運(yùn)輸及保存: 低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限為12個(gè)月。
自備試劑:樣品 RNA。
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)基因名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
染料法
探針法
可進(jìn)行相對(duì),定量表達(dá)分析,定性分析,SNP檢測(cè)等
實(shí)驗(yàn)報(bào)告
電泳圖 ·標(biāo)準(zhǔn)曲線
溶解曲線 ·擴(kuò)增曲線
完整的實(shí)驗(yàn)過程、試劑、儀器及分析報(bào)告?
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
鴕鳥源性成分探針法PCR熒光定量試劑盒 | 50次 | EY00P9565 |
使用方法
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照,只提供無傳染性的 DNA 段作為陽性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個(gè)樣品,設(shè)置N+2個(gè)提取,多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽性對(duì)照),一個(gè)是 NC(樣品制備陰性對(duì)照)。可以用10μL陽性對(duì)照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費(fèi)贈(zèng)送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝,該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板,省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9. 如果做定量分析并且只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR 管,其中N+2個(gè)用于上步得到的 N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照(用水做模板),6個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+4 個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),1個(gè)用于PCR陽性對(duì)照(用第4號(hào)管的陽性對(duì)照稀釋液做模板)。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對(duì)照,并且陽性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加)
產(chǎn)品及特點(diǎn):
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,使每個(gè)循環(huán)變得“可見”。本產(chǎn)品就是以探針法熒光定量 RT-PCR 技術(shù)為基礎(chǔ)開發(fā)的專門檢測(cè)探針法熒光定量PCR試劑盒的試劑盒。
仙臺(tái)病核蛋白(321-336)乙酸丁酯 for HPLC, ≥99.7% (GC)Human TAF7 ELISA Kit
仙臺(tái)病核蛋白(SV9),324-332環(huán)己烷 for HPLC, ≥99.9%Human TAF6L ELISA Kit
SEQ ID NO:5491-氯丁烷 for HPLC, ≥99.5%Human TAF5L ELISA Kit
Ser-Ala-SAP-IIB二硫化碳 低苯級(jí),low benzene, ≥99.9%Human DNASE1(Deoxyribonuclease-1) ELISA Kit
血清胸腺因子環(huán)戊烷 for HPLC,農(nóng)殘級(jí),≥75% (GC)Human TAF9(Transcription initiation factor TFIID subunit 9) ELISA Kit
SH2功能域配體(1)環(huán)己烷 ACS光譜級(jí), ≥99.5% (GC)Human TAF9B ELISA Kit
SH2功能域配體(2)三氯 for HPLC, ≥99.8%(劇品)Human Syntaxin 10 ELISA Kit
SH2功能域配體(3)1,2-二氯乙烷 for HPLC, ≥99.9%Human STX1A(Syntaxin-1A) ELISA Kit
SH2功能域配體(4)乙酸乙酯 農(nóng)殘級(jí)Human Syntaxin 11 ELISA Kit
sHNG, [Gly14] –神經(jīng)氨酸酶,[Gly14] –靶標(biāo)氟羅里硅土 農(nóng)殘級(jí)Human Syntaxin 12 ELISA Kit
唾液激肽-2正庚烷 農(nóng)殘級(jí), ≥99%(GC)Human Syntaxin 17 ELISA Kit
猿猴病40大腫瘤抗原氨基段肽段正庚烷 for HPLC, ≥99%(GC)Human Syntaxin 16 ELISA Kit
猿猴免疫缺損病mac239-1異辛烷 for HPLC,>99% (GC)Human Syntaxin 2 ELISA Kit
猿猴免疫缺損病mac239-2異辛烷 ACS, ≥99.0%Human Syntaxin 3 ELISA Kit
猿猴免疫缺損病mac251(gp140)片段(171-190)[Cys]異丁 for HPLC, ≥99.5%(GC)Human Syntaxin 18 ELISA Kit
鴕鳥源性成分探針法PCR熒光定量試劑盒耳蝶呤2(OTOP2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)3-苯氧芐(98%) 質(zhì)量規(guī)格:≥85%(HPLC)
耳蝶呤1(O)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)3-苯氧芐(98%) 質(zhì)量規(guī)格:0.96
耳蝸蛋白(OTOS)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)果膠(半乳糖酸(干基計(jì))≥74.0 %) 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
O-唾液酸糖蛋白內(nèi)肽酶(OSGEP)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)果膠(半乳糖酸(干基計(jì))≥74.0 %) 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
骨調(diào)蛋白(OMD)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)燒堿石棉(CP,20-30目) 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
耳椎蛋白90(OC90)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)硅鉬粉(99.8%) 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
眼質(zhì)蛋白(OCLM)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)硅鉬粉(99.8%) 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
癌調(diào)蛋白(OCM)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)燒堿石棉(CP,10-20目) 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.8%