皂苷Rg6 訂購|咨詢 接觸蛋白關(guān)聯(lián)蛋白1(TNAP1) 規(guī)格: HPLC≥98%:20mg/支
D()奎寧;右旋奎寧;D( 訂購|咨詢 接觸蛋白關(guān)聯(lián)蛋白樣蛋白2(TNAP2) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
豆甾 訂購|咨詢 接觸蛋白關(guān)聯(lián)蛋白樣蛋白4(TNAP4) 規(guī)格: HPLC≥95%,20mg/支
香紫蘇 訂購|咨詢 基質(zhì)Gla蛋白(MGP) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
草素 訂購|咨詢 基質(zhì)Gla蛋白(MGP) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
長春 訂購|咨詢 基質(zhì)抗原1(STAG1) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
丹參I 訂購|咨詢 基質(zhì)抗原2(STAG2) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
重樓皂苷VII;重樓皂苷VII 訂購|咨詢 基質(zhì)抗原3(STAG3) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
芳樟 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP1) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
羅漢果苷III 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP1) 規(guī)格: 20mg/支;HPLC≥98%
;山柰;3,4',5,7四羥基 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP1) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
黨參炔苷 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP1) 規(guī)格: HPLC≥98%,10mg/支
梣 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP1) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
冬凌草素 訂購|咨詢 基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP1) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
IFNA21/IFNA F 干擾素α21抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Chrysin
IFNAR2/IFNABR 干擾素α受體2抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Chrysin
IFNA11/Limitin/Interferon alpha 11 干擾素α11抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Formononetin
IFNA10/Interferon alpha10/Interferon alpha C 干擾素α10抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Formononetin
Otoraplin/OTOR/Fibrocyte derived protein 纖維細(xì)胞源性蛋白 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Daidzein
HSP10/CPN10 熱休克蛋白10抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Daidzein
ANGPTL6 血管生成素相關(guān)蛋白6抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml D()alloThreonine
RCAN2/DSCR1L1 鈣調(diào)神經(jīng)酶調(diào)節(jié)蛋白2抗體(唐氏綜合征候選區(qū)域蛋白1樣蛋白1) 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Deoxycorticosterone acetate
無水鉀 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:PotassiumSulfide 含量:BR
無水鈣 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Calciumchlorideanhydrous 含量:CP,98%
無水高鐵 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Iron(III)chloride 含量:AR,98%
無水鋰 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Lithiumchloride 含量:BR,99%
無水銅(Ⅱ) 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Copper(II)chloride 含量:AR,99%
無水亞錫 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Tin(II)chlorideanhydrous 含量:高純,99%,帶2水
無水硼砂 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Sodiumtetraboratedecahydrate 含量:CP
無水三鉻 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Chromium(III)chlorideanhydrous 含量:標(biāo)準(zhǔn)品,99%
無水三鋁 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Aluminumchlorideanhydrous 含量:AR,99.5%
無水鋅 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Zincbromide 含量:超純
胚胎干細(xì)胞;E1C4百里香酚蘭規(guī)格:25g用途:微生物指示劑
麥康凱瓊脂(MAC)規(guī)格:250g用途:用于腸道致病菌的選擇性分離培養(yǎng)
Korser氏枸椽鹽肉湯規(guī)格:100g用途:用于細(xì)菌枸椽鹽試驗(SN標(biāo)準(zhǔn))
包姜氏瓊脂培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于百日咳菌分離培養(yǎng)
發(fā)酵管-O157菌生化鑒定規(guī)格:20支詳情介紹
GC瓊脂規(guī)格:250g用途:用于淋球菌的分離培養(yǎng)