產(chǎn)品特點:
1、 使用方便:不需昂貴設(shè)備。
2、 可以處理各種細(xì)菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。
細(xì)胞名稱 前列腺癌細(xì)胞;LNCaPcloneFGC
形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 前列腺癌細(xì)胞LNCaPFGC是從一位50歲白人男性(血型B+)的左鎖骨淋巴結(jié)針刺活檢中分離,該患者經(jīng)確診為前列腺癌轉(zhuǎn)移。這株細(xì)胞對5-α-二氫睪酮(生長調(diào)節(jié)子和酸性磷酸脂酶產(chǎn)物)有響應(yīng)。這株細(xì)胞并不形成一致的單層,而是形成集落,在傳代時可以用滴管反復(fù)吹吸打碎。它們僅僅輕輕地吸附在基底上,不形成匯合,很快使培養(yǎng)基變酸。生長很慢。傳代后48小時內(nèi)不應(yīng)擾動。當(dāng)培養(yǎng)瓶封包后,多數(shù)細(xì)胞從培養(yǎng)瓶底分離,懸浮在培養(yǎng)基中。收到后,在通常培養(yǎng)單層細(xì)胞的條件下培養(yǎng)24到48小時,以合細(xì)胞再貼壁。
培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法: 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況: P(18+5)
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 陰性?
產(chǎn)品名稱 | 前列腺癌細(xì)胞;LNCaPcloneFGC |
生長特性 | 貼壁生長 |
貨號 | EY-X63921 |
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,超低比價,產(chǎn)品名稱貨期短,價格優(yōu),售后齊全。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程:
1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長至60%~70%融合時,用0.25%消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生的細(xì)胞,以0.25%消化成單細(xì)胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生的細(xì)胞用消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值。
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
血管緊張素Ⅰ受體抗體檢測試劑盒細(xì)胞名稱: 紅色熒光蛋白和螢光素酶標(biāo)記的人
鼠源雜交瘤;AV2G1用途: 獲得來源于Thermus菌屬的耐高溫酶類用于科學(xué)研究及功能檢測重鉻酸吡啶鎓Human TIMM22 ELISA Kit
抗T淋巴單克隆抗體雜交瘤;CD3注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用重鉻酸吡啶鎓Human THNSL2 ELISA Kit
雜交瘤;14A3拉丁屬名: Halosarcina pallida重鉻酸吡啶鎓Human TGM4 ELISA Kit
雜交瘤;11B6用途: 與檉麻共生固氮6-氯核苷Human TGIF2LX ELISA Kit
雜交瘤;GC-5D1拉丁屬名: Pseudomonas fluorescens6-氯核苷Human THOC2 ELISA Kit
雜交瘤;AVND-3C8拉丁屬名: Arthrobacter agilis2-溴喹啉Human THOC1 ELISA Kit
雜交瘤;HSP70拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae2-溴喹啉Human THEM2 ELISA Kit
雜交瘤;140-1用途: 利用水解液及廢液培養(yǎng)食用及飼料酵母2-溴喹啉Human SIRT5(NAD-dependent deacetylase sirtuin-5) ELISA Kit
雜交瘤;1F2拉丁屬名: Chryseobacterium gambrini2-巰基-N-甲酰Human THAP2 ELISA Kit
雜交瘤;Jurkat-LTRGT注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用N-Fmoc-N'-三苯甲基-D-谷氨酰Human THG1L ELISA Kit
雜交瘤;1D14A2A10注意事項:
樣acetylcholine receptor IgG1 antibody
前列腺癌細(xì)胞;LNCaPcloneFGC毛蕊異黃20575-57-9中文別名:3’-羥基芒柄花黃素
英文名:Calycosin
CAS登錄號:20575-57-9
分子式:C16H12O5
分子量:284.26
分子結(jié)構(gòu):
外觀:白色針晶 ()
規(guī)格:20mg/支
純度:≥ 98%
用途:用于含量測定/鑒定/藥理實驗等。
提取來源:黃芪根皮及樹皮提出的有效成分
熔點:204~205℃
藥理藥效:主要用于提高免疫功能,增強抗氧化、抗輻射和抗癌作用,保護(hù)心腦血管、肝臟、腎臟和肺臟作用,保護(hù)腦細(xì)胞、提高記憶力,舒張血管平滑肌,激素樣作用,抗菌及抑制病作用,降血脂、降血糖、減少糖尿病并發(fā)癥等。
貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光
有效期: 2年