白堊立克次氏體PCR試劑盒步驟注意事項(xiàng):
1.基礎(chǔ)程序;
2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;
3.反應(yīng)時(shí)間;
4.循環(huán)次數(shù);
5.PCR 反應(yīng)液的配制;
6.PCR技術(shù)的基本原理;
7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);
8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;
9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
?
以下是白堊立克次氏體PCR試劑盒步驟的詳細(xì)說明書:
產(chǎn)品名稱 | 白堊立克次氏體PCR試劑盒步驟 |
英文名稱 | Rickettsia gravesiiPCR |
編號(hào) | EY00P1104 |
使用方法:
注:白堊立克次氏體PCR試劑盒步驟所有試劑使用前需*解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等,具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
取N個(gè)(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。
組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
以下是白堊立克次氏體PCR試劑盒步驟的相關(guān)產(chǎn)品,了解更多進(jìn)口PCR試劑盒點(diǎn)擊進(jìn)入。
原代內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝:5/2.5/1ml
IL20RB Others Rat 大鼠 IL20RB 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
大鼠子宮平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CHO-K1倉鼠卵巢細(xì)胞亞株 CHO-K1 Chinese hamster ovary cell subline F-12K+10%FBS
胰島素樣生長因子
E.G7-OVA(小鼠T淋巴瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人卵巢成纖維細(xì)胞HOF
RDFs, 大鼠真皮成纖維細(xì)胞 Rattus
CM-H048人胃粘膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
大鼠腦膜細(xì)胞(RMC)(5×105)
小鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞;Neuro-2a [N2a; Neuro-2a] 小鼠卵巢顆粒細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
人肝永生化細(xì)胞;THLE-3
FGFR1 Others Mouse 小鼠 FGFR1 / CD331 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
人腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
人小腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
人結(jié)腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
人直結(jié)腸平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
卵黃多粘菌素瓊脂基礎(chǔ)(MYP) 英文名稱; Mannitol-Egg-Yolk-Polymyxin Agar Base 規(guī)格; 250g
胰酪胨大豆多粘菌素肉湯基礎(chǔ) 英文名稱; Trypticase-Soy-Polymyxin Broth Base 規(guī)格; 250g
改良V-P培養(yǎng)基 英文名稱; V-P Medium,Modified 規(guī)格; 250g
胰酪胨大豆羊血瓊脂基礎(chǔ) 英文名稱; Trypticase Soy Sheep Blood Agar Base 規(guī)格; 250g
酪蛋白瓊脂 英文名稱; Casein Agar 規(guī)格; 250g
假單胞cfc選擇性培養(yǎng)基 Pseudomonas CFC Selective Agar 250g
可溶性淀粉培養(yǎng)基 Soluble Starch Medium 250g
AK瓊脂(2號(hào)) AK Agar(No.2) 250g
牛肝顆粒 100g
運(yùn)動(dòng)發(fā)酵單胞菌T培養(yǎng)基 Zymomonas Mobilis T Medium 250g
白堊立克次氏體PCR試劑盒步驟RVS肉湯 用于食品中沙門氏菌檢驗(yàn)選擇性增菌(ISO標(biāo)準(zhǔn))用途:用于沙門氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)。用法稱取本品 27.1g,加熱攪拌溶解于 1000ml 蒸餾水中,充分混勻,分裝,121℃高壓滅菌 15 分鐘,保存于 4 -10℃冰箱,備用。注:放置于 42℃水浴培養(yǎng)。
MKTTn肉湯(ISO) 用于食品中沙門氏菌檢驗(yàn)選擇性增菌(ISO標(biāo)準(zhǔn))用途:用于食品中沙門氏菌選擇性增菌培養(yǎng)。用法稱取本品 89.5g,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,迅速冷卻,此溶液在 2-8℃可保存 4 周,臨用前加入 20ml液(5g 溶解于 2ml蒸餾水,然后加入 4g ,加蒸餾水至 20ml),混勻,分裝試管,每管 10ml,當(dāng)天制備當(dāng)天使用,無需高壓滅菌。
賴氨酸鐵瓊脂(LIA) 用于食品中沙門氏菌生化試驗(yàn)(FDA標(biāo)準(zhǔn))用途:用于同時(shí)檢測(cè)腸桿菌科細(xì)菌的賴氨酸脫羧酶和產(chǎn)試驗(yàn),特別用于檢測(cè)沙門氏菌和亞利桑那菌。用法稱取本品 32.0g ,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,分裝于 13x100mm 試管中,每管4ml。121℃高壓滅菌 15 分鐘,冷至 60℃時(shí),制成斜面,斜面長 2.5cm,底部長 4cm。
改良MSRV培養(yǎng)基 用于沙門氏的分離培養(yǎng)(MERCK方法)用于沙門氏的分離培養(yǎng)(MERCK方法)產(chǎn)品用法:稱取本品 32.0g,加熱溶解于1000ml 蒸餾水中,煮沸1 分鐘,冷至 50℃左右時(shí), 每 200ml 培養(yǎng)基中加 1 支改良 MSRV 添加劑(新生霉素 2mg),混勻,傾入無菌平皿,備用。使用時(shí),正置培養(yǎng),采用點(diǎn)觸法接種。注:無需高壓滅菌。貯存方法:請(qǐng)放置陰涼干燥處保存
需要自備的器材:
1.白堊立克次氏體PCR試劑盒步驟儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。
特點(diǎn):
1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡(jiǎn)單,定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對(duì)照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。