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產(chǎn)品名稱 | 膀胱上皮永生化細胞;SV-HUC-1 |
生長特性 | 貼壁生長 |
貨號 | EY-X63917 |
細胞名稱 膀胱上皮永生化細胞;SV-HUC-1
形態(tài)特性: 上皮細胞
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 這株細胞是正常膀胱組織用SV40病毒轉(zhuǎn)染建株的。反復(fù)用非洲綠猴腎細胞平板測試檢測傳染性SV40的生成,結(jié)果都呈陰性。脅迫(如曝露于化學(xué)試劑)下可能激活病毒。ATCC還有一株化學(xué)轉(zhuǎn)化的成瘤細胞株,MC-SV-HUCT2,目錄號為CRL-9519。
培養(yǎng)條件: F12K優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%
傳代方法: 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況: P(30+5)
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 陰性
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產(chǎn)品特點:
1、 使用方便:不需昂貴設(shè)備。
2、 可以處理各種細菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學(xué)檢測。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程:
1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生的細胞,以0.25%消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生的細胞用消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。
饑餓素-O-乙?;D(zhuǎn)移酶檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞株;TWDB-WR-2形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Ghrelin-O-Acyltransferase
2',5'-寡腺苷合成酶1檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞株;IMI-G12形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣2',5'-Oligoadenylate Synthetase 1
Sushi重復(fù)含蛋白質(zhì)連鎖2檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞株;NZYT-ZJC形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Sushi repeat-containing protein SRPX
腫瘤壞死因子誘導(dǎo)蛋白8樣蛋白2檢測試劑盒細胞名稱: 中國倉鼠卵巢細胞;CHO-K1/CAF13形態(tài)特性: 上皮樣Tumor necrosis factor alpha-induced protein 8-like protein 2
L-型電壓依賴鈣離子通道α1F亞基檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞株;A6形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Calcium Channel, Voltage Dependent, L-Type, Alpha 1F Subunit
8-異構(gòu)前列腺素F2α檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞株;macroglobulin-M-01形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣8-epi-prostaglandin F2alpha
多巴胺受體D2檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞株;CD4-4D10形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Dopamine Receptor D2
猩紅熱抗體檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞株;F7-P-01形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Scarlet fever antibody
猩紅熱檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞株;LZLPHZ形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Scarlet fever
再生胰島衍生蛋白3α檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞株;F9-M-01形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Regenerating Islet Derived Protein 3 Alpha
皮膚衍生肽酶抑制因子3檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞株;α-antitrypsin-P-01形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Peptidase Inhibitor 3, Skin Derived
Grim19檢測試劑盒細胞名稱: 人肺癌細胞系;A549/EML4-ALK形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Grim19
促黃體生成素;絨毛膜受體檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞株;4C9形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Luteinizing Hormone; ChoriogonadotropinReceptor
天門冬氨氨基轉(zhuǎn)移同工酶檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞株;WLC001形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣aspartate aminotransferase
抗著絲粒蛋白F抗體檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞株;1C1形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣anti-centromere F antibody
醛脫氫酶1家族成員B1檢測試劑盒細胞名稱: 小鼠骨髓雜交瘤細胞;1G5形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Aldehyde Dehydrogenase 1 Family, Member B1
促睡眠肽α檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞株;6D7形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣δSIP-α
膀胱上皮永生化細胞;SV-HUC-1魯斯考皂苷元472-11-7中文別名:魯斯可皂苷元
英文名:Ruscogenin
CAS登錄號:472-11-7
分子式:C27H42O4
分子量:430.63
分子結(jié)構(gòu):
規(guī)格:20mg/支
純度:≥ 98%
用途:用于含量測定/鑒定/藥理實驗等。
提取來源:百合科沿階草屬植物麥冬(Ophiopogon japonicus(L•f•)Ker-Gawl•)的塊根
藥理藥效:具有顯著的抗炎、降低毛細血管通透性、調(diào)節(jié)前列腺功能失調(diào)、抑制G+菌和抗彈性蛋白酶等作用。
貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光
有效期: 2年