公司細胞廣泛用于國內(nèi)院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產(chǎn)品詳細介紹:
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
小耳豬腎細胞;SEPfk | 貼壁生長 | EY-X63732 |
細胞名稱 小耳豬腎細胞;SEPfk
形態(tài)特性: 成纖維細胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細胞系來源于一雌性小耳豬的腎組織。1988年由中國科學院昆明細胞庫建立。
培養(yǎng)條件: M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS
傳代方法: 1:2傳代;4-5天一次
傳代情況: P4
凍存條件: 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 熒光法(-)
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冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Volkensiflavone
CAS No.:27542-37-6
中文名:
分子式:C30H20O10
異歐前胡素 訂購|咨詢 蛋白激酶抑制因子γ(PKIγ) 規(guī)格: 20mg
訂購|咨詢 蛋白激酶抑制因子γ(PKIγ) 規(guī)格: 22.8IU/支
射干 訂購|咨詢 蛋白激酶抑制因子γ(PKIγ) 規(guī)格: 1g
馬鞭草 訂購|咨詢 蛋白酶1調(diào)節(jié)因子亞基18(PPP1R18) 規(guī)格: 2g
樟腦 訂購|咨詢 蛋白酶1調(diào)節(jié)因子亞基1B(PPP1R1B) 規(guī)格: 30mg
單體二聚體 訂購|咨詢 蛋白酶3調(diào)節(jié)因子亞基1(PPP3R1) 規(guī)格: 0.5mg
大溶液(1mg/ml) 訂購|咨詢 蛋腺苷轉移酶Ⅰα(MAT1α) 規(guī)格: 0.3ml
漢黃芩素 訂購|咨詢 蛋腺苷轉移酶Ⅰα(MAT1α) 規(guī)格: 20mg
枸櫞 訂購|咨詢 蛋腺苷轉移酶Ⅱα(MAT2α) 規(guī)格: 200mg
吳茱萸內(nèi)酯(檸檬苦素) 訂購|咨詢 隱花色素1(CRY1) 規(guī)格: 20mg
人參二 訂購|咨詢 隱花色素2(CRY2) 規(guī)格: 20mg
訂購|咨詢 維X受體α(RXRα) 規(guī)格: 100mg
甘草銨 訂購|咨詢 維X受體α(RXRα) 規(guī)格: 20mg
無味B晶型 訂購|咨詢 維受體α(RARα) 規(guī)格: 100mg
龍膽(堅龍膽) 訂購|咨詢 維受體α(RARα) 規(guī)格: 1g
人參皂苷Re 訂購|咨詢 維受體β(RARβ) 規(guī)格: 20mg
白當歸素; 比克白芷內(nèi)酯; 比克白芷素 訂購|咨詢 維受體γ(RARγ) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
草質(zhì)素;蜀葵苷元;蜀葵甙元;3,4′,5 訂購|咨詢 維受體應答基因1(RARRES1) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
BCL2L15 BCL2樣15促凋亡蛋白抗體 現(xiàn)貨供應 0.2ml Fangchinoline
BTF/BCLAF1 Bcl2相關轉錄因子抗體 現(xiàn)貨供應 0.2ml Solasurine
Bcl rambo/Bcl 2 like 13 protein Bcl2樣凋亡蛋白13抗體 現(xiàn)貨供應 0.2ml Sparteini Sulfas
Bcl G/BCL2 like 14 Bcl2樣凋亡蛋白14抗體 現(xiàn)貨供應 0.2ml ()Sparteini Sulfas
BOK/Bcl 2 like protein 9 Bcl2樣凋亡蛋白9抗體 現(xiàn)貨供應 0.2ml Synephrine
Bmf/Bcl2 modifying factor Bcl2蛋白修飾因子抗體 現(xiàn)貨供應 0.2ml Synephrine
A4GALT/CD77 α1,4半乳糖基轉移酶1 現(xiàn)貨供應 0.2ml Synephrine HCl
Blood Group Antigen Precursor 血型抗原前體蛋白抗體 現(xiàn)貨供應 0.2ml Cephalomannine
基(1十六基)二甲基銨 進口、國產(chǎn) 英文名稱:CDAB 含量:IND
基代 進口、國產(chǎn) 英文名稱:Ethylbenzene 含量:AR,99%
基異丁基甲基甲 進口、國產(chǎn) 英文名稱:3,5Dimethylhexanol 含量:SP,99.8%
酰 進口、國產(chǎn) 英文名稱:Ethanethioamide 含量:AR
脫氫酶 進口、國產(chǎn) 英文名稱:AldehydeDehydrogenase,potassiumactivated 含量:BR,5′d(NNNNNNNNN)3′
萘酯 進口、國產(chǎn) 英文名稱:αNapthylacetate 含量:超純,98%
萘酯 進口、國產(chǎn) 英文名稱:βNapthylacetate 含量:高純,98%,無水物
基甲基酯 進口、國產(chǎn) 英文名稱:Benzylacetate 含量:1750±50類型
鎘二水合物 進口、國產(chǎn) 英文名稱:Cadmiumacetatedihydrate 含量:CP,98%
辛酯 進口、國產(chǎn) 英文名稱:Octylacetate 含量:AR,98%
小耳豬腎細胞;SEPfk麥芽汁培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于霉菌和酵母菌增菌培養(yǎng)
平板計數(shù)瓊脂(PCA)規(guī)格:250g用途:標準平板計數(shù)瓊脂,含糖,用于細菌總數(shù)的測定(GB、SN標準)
牛大腸埃希氏菌“o”抗原定型血清規(guī)格:1ml用途:有效期10年
改良EC(MEC+n)肉湯規(guī)格:新生霉素用途:4.5mg每支含量
霉菌酵母菌快檢紙片(污水)規(guī)格:20份/包用途:用于霉菌酵母菌快速檢驗
幽門螺旋桿菌固體培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于幽門螺桿菌的分離培養(yǎng)
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。