產(chǎn)品及特點(diǎn):
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,使每個循環(huán)變得“可見”。本產(chǎn)品就是以探針法熒光定量 RT-PCR 技術(shù)為基礎(chǔ)開發(fā)的專門檢測鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量PCR試劑盒的試劑盒。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
蝦肝腸微胞蟲探針法PCR熒光定量試劑盒 | Enterocytozoon hepatopenaei(EHP) | EY00P8917 |
運(yùn)輸及保存: 低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限為12個月。
自備試劑:樣品 RNA。
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
染料法
探針法
可進(jìn)行相對,定量表達(dá)分析,定性分析,SNP檢測等
實(shí)驗(yàn)報(bào)告
電泳圖 ·標(biāo)準(zhǔn)曲線
溶解曲線 ·擴(kuò)增曲線
完整的實(shí)驗(yàn)過程、試劑、儀器及分析報(bào)告
?
使用方法
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供無傳染性的 DNA 段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個樣品,設(shè)置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是 NC(樣品制備陰性對照)??梢杂?0μL陽性對照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費(fèi)贈送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝,該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板,省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9. 如果做定量分析并且只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個PCR 管,其中N+2個用于上步得到的 N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照(用水做模板),6個用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+4 個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1個用于PCR陽性對照(用第4號管的陽性對照稀釋液做模板)。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
叔丁基二苯基硅烷基三氟甲磺酸酯環(huán)吡酮;環(huán)匹羅司(標(biāo)準(zhǔn)品) glycochenodeoxycholic acid (GCDCA)
3-溴-5-氯三氟甲苯(標(biāo)準(zhǔn)品) Sodium taurohyodeoxycholate hydrate
5-溴-2-氯-3-吡啶環(huán)氨;滅蠅(標(biāo)準(zhǔn)品) Captisol( beta-Cyclodextrin, sulfobutyl ethers, sodium salts)
3-羥基十六烷酸環(huán)沙星(標(biāo)準(zhǔn)品) Valinomycin
基溴化鎂(約的四溶液,約2mol/L),環(huán)腺苷酸(標(biāo)準(zhǔn)品) 5-Chloro-1,3-dimethyl-1H-pyrazole
4-氯-1-環(huán)戊噻(標(biāo)準(zhǔn)品) Sodium glycodeoxycholate
3-羥基-2-萘甲?;?鄰-乙氧基苯磺吡啶(標(biāo)準(zhǔn)品) Sodium taurochenodeoxycholate
2-乙氧烯磺醋酰鈉 SA-NA(標(biāo)準(zhǔn)品) glycodeoxycholicacid
異基乙烯基磺二甲嘧啶 (標(biāo)準(zhǔn)品) Tunicamycin
N-(2-乙基)-N-羥乙基苯磺二甲氧基嘧啶(標(biāo)準(zhǔn)品) Scopolamine methyl bromide
甲磺酸異酯磺甲惡唑(標(biāo)準(zhǔn)品) Sodium deoxycholate
癸二酰肼磺甲基嘧啶(標(biāo)準(zhǔn)品) Tauroursodeoxycholic Acid Dihydrate
5-硝基糠二乙酸酯磺甲氧噠(標(biāo)準(zhǔn)品) Tauroursodeoxycholic Acid Sodium Salt
N-乙基-N-羥乙基苯磺間二甲氧嘧啶鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) Novobiocin sodium
3-(N,N-二甲基氨基)烯酸乙酯磺間甲氧嘧啶(標(biāo)準(zhǔn)品) Sulfamerazine
蝦肝腸微胞蟲探針法PCR熒光定量試劑盒胰島素樣生長因子1(IGF1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)鹽酸特拉唑 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR6次/盒
胰島素樣生長因子2(IGF2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)鹽酸特拉唑 質(zhì)量規(guī)格:BC1ml(500X)
腎素(REN)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)睪酮,素 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR6次/盒
組織因子(TF)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)睪酮,素 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BS6次/盒
內(nèi)皮素1(EDN1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)睪酮,素 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR3×1ml
半蛋白酶抑制劑3(CST3)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)睪酮,素 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR500 ml
骨橋素(OPN)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)睪酮(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格:>98%1ml(500X)
前列腺素E1(PGE1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 質(zhì)量規(guī)格:>97%,單氧化酶(MAO)抑制劑3×1ml