公司細(xì)胞廣泛用于國內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
黑化大家鼠肺成纖維細(xì)胞;NRm | 貼壁生長 | EY-X63733 |
細(xì)胞名稱 黑化大家鼠肺成纖維細(xì)胞;NRm
形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細(xì)胞系來源于一雄性黑化型挪威大鼠的肺組織。1985年由中國科學(xué)院昆明細(xì)胞庫建立。
培養(yǎng)條件: M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS
傳代方法: 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況: P2
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 熒光法(-)
?
冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Mosloflavone
CAS No.:740-33-0
中文名:5-羥基-6,7-二甲氧基黃
分子式:C17H14O5
纖細(xì);纖細(xì)薯蕷皂甙 訂購|咨詢 維誘導(dǎo)基因1蛋白(RIG1) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
告亭甙元; 告亭苷元 訂購|咨詢 (VA) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
黃柏;奧巴叩 訂購|咨詢 1(VB1) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
科羅索; 2alpha羥基熊果 訂購|咨詢 12(VB12) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
馬錢苷; 馬錢; 落干 訂購|咨詢 6(VB6) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
遼東楤木皂苷VII 訂購|咨詢 9(VB9) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
果糖 訂購|咨詢 (VC) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
植 訂購|咨詢 (VD) 規(guī)格: HPLC≥94%,20mg/支
蒼耳亭 訂購|咨詢 2(VD2) 規(guī)格: HPLC≥98%,5mg/支
芹菜素;芹黃素;5,7,4'三羥基黃 訂購|咨詢 3(VD3) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
京平; 格泊素 訂購|咨詢 4(VD4) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
羅漢果皂甙V;羅漢果皂苷V;羅漢果甜苷V 訂購|咨詢 5(VD5) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
蒼術(shù)素 訂購|咨詢 受體(VDR) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
(R型)原人參三 訂購|咨詢 受體(VDR) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
丹參IIA磺; 丹參IIA磺 訂購|咨詢 受體(VDR) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
五倍子(肚倍) 對照品 訂購|咨詢 結(jié)合蛋白(DBP) 規(guī)格: 1g
2基5基咪唑 對照品 訂購|咨詢 結(jié)合蛋白(DBP) 規(guī)格: 50mg
恩諾星 對照品 訂購|咨詢 結(jié)合蛋白(DBP) 規(guī)格: 100mg;99.9%
Blood Group Kell Antigen/CD238 凱爾血型糖蛋白CD238抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Gimeracil
Blood Group Lewis a 血型Lewis a抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Gimeracil
DARC/CD234 Duffy血型趨因子受體抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Daurinoline
Galactosidase alpha α半乳糖苷酶抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Magnoflorine chloride
Ankyrin erythroid 紅細(xì)胞蛋白Ank1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Magnoflorine
PPM1F 鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激酶酶抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Magnoflorine iodide
RIP3 受體結(jié)合絲蘇激酶3抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Higenamine hydrochloride
RIP5/RIPK5 受體結(jié)合絲蘇激酶5抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Higenamine hydrochloride
铔 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Ammoniumacetate 含量:BR
亞鈷 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Cobaltousacetatetetrahydrate 含量:BR,99%
酰醋甲酯 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:MAA 含量:SP,99.5%
酰膽酯酶 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:ACHE 含量:生物技術(shù)級,200u/mg,粉末
酰二甲 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:NBS 含量:BR
酰輔酶A 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:AcetylCoA 含量:BR,50u/mg
?;?/font> 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:NMethylacetamide 含量:BR
?;鶛幟术ト□?/font> 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Acetyltributylcitrate 含量:2.5N,99.5%
?;?/font> 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:ACH 含量:3N,200目
酰甲 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Pyruvicacid 含量:高純,99%
黑化大家鼠肺成纖維細(xì)胞;NRm李斯特氏菌顯色平板(9cm)規(guī)格:10個/包詳情介紹
假單胞菌瓊脂培養(yǎng)基F規(guī)格:250g用途:用于假單胞菌,特別是綠膿假單胞菌的
氧氣指示劑規(guī)格:1.5ml/支*10用途:用于指示厭氧環(huán)境(用于2.5L厭氧培養(yǎng)袋)
鋰鹽規(guī)格:5mg/支*5用途:每支添加于100ml HB0384-6中
MFC肉湯規(guī)格:250g用途:用于大腸菌群的濾膜法檢測(GB 標(biāo)準(zhǔn))
甲基紅試劑盒規(guī)格:5ml*2用途:用于甲基紅試驗(yàn)
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。