需要自備的器材：
1．斯氏普羅威登斯菌PCR試劑盒說明書儀器：分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調移液器（2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管、吸頭（10 µL、200 µL、1000 µL）、滅菌雙蒸水。
特點：
1.即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡單，定量準確快速。
2. 引物經過優(yōu)化，特異性強。預期的 PCR 產物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照，便于分析試驗結果。
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以下是斯氏普羅威登斯菌PCR試劑盒說明書的詳細說明書：
產品名稱 | 斯氏普羅威登斯菌PCR試劑盒說明書 |
英文名稱 | Providencia stuartiPCR |
編號 | EY00P1067 |
斯氏普羅威登斯菌PCR試劑盒說明書注意事項：
1．基礎程序；
2．擴增溫度和延伸溫度；
3．反應時間；
4．循環(huán)次數；
5．PCR 反應液的配制；
6．PCR技術的基本原理；
7．PCR的反應動力學；
8．PCR擴增產物；
9．PCR反應體系與反應條件。
使用方法：
注：斯氏普羅威登斯菌PCR試劑盒說明書所有試劑使用前需*解凍，混合均勻，6,000rpm離心數秒后使用。
1. 樣本處理（樣本處理區(qū)）
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等，具體提取方法請參照相關說明書；陽性質控品及陰性質控品無需提取，可直接使用。
2. 擴增試劑準備（PCR前準備區(qū)）
取N個（N=陰性質控品+待檢樣本+陽性質控品）PCR反應管，每管分別加入FMD RT-PCR反應液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應管)。
組分每頭份用量FMD RT-PCR反應液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應管于6,000rpm離心30s，轉移至樣本處理區(qū)。
2.加樣（樣本處理區(qū)）
3.在上述的PCR反應管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質控品和陽性質控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉移至擴增區(qū)。
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真皮成纖維細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)
ERBB2 Others Cynomolgus 食蟹猴 HER2 / ErbB2 人細胞裂解液 (陽性對照)
中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1
中國倉鼠肺細胞;CHL 卵巢癌細胞，NIH:OVCAR-3細胞 L8824細胞，草魚肝臟細胞
人胚皮膚成纖維細胞;CCC-ESF-1
HA Others H3N2 甲型流感 H3N2 (A/Wisconsin/67/X-161/2005) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照)
人骨髓間充質干細胞(hMSCs) Human
CM-M098小鼠內臟脂肪細胞*培養(yǎng)基100mL
15. 視覺細胞系統(tǒng)
小鼠原B細胞株;BaF3 小鼠肺大靜脈內皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
小鼠胰腺癌細胞(B類);Pan02
TNFRSF8 Others Human 人 TNFRSF8 / CD30 人細胞裂解液 (陽性對照)
MN-h, 小鼠海馬神經元
BPH-1, 人前列腺增生細胞 Human 現貨
MN-s, 小鼠紋狀體神經元
RL95-2, 人內膜腺癌細胞系 Human 現貨
志賀氏菌增菌肉湯 英文名稱； Shigiella Broth 規(guī)格； 250g
志賀氏菌顯色培養(yǎng)基 英文名稱； 規(guī)格； 1000ml
柯氏尿素瓊脂 英文名稱； 規(guī)格； 250g
MLCB寒天培地 英文名稱； MLCB Agar 規(guī)格； 250g
GN增菌液（10ml） 英文名稱； 規(guī)格； 10ml*20
腦心浸液瓊脂（BHIA） Brain Heart infusion Agar 250g
Pfizer腸球菌選擇性瓊脂（PSE瓊脂） Pfizer Enterococcus Selective Agar 250g
6.5%NaCl葡萄糖瓊脂 6.5% NaCl Dextrose Agar 250g
哥倫比亞血瓊脂基礎（改良） 250g
乙基紫疊氮鈉肉湯（litsky肉湯） 250g
斯氏普羅威登斯菌PCR試劑盒說明書多價蛋白胨-酵母膏（PY）培養(yǎng)基 用于產氣莢膜梭菌的培養(yǎng)(SN標準)用途:用于產氣莢膜梭菌糖（醇）發(fā)酵的基礎培養(yǎng)基。成分(g/L)多價胨 20.0酵母膏 5.0氯化鈉 5.0pH值6.9 ± 0.1 25℃用法稱取本品 30.0g,并加入 10g糖或醇,加熱溶解于 1000ml 蒸餾水中,分裝到螺帽試管內,每管 9ml,121℃高壓滅菌 15 分鐘,備用。
皰肉培養(yǎng)基基礎 加入粒,用于肉毒梭菌及厭氧梭狀芽孢桿菌的檢驗(GB標準)用途:用于厭氧菌的增菌培養(yǎng)。成分(g/L)蛋白胨 30.0浸粉 3.0酵母浸粉 5.0可溶性淀粉 2.0葡萄糖 3.0 5.0pH值7.0 - 7.4 25℃用法稱取本品 48.0g,加入 1000ml蒸餾水,加熱溶解并不停攪拌,煮沸 1 分鐘。取碎肉渣分裝 15mm×150mm 試管約 2-3cm高,將上述液體培養(yǎng)基分裝至每管內超過肉渣表面約 1cm。121℃高壓滅菌 15 分鐘備用。質量控制和典型特征36±1℃培養(yǎng) 24-72 小時,待出現生長特征(培養(yǎng)液渾濁、產氣、出現異味)后進行鏡檢和接種到分離培養(yǎng)基中(如鐵瓊脂)。反之,則報告陰性。
皰肉粒 加入皰肉基礎中，配成皰肉培養(yǎng)基加入皰肉基礎中，配成皰肉培養(yǎng)基
液體硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基 用于產氣莢膜梭菌確證試驗的細菌培養(yǎng)(GB.SN標準)用途:用于藥品、生物制品無菌檢測,檢測好氧菌和厭氧菌。成分(g/L)酪胨(水解) 15.0酵母浸出粉 5.0葡萄糖 5.0硫乙醇酸鈉 0.5L- 0.5氯化鈉 2.5刃天青 0.001瓊脂 0.75pH值7.1 ± 0.2 25℃用法稱取本品 29.25g,加熱攪拌溶解于 1000ml 純化水中,分裝適宜容器 ,其裝量與容器高度的比例應符合,培養(yǎng)結束后培養(yǎng)基氧化層 ( 粉紅色 ) 不超過培養(yǎng)基深度的 1/2 。121℃高壓滅菌 15 分鐘迅速冷卻。在供試品接種前,培養(yǎng)基氧化層高度不得超過培養(yǎng)基深度的 1/5 。否則,須經100℃水浴加熱至粉紅色消失( 不得超過 20 分鐘 ),迅速冷卻 ,只限加熱一次,并應防止被污染。
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