公司細(xì)胞廣泛用于國(guó)內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
產(chǎn)品名稱 | 生長(zhǎng)特性 | 貨號(hào) |
小鼠肺成纖維細(xì)胞;WML2 | 貼壁生長(zhǎng) | EY-X63752 |
細(xì)胞名稱 小鼠肺成纖維細(xì)胞;WML2
形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性: 貼壁生長(zhǎng)
特征特性: 該細(xì)胞系來(lái)源于一雄性小鼠的肺組織。1985年中國(guó)科學(xué)院昆明細(xì)胞庫(kù)建立。
培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)15%NBS
傳代方法: 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況: P6
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè): 熒光法(-)
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí), 以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Tricin 7-O-glucoside
CAS No.:32769-01-0
中文名:苜蓿素-7-O-葡萄糖苷
分子式:C23H24O12
三七皂苷R1 訂購(gòu)|咨詢 跨膜蛋白27(TMEM27) 規(guī)格: 20mg
圣草次苷 訂購(gòu)|咨詢 跨膜蛋白27(TMEM27) 規(guī)格: 20mg
1羥基2,3,4,7四氧基山山 訂購(gòu)|咨詢 跨膜蛋白27(TMEM27) 規(guī)格: 10mg
熊去氧膽 訂購(gòu)|咨詢 跨膜蛋白2樣蛋白(TMEM2L) 規(guī)格: 20mg
新芒果苷 訂購(gòu)|咨詢 跨膜蛋白5(TMEM5) 規(guī)格: 20mg
鄰氧基桂 訂購(gòu)|咨詢 蝸管蛋白(COIL) 規(guī)格: 20mg
基蓮心 訂購(gòu)|咨詢 嗅素1(OLFM1) 規(guī)格: 20mg
葒草苷 訂購(gòu)|咨詢 嗅素2(OLFM2) 規(guī)格: 20mg
厚樸 訂購(gòu)|咨詢 嗅素3(OLFM3) 規(guī)格: 20mg
異佛手柑內(nèi)酯 訂購(gòu)|咨詢 嗅素4(OLFM4) 規(guī)格: 20mg
隱綠原 訂購(gòu)|咨詢 嗅素4(OLFM4) 規(guī)格: 20mg
豆甾(95%) 訂購(gòu)|咨詢 嗅素4(OLFM4) 規(guī)格: 20mg
香葉木素 訂購(gòu)|咨詢 嗅蛋白(Olfactorin) 規(guī)格: 20mg
華基(97%) 訂購(gòu)|咨詢 錨定蛋白重復(fù)域蛋白1(ANKRD1) 規(guī)格: 20mg
長(zhǎng)春瑞濱 訂購(gòu)|咨詢 錨定蛋白重復(fù)域蛋白1(ANKRD1) 規(guī)格: 20mg
蒼術(shù)素 訂購(gòu)|咨詢 錨定蛋白重復(fù)域蛋白1(ANKRD1) 規(guī)格: 20mg
白花前胡素 訂購(gòu)|咨詢 錫蛋白(SNN) 規(guī)格: 20mg
補(bǔ)骨脂二氫黃 訂購(gòu)|咨詢 催產(chǎn)素(OT) 規(guī)格: 20mg
WAPL EBV核蛋白2抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Sodium phosphate, dibasic, heptahydrate
CAPD3/hCAPD3 濃縮素2復(fù)合亞基D3抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml dATP 100 mM solution
AMSH 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)銜接結(jié)合蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Sodium decanoate
ASB3 錨蛋白重復(fù)序列細(xì)胞因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族3抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Agarose
EIF2C1/Ago1 真核翻譯起始因子2C1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Agarose
Anillin 胞環(huán)蛋白肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Phytohemagglutinin
BIN3 細(xì)胞骨架銜接蛋白BIN3抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Kinetin,6Furfurylaminopurine
CCDC11 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白11抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml EGTA, egtazic acid
紅相關(guān)物質(zhì)N標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:50mg 英文名稱:
吡嗪酰標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Pyrazinamide
()表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酯標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:20mg 英文名稱:
煙酰標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:500mg 英文名稱:Niacinamide (Vitamin B3)
異標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:1.2ml×3ampules 英文名稱:Cumene
曲三硅相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:25mg 英文名稱:
醋標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:500mg 英文名稱:Betamethasone Acetate
阿散標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:25mg 英文名稱:Arsanilic Acid
琥珀美爾標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Metoprolol Succinate
非那雄標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:200mg 英文名稱:Finasteride
小鼠肺成纖維細(xì)胞;WML2棉子糖-雙岐桿菌鑒定規(guī)格:20支詳情介紹
牛津瓊脂(OXA)平板(9cm)規(guī)格:10個(gè)/包用途:用于單增李氏菌的選擇性分離
無(wú)氮培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于自生固氮菌和鉀細(xì)菌的培養(yǎng)
輔酶I(NDA)規(guī)格:1g用途:進(jìn)口
匹克氏肉湯基礎(chǔ)A規(guī)格:100g用途:用于溶血性鏈球菌的增菌培養(yǎng) ,需添加脫纖維羊血(GB標(biāo)準(zhǔn))
SIM動(dòng)力培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于動(dòng)力試驗(yàn)
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無(wú)菌 PBS、Hanks 液或無(wú)血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過(guò)細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時(shí)間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來(lái),吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng),未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來(lái)。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時(shí)間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。