以下是卡氏住白細胞原蟲PCR試劑盒步驟的詳細說明書:
產(chǎn)品名稱 | 卡氏住白細胞原蟲PCR試劑盒步驟 |
英文名稱 | Leucocytozoon caulleryiPCR |
編號 | EY00P763 |
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卡氏住白細胞原蟲PCR試劑盒步驟注意事項:
1.基礎(chǔ)程序;
2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;
3.反應(yīng)時間;
4.循環(huán)次數(shù);
5.PCR 反應(yīng)液的配制;
6.PCR技術(shù)的基本原理;
7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);
8.PCR擴增產(chǎn)物;
9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
需要自備的器材:
1.卡氏住白細胞原蟲PCR試劑盒步驟儀器:分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。
特點:
1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照,便于分析試驗結(jié)果。
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沙氏葡萄糖瓊脂(含)250g用于霉菌和酵母菌的分離培養(yǎng)
MIO培養(yǎng)基 100(g) incubation media MIO培養(yǎng)基 100(g)
1% NaC1蔗糖發(fā)酵管 1% NaC1蔗糖發(fā)酵管 20支 BR
YPD瓊脂250用于測定酵母菌總數(shù)(GB標(biāo)準(zhǔn))incubationmediaYPD瓊脂250用于測定酵母菌總數(shù)(GB標(biāo)準(zhǔn))
Mueller-HintonAgar
FBitive(A、B)
BLB培養(yǎng)基 BLB Medium 用于雙歧桿菌的分離培養(yǎng)
BGS瓊脂 BGS Agar 250克 沙門氏菌分離培養(yǎng)
肝浸液培養(yǎng)基250g/瓶用于布魯氏菌屬分離incubationmedia肝浸液培養(yǎng)基250g/瓶用于布魯氏菌屬分離
膽鹽七葉苷瓊脂 250g 用于腸球菌和腸道致病菌的分離培養(yǎng)
改良BPLS瓊脂250g用于各種標(biāo)本中沙門氏菌選擇性分離培養(yǎng)(ISO標(biāo)準(zhǔn))
肉膏酵母葡萄糖瓊脂 250g 用于厭氧菌培養(yǎng)
高鹽察氏瓊脂 Salt Czapek Dox Agar 250 用于霉菌和酵母菌的計數(shù)(GB標(biāo)準(zhǔn))
Amies運送培養(yǎng)基250g/瓶用于致病菌標(biāo)本的采集、運輸和保存incubationmediaAmies運送培養(yǎng)基250g/瓶用于致病菌標(biāo)本的采集、運輸和保存
NutrientAgar
豬細胞;ST
VEGFC Others Rat 大鼠 VEGFC / VEGF-C (aa 108-223) 人細胞裂解液 (陽性對照)
人氣管平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL
OCM-1A細胞,人低侵襲性脈絡(luò)膜黑色素素瘤細胞 綠色木霉 小鼠樹突狀細胞肉瘤細胞;DCS
CCL28 Protein Human 重組人 CCL28 蛋白 (His 標(biāo)簽)
LM/TK(小鼠胸腺激酶缺陷細胞) 5×106cells/瓶×2 人 Cardioophin-1 / CTF1 人細胞裂解液 (陽性對照)
Lewis 小鼠肺癌細胞
SKOV3 [SK-OV-3], 人卵巢癌腺癌細胞系
人小腦星形膠質(zhì)細胞( Hac) (1×106 )
人導(dǎo)管瘤細胞;UACC812 大鼠腎系膜細胞*培養(yǎng)基 100mL
小鼠腎足細胞;Mouse podocyte
FLT4 Others Mouse 小鼠 FLT-4 / VEGFR3 人細胞裂解液 (陽性對照)
卡氏住白細胞原蟲PCR試劑盒步驟HO-8910 人癌細胞
HOS 骨肉瘤
HPB-ALL(懸?。?/span> T細胞白血病
Hs 578T 人癌細胞
使用方法:
注:卡氏住白細胞原蟲PCR試劑盒步驟所有試劑使用前需*解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關(guān)說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。
2. 擴增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
取N個(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應(yīng)管)。
組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴增區(qū)。