產(chǎn)品及特點(diǎn):
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,使每個(gè)循環(huán)變得“可見(jiàn)”。本產(chǎn)品就是以探針?lè)晒舛?RT-PCR 技術(shù)為基礎(chǔ)開(kāi)發(fā)的專(zhuān)門(mén)檢測(cè)鮑皰疹樣病毒探針?lè)晒舛縋CR試劑盒的試劑盒。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 貨號(hào) |
鼻疽假單胞菌探針?lè)≒CR熒光定量試劑盒 | Pseudomonas mallei | EY00P9283 |
運(yùn)輸及保存: 低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限為12個(gè)月。
自備試劑:樣品 RNA。
分類(lèi):熒光定量PCR試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)基因名稱(chēng)即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
染料法
探針?lè)ā?/font>
可進(jìn)行相對(duì),定量表達(dá)分析,定性分析,SNP檢測(cè)等
實(shí)驗(yàn)報(bào)告
電泳圖 ·標(biāo)準(zhǔn)曲線
溶解曲線 ·擴(kuò)增曲線
完整的實(shí)驗(yàn)過(guò)程、試劑、儀器及分析報(bào)告
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使用方法
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供無(wú)傳染性的 DNA 段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個(gè)樣品,設(shè)置N+2個(gè)提取,多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽(yáng)性對(duì)照),一個(gè)是 NC(樣品制備陰性對(duì)照)。可以用10μL陽(yáng)性對(duì)照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購(gòu)本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費(fèi)贈(zèng)送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝,該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板,省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9. 如果做定量分析并且只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR 管,其中N+2個(gè)用于上步得到的 N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照(用水做模板),6個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+4 個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),1個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照(用第4號(hào)管的陽(yáng)性對(duì)照稀釋液做模板)。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照,并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加)
京尼平甲磺酸*Human ERGIC2 ELISA Kit
京尼平*Human ERBB3 ELISA Kit
桔梗皂苷D(標(biāo)準(zhǔn)品)甲磺酸*Human ERBB4(Receptor tyrosine-protein kinase erbB-4) ELISA Kit
菊苣酸(標(biāo)準(zhǔn)品)甲磺酸雷沙吉蘭Human EPB41L2 ELISA Kit
具棲冬青苷(標(biāo)準(zhǔn)品)甲磺酸*Human ERC1 ELISA Kit
(標(biāo)準(zhǔn)品)*Human EPB41L3 ELISA Kit
莰烯(標(biāo)準(zhǔn)品)甲基*Human EPHA6 ELISA Kit
科羅索酸(標(biāo)準(zhǔn)品)甲硫二苯馬尼/二苯馬尼甲硫酸鹽Human EPHA7 ELISA Kit
*(標(biāo)準(zhǔn)品)*/他巴唑/2-巰基-1-甲基咪唑Human EPHX2 ELISA Kit
*(標(biāo)準(zhǔn)品)甲氧氯普Human EPHA8 ELISA Kit
**Human EFNB1(Ephrin B1) ELISA Kit
*伐倫克林Human EPN3 ELISA Kit
*托特羅定Human EPRS ELISA Kit
D-(-)-奎寧酸(標(biāo)準(zhǔn)品)溴莫尼定Human EPS15R ELISA Kit
*,辣椒素(天然提取標(biāo)準(zhǔn)品)卡泊三Human EPSTI1 ELISA Kit
鼻疽假單胞菌探針?lè)?/font>PCR熒光定量試劑盒卵泡抑素樣蛋白3(FSTL3)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)2D電泳樣品溶解液 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
甲硫氨酰氨肽酶2(METAP2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)鄰乙氧基苯甲(>98%,BR) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,BR
神經(jīng)肽Y受體Y2(NPY2R)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)鄰乙氧基苯甲酸(>98%,BR) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
神經(jīng)肽Y受體Y1(NPY1R)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)2-乙基丁酸(>99%,BR) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,BR
Anoctamin 6蛋白(ANO6)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)鄰羥基苯乙酮(>99%,BR) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
白三烯A4水解酶(LTA4H)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)2-羥基(>98%,BR) 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR
*Ⅺ(F11)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)2-異基咪唑(>98%,BR) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
肽聚糖識(shí)別蛋白1(PGLYRP1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)2-萘乙酸(植物激素級(jí)) 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品