人皰疹病毒通用PCR試劑盒步驟注意事項:
1.基礎(chǔ)程序;
2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;
3.反應(yīng)時間;
4.循環(huán)次數(shù);
5.PCR 反應(yīng)液的配制;
6.PCR技術(shù)的基本原理;
7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);
8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;
9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
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以下是人皰疹病毒通用PCR試劑盒步驟的詳細(xì)說明書:
產(chǎn)品名稱 | 人皰疹病毒通用PCR試劑盒步驟 |
英文名稱 | Human Herpesvirus RTPCR |
編號 | EY00P644 |
使用方法:
注:人皰疹病毒通用PCR試劑盒步驟所有試劑使用前需*解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關(guān)說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
取N個(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應(yīng)管)。
組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
以下是人皰疹病毒通用PCR試劑盒步驟的相關(guān)產(chǎn)品,了解更多進(jìn)口PCR試劑盒點(diǎn)擊進(jìn)入。
Raji,人Butt's淋巴瘤細(xì)胞
HAN 人羊膜細(xì)胞
CSF1 Others Human 人 / 食蟹猴 M-CSF / CSF-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
CM-R107大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
小鼠間充質(zhì)干細(xì)胞-骨髓MMSC-bm
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0919 人成骨細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
CL-0048Ca Ski(人上皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
BTLA Others Cynomolgus 食蟹猴 BTLA 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
溶液 200 mML-Gue
SNU-398細(xì)胞,人肝癌細(xì)胞 人類胚胎腎臟表皮細(xì)胞,H293T細(xì)胞 視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
大耳山羊腎細(xì)胞;LDG-2
SFRP1 Others Human 人 sFRP1 / SARP2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
Raji,人Butt's淋巴瘤細(xì)胞
HAN 人羊膜細(xì)胞
CSF1 Others Human 人 / 食蟹猴 M-CSF / CSF-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
CM-R107大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
小鼠間充質(zhì)干細(xì)胞-骨髓MMSC-bm
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0919 人成骨細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
厭氧培養(yǎng)液250g用于厭氧菌增菌培養(yǎng)
10%化胰酪胨大豆肉湯 10% NaCl Tryptic Soy Broth 用于金黃色葡萄球菌的MPN測定,增菌培養(yǎng)(GB2008標(biāo)準(zhǔn))
牛肉浸粉 Beef Extract Powder 250 培養(yǎng)基原材料,提供細(xì)菌生長所需的生長因子
強(qiáng)化梭菌瓊脂250g/瓶用于梭菌的分離培養(yǎng)incubationmedia強(qiáng)化梭菌瓊脂250g/瓶用于梭菌的分離培養(yǎng)
甲基紅指示劑盒 5ml*2 用于甲基紅試驗
3%氯三糖鐵瓊脂2550g用于副溶血性弧菌的生化反應(yīng)。(GB、SN)
4121-prf EpiCM-2-prf 上皮細(xì)胞培養(yǎng)基-2 500 ml incubation media 4121-prf EpiCM-2-prf 上皮細(xì)胞培養(yǎng)基-2 500 ml
Trypticase(Tryptic)SoyBroth
6.5%NaClDextroseAgar
TM培養(yǎng)基 250g 用于淋球菌的分離培養(yǎng)(Quelab方法)
人皰疹病毒通用PCR試劑盒步驟EC-MUGMedium
亞鹽還原厭氧菌孢子液體培養(yǎng)基 用于亞鹽還原厭氧菌孢子的增菌培養(yǎng)。
YM肉湯 YM Broth 250克 BR
哥倫比亞MUG培養(yǎng)基250用于大腸桿菌的熒光檢測(SN標(biāo)準(zhǔn))incubationmedia哥倫比亞MUG培養(yǎng)基250用于大腸桿菌的熒光檢測(SN標(biāo)準(zhǔn))
Nutrientagarslant
需要自備的器材:
1.人皰疹病毒通用PCR試劑盒步驟儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。
特點(diǎn):
1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照,便于分析試驗結(jié)果。