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產(chǎn)品名稱 | 豚鼠皮膚細(xì)胞;GP-S1 |
生長特性 | 貼壁生長 |
貨號 | EY-X63750 |
細(xì)胞名稱 豚鼠皮膚細(xì)胞;GP-S1
形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細(xì)胞系來源于一雌性豚鼠的皮膚組織。2001年由中國科學(xué)院昆明細(xì)胞庫建立。
培養(yǎng)條件: M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS
傳代方法: 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況: P3
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 熒光法(-)
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產(chǎn)品特點(diǎn):
1、 使用方便:不需昂貴設(shè)備。
2、 可以處理各種細(xì)菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時(shí)間縮短至30分鐘-1小時(shí)。
4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時(shí),背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程:
1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長至60%~70%融合時(shí),用0.25%消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生的細(xì)胞,以0.25%消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ,計(jì)算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生的細(xì)胞用消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。
Saponarin
CAS No.:20310-89-8
中文名:皂草黃苷
分子式:C27H30O15
尿素 訂購|咨詢 輸出蛋白6(XPO6) 規(guī)格: HPLC≥98%;50mg
訂購|咨詢 輸出蛋白7(XPO7) 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg
角鯊 訂購|咨詢 輸卵管糖蛋白1(OVGP1) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
格列喹 訂購|咨詢 睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(TF) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
當(dāng)歸酰異五味子素O 訂購|咨詢 睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(TF) 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg
并黃素 訂購|咨詢 睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(TF) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
大豆皂苷Ab 訂購|咨詢 睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(TF) 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg
香荊芥 訂購|咨詢 睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(TF) 規(guī)格: HPLC≥98%;50mg
莨菪 訂購|咨詢 睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(TF) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
土荊皮 訂購|咨詢 嗜中性粒細(xì)胞胞漿因子2(NCF2) 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg
補(bǔ)骨脂查爾 訂購|咨詢 嗜中性粒細(xì)胞胞漿因子2(NCF2) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
異香蘭 訂購|咨詢 嗜中性粒細(xì)胞胞漿因子2(NCF2) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
異佛手柑內(nèi)酯 訂購|咨詢 嗜中性粒細(xì)胞胞漿因子4(NCF4) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
D甘露糖 訂購|咨詢 嗜乳脂蛋白亞家族1成員A1(BTN1A1) 規(guī)格: HPLC≥98%;100mg
Hederacolchiside A1 訂購|咨詢 嗜鉻蛋白A(CHGA) 規(guī)格: HPLC≥98%;5mg
銀椴苷;椴樹苷 訂購|咨詢 嗜鉻蛋白A(CHGA) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
纖細(xì) 訂購|咨詢 嗜鉻蛋白B(CHGB) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
大黃8OβD葡萄糖苷 訂購|咨詢 嗜鉻蛋白B(CHGB) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
KRG2/DDX11 角質(zhì)細(xì)胞生長因子調(diào)節(jié)蛋白2抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml EB, Ethidium bromide stock solution, 10 mg/ml
DSCC1 DSCC1蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml GreenDNA Dye,SYBR Green I
phosphoCARM1(Ser228) 蛋白精N甲基4抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml DGlucose
phosphoPRKAA2(Ser173) 腺苷單活蛋白激酶α2抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Imidazole
CAPG2/NCAPG2 染色體相關(guān)蛋白2抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml L(+)Arabinose
APRIN/PDS5B 雄激素誘導(dǎo)增殖抑制蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Formamide deionized
REC8 減數(shù)分裂重組蛋白家族REC8抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Paraffin oil, light fraction
SA1/Nuclear protein stromal antigen 1 粘結(jié)蛋白SA1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Potassium acetate
辛基三嗪相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:20mg 英文名稱:
氟替卡松酯相關(guān)物質(zhì)混合物標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:25mg 英文名稱:
氟替卡松酯分離度用混合物標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:25mg 英文名稱:
醋雜質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:10mg 英文名稱:
重組蛋白A標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:ea 英文名稱:
卡巴拉汀酒石K異構(gòu)體 規(guī)格:20mg 英文名稱:
群勃龍醋酯系統(tǒng)適用性混合物 規(guī)格:30mg 英文名稱:
依諾肝素溶液用于生物測定標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:1ml 英文名稱:
相關(guān)物質(zhì)E標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:25mg 英文名稱:Amiodarone Related Compound E
尼泊金甲酯標(biāo)準(zhǔn)品 規(guī)格:125mg 英文名稱:Methylparaben
豚鼠皮膚細(xì)胞;GP-S1腦心浸液瓊脂規(guī)格:250g用途:用于營養(yǎng)苛求細(xì)菌的增菌培養(yǎng)
霉菌培養(yǎng)基(含瓊脂和霉素)規(guī)格:250g用途:用于霉菌的分離培養(yǎng)
水解乳蛋白規(guī)格:250g用途:提供細(xì)菌生長所需的生長因子
布氏肉湯規(guī)格:布氏肉湯添加劑用途:2ml每支含量
Rustigian氏尿素酶試驗(yàn)培養(yǎng)基(改良)規(guī)格:250g用途:沙門氏菌的生化鑒定
苔黑酚規(guī)格:5g用途:微生物指示劑