細胞名稱 興國鯉尾鰭細胞;XGL
形態(tài)特性: 成纖維細胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細胞來源于一興國鯉魚的尾鰭組織。1983年由中國科學院昆明細胞庫建立。培養(yǎng)溫度26-28℃。
培養(yǎng)條件: M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS
傳代方法: 1:2傳代;7-10天一次
傳代情況: P5
凍存條件: 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 熒光法(-)?
產(chǎn)品名稱 | 興國鯉尾鰭細胞;XGL |
生長特性 | 貼壁生長 |
貨號 | EY-X63735 |
產(chǎn)品特點:
1、 使用方便:不需昂貴設備。
2、 可以處理各種細菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程:
1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生的細胞,以0.25%消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生的細胞用消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。
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Eupalitin
CAS No.:29536-41-2
中文名:
分子式:C17H14O7
藜蘆基;3,4Dimethoxybe 訂購|咨詢 趨因子CC基元配體1(CCL1) 規(guī)格: 20mg
遼東楤木皂苷Ⅹ;Araloside X 訂購|咨詢 趨因子CC基元配體14(CCL14) 規(guī)格: 20mg
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磺;純品型;標準品;有證書 訂購|咨詢 趨因子CXC基元配體16(CXCL16) 規(guī)格: 0.1g
螺螨酯;純品型;標準品;有證書 訂購|咨詢 趨因子CXC基元配體16(CXCL16) 規(guī)格: 0.1g
三氧;純品型;標準品;有證書 訂購|咨詢 趨因子CXC基元配體16(CXCL16) 規(guī)格: 0.1g
Apoptosis enhancing nuclease 細胞凋亡增強核酶抗體 現(xiàn)貨供應 0.2ml Genistein
Cell death inducing protein/C16orf5 細胞死亡誘導蛋白抗體 現(xiàn)貨供應 0.2ml Luteolin
phosphoCASC3(Tyr181) 腫瘤易感候選基因3抗體 現(xiàn)貨供應 0.1ml Luteolin
CYFIP2 細胞質脆性X智力低下蛋白結合蛋白2抗體 現(xiàn)貨供應 0.2ml Ursolic acid
CSNK1D 酪蛋白激酶δ1抗體 現(xiàn)貨供應 0.2ml Ursolic acid
CDC14B 細胞分裂周期蛋白14B抗體 現(xiàn)貨供應 0.2ml Diosmetin
DUSP2 雙特異性酶2抗體 現(xiàn)貨供應 0.2ml Diosmetin
ETHE1 基二腦病蛋白抗體 現(xiàn)貨供應 0.2ml Cytisine
異戊基腺嘌呤核苷 進口、國產(chǎn) 英文名稱:2iPRiboside 含量:超純,99%
異戊酰嘌呤 進口、國產(chǎn) 英文名稱:2IP 含量:BR,99%
異煙酰肼 進口、國產(chǎn) 英文名稱:INAH 含量:AR,99.5%
抑肽素 進口、國產(chǎn) 英文名稱:PepstatinA 含量:BR,Ⅳ型,≥125CDU/mg
銦 進口、國產(chǎn) 英文名稱:Indium 含量:AR,98.5%
銀粉 進口、國產(chǎn) 英文名稱:Silver 含量:AR
銀片/銀 進口、國產(chǎn) 英文名稱:Silver 含量:BR,97%
銀試劑 進口、國產(chǎn) 英文名稱:Rhodanine 含量:AR
銀絲 進口、國產(chǎn) 英文名稱:Silver 含量:BR,99%
進口、國產(chǎn) 英文名稱:Ginkgobiloba 含量:CP,24.7%
興國鯉尾鰭細胞;XGLHBI乳菌生化鑒定條(GB)規(guī)格:5條/盒用途:用于乳菌的生化鑒定
N-AC-D-氨基葡萄糖規(guī)格:5g用途:微生物指示劑
玫瑰紅鈉瓊脂規(guī)格:BR250g詳情介紹
梭菌增菌培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于梭菌增菌培養(yǎng)
B5培養(yǎng)基(不含瓊脂)規(guī)格:250g用途:用于植物的組織培養(yǎng)
鹽瓊脂規(guī)格:250g用途:用于金黃色葡萄球菌選擇性分離培養(yǎng)