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產(chǎn)品名稱(chēng) | 胚胎干細(xì)胞;E1C2 |
生長(zhǎng)特性 | 貼壁生長(zhǎng) |
貨號(hào) | EY-X63706 |
細(xì)胞名稱(chēng) 胚胎干細(xì)胞;E1C2
形態(tài)特性: 上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)
特征特性: 該細(xì)胞屬保藏,其特征特性尚未公開(kāi)。
培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
傳代方法: 1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況: C5
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè): 陰性
?
產(chǎn)品特點(diǎn):
1、 使用方便:不需昂貴設(shè)備。
2、 可以處理各種細(xì)菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時(shí)間縮短至30分鐘-1小時(shí)。
4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。
6、 紫外檢測(cè)蛋白濃度時(shí),背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程:
1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開(kāi),吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長(zhǎng)至60%~70%融合時(shí),用0.25%消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生的細(xì)胞,以0.25%消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ,計(jì)算貼壁率。
1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生的細(xì)胞用消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。
Vasicinolone
CAS No.:84847-50-7
中文名:
分子式:C11H10N2O3
人胰島素C肽 訂購(gòu)|咨詢(xún) 調(diào)節(jié)激活正常T細(xì)胞表達(dá)分泌因子(RANTES) 規(guī)格: 21ng/支
酒石托特羅定 訂購(gòu)|咨詢(xún) 調(diào)節(jié)激活正常T細(xì)胞表達(dá)分泌因子(RANTES) 規(guī)格: 50mg
半乳糖 訂購(gòu)|咨詢(xún) 調(diào)節(jié)激活正常T細(xì)胞表達(dá)分泌因子(RANTES) 規(guī)格: 300mg
鐵掃帚 訂購(gòu)|咨詢(xún) 調(diào)節(jié)激活正常T細(xì)胞表達(dá)分泌因子(RANTES) 規(guī)格: 4g
牛蒡子 訂購(gòu)|咨詢(xún) 調(diào)節(jié)激活正常T細(xì)胞表達(dá)分泌因子(RANTES) 規(guī)格: 0.5g
輔酶A 訂購(gòu)|咨詢(xún) 調(diào)節(jié)激活正常T細(xì)胞表達(dá)分泌因子(RANTES) 規(guī)格: 50mg/支
檳榔花 訂購(gòu)|咨詢(xún) 通用轉(zhuǎn)錄因子ⅡA肽1(GTF2A1) 規(guī)格: 2g
龍膽苦苷 訂購(gòu)|咨詢(xún) 通用轉(zhuǎn)錄因子ⅡB(GTF2B) 規(guī)格: 20mg
人參皂苷Rg3 訂購(gòu)|咨詢(xún) 通用轉(zhuǎn)錄因子ⅡE肽1(GTF2E1) 規(guī)格: 20mg
酰愛(ài)康寧 訂購(gòu)|咨詢(xún) 通用轉(zhuǎn)錄因子ⅡF肽1(GTF2F1) 規(guī)格: 20mg
20(S)人參皂苷F1 訂購(gòu)|咨詢(xún) 通用轉(zhuǎn)錄因子ⅡH肽1(GTF2H1) 規(guī)格: 20mg
鴨腳樹(shù)葉 訂購(gòu)|咨詢(xún) 通用轉(zhuǎn)錄因子ⅡH肽1(GTF2H1) 規(guī)格: 10mg
厚樸 訂購(gòu)|咨詢(xún) 排卵蛋白(LAYN) 規(guī)格: 20mg
1,30二??鼘?訂購(gòu)|咨詢(xún) 接觸蛋白1(TN1) 規(guī)格: 20mg
甘草(脹果甘草) 訂購(gòu)|咨詢(xún) 接觸蛋白1(TN1) 規(guī)格: 1g
酯蟾配基 訂購(gòu)|咨詢(xún) 接觸蛋白2(TN2) 規(guī)格: 20mg
磺必利 訂購(gòu)|咨詢(xún) 接觸蛋白3(TN3) 規(guī)格:
營(yíng)養(yǎng)湯對(duì)照培養(yǎng)基 訂購(gòu)|咨詢(xún) 接觸蛋白3(TN3) 規(guī)格: 1.8g/100mL
SSX5 滑膜肉瘤X斷點(diǎn)蛋白5抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Rubitecan
STEAP4/TNFAIP9 腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白9/前列腺六跨膜上皮抗原4抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Polyethylenepolypropylene glycol
STK31 絲/蘇蛋白激酶31抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Catharanthine hemitartrate
UTP14A/SDCCAG16 結(jié)腸癌抗原16抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Catharanthine sulfate
XAGE2 腫瘤/抗原12家族2抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Catharanthine sulfate
ITIH1 衍生透明質(zhì)相關(guān)蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Combretastatin A4
GBP5/Guanylate binding protein 5 核苷結(jié)合蛋白5抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Oxytetracycline
IFNA17/Interferon alpha 17/IFNA88 干擾素α17抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Oxytetracycline
鎢二水合物 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱(chēng):Sodiumtungstatedihydrate 含量:CP,97%
鎢銀 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱(chēng):Silvertungstate 含量:CP
無(wú)機(jī)焦酶 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱(chēng):InorganicPyrophosphatase 含量:BR,1500u/mg
無(wú)色結(jié)晶紫 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱(chēng):LCV 含量:ACS
無(wú)色孔雀石綠 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱(chēng):LeucomalachiteGreen 含量:BS
無(wú)水氟釹(III) 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱(chēng):Neodymiumtrifluoride 含量:BR,98%
無(wú)水二鉀 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱(chēng):Potassiumphosphatedibasic 含量:CP,98%
無(wú)水二 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱(chēng):Sodiumphosphatedibasic 含量:特純,97%
無(wú)水肌 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱(chēng):Creatinephosphatesodiumsalt 含量:AR,98.5%
無(wú)水三 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn) 英文名稱(chēng):TSP 含量:AR,99%
胚胎干細(xì)胞;E1C2胰酪胨大豆瓊脂培養(yǎng)基(TSA)規(guī)格:250g用途:用于藥品抑菌劑效力檢測(cè)中細(xì)菌檢測(cè)
化鎂孔雀綠肉湯(MM,RV Medium)規(guī)格:250g用途:用于沙門(mén)氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)
布氏肉湯添加劑(2ml/支)規(guī)格:2ml/支*5用途:添加于HBJ014中
紫紅膽鹽葡萄糖瓊脂對(duì)照培養(yǎng)基規(guī)格:8.3g/200mL,30袋/盒用途:培養(yǎng)基適用性實(shí)驗(yàn)
阪崎腸桿菌成套生化鑒定管規(guī)格:11種*2套/盒*5盒用途:用于阪崎桿菌的生化試驗(yàn)
改良麥康凱瓊脂添加劑規(guī)格:1ml/支*5用途:每支添加于200ml HB0121-3中