公司細(xì)胞廣泛用于國內(nèi)院校的細(xì)胞生物學(xué)研究,作為實驗項目研究。下列產(chǎn)品詳細(xì)介紹:
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
豚鼠肺細(xì)胞;GP-F1 | 貼壁生長 | EY-X63749 |
細(xì)胞名稱 豚鼠肺細(xì)胞;GP-F1
形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細(xì)胞系來源于一雄性豚鼠的肺組織。1989年由中國科學(xué)院昆明細(xì)胞庫建立。
培養(yǎng)條件: M-199:withEarle'sBalancedSaltsSolution(EBSS)15%NBS
傳代方法: 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況: P2
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 熒光法(-)
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冷凍保存細(xì)胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Lutonarin
CAS No.:35450-86-3
中文名:異葒草素-7-O-葡萄糖苷
分子式:C27H30O16
;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 訂購|咨詢 酪蛋白κ(CSN3) 規(guī)格: 0.1g
炔;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 訂購|咨詢 酪蛋白激酶1δ(CSNK1δ) 規(guī)格: 0.1g
嘧;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 訂購|咨詢 腺原脫酶Ⅰ(DIO1) 規(guī)格: 0.1g
雙草;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 訂購|咨詢 腺原脫酶Ⅱ(DIO2) 規(guī)格: 0.1g
?;?/font>*對照品;有報告 訂購|咨詢 腺原脫酶Ⅱ(DIO2) 規(guī)格: 100mg
次核苷(?。?純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有 訂購|咨詢 腺原脫酶Ⅲ(DIO3) 規(guī)格: 0.1g
賽蜜;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 訂購|咨詢 腺原脫酶Ⅲ(DIO3) 規(guī)格: 0.25g
3表齊墩果 訂購|咨詢 輸入蛋白11(IPO11) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
麥冬苷元3OαL喃李糖基( 訂購|咨詢 輸入蛋白13(IPO13) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
檸檬酯E 訂購|咨詢 輸入蛋白4(IPO4) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
巨大戟3,4:5,20雙縮 訂購|咨詢 輸入蛋白5(IPO5) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
DHApaclitaxel 訂購|咨詢 輸入蛋白7(IPO7) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
長春汀 訂購|咨詢 輸入蛋白8(IPO8) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
紫草素 訂購|咨詢 輸入蛋白9(IPO9) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
葉綠 訂購|咨詢 輸出蛋白1(XPO1) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
吳茱萸 訂購|咨詢 輸出蛋白3(XPO3) 規(guī)格: HPLC≥98%;10mg
三尖杉 訂購|咨詢 輸出蛋白4(XPO4) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
8去基滇烏 訂購|咨詢 輸出蛋白5(XPO5) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg
PT/Pericentrin 中心粒周蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml DBiotin
Importin4/RanBP4 核蛋白4抗體(Ran結(jié)合蛋白4) 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Glycerol
MIS12 染色體及有絲分裂蛋白MIS12抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Sodium citrate, trisodium salt, dehydrate
CDCA1/Nuf2 細(xì)胞分裂周期相關(guān)蛋白1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Gelatin
Importin 9/RanBP9 核蛋白9抗體(Ran結(jié)合蛋白M) 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Yeast extract
SPC25 紡錘體極點構(gòu)成蛋白25抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Sodium carbonate anhydrous
CDCA5/Sororin 細(xì)胞分裂周期相關(guān)蛋白5抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml DFructose
CAPD2/AP1 染色體相關(guān)蛋白2抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Riboflavin 5'monophosphate sodium salt hydrate
紫膠 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Shellac 含量:CP
組 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Histaminediphospate 含量:BR,98%
組雙 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Histaminedihydrochloride 含量:BR,99%
組蛋白A(小牛胸腺) 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Histones,dried(Calfthymus) 含量:重組體
組蛋白H1(小牛胸腺) 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:HistonesH1fromcalfthymus 含量:BR,0.010.04u/mg
組蛋白 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Histone 含量:BR,155u/mg,粉末
組織切片安裝介質(zhì) 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:HistoChoice®mountingmedia 含量:3.5N
組織切片固定劑 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:HistoChoice®MBtissueFixative 含量:4N
組織切片清除劑 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:HistoChoice®clearingagent 含量:3.5N
左旋1,2二 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:(R)(),2Propanediol 含量:AR,99%
豚鼠肺細(xì)胞;GP-F1抗生素檢定培養(yǎng)基Ⅱ(PH6.5-6.6)規(guī)格:BR250g詳情介紹
炭疽桿菌診斷抗原規(guī)格:1ml用途:炭疽桿菌檢測用配套試劑
L-纈氨規(guī)格:5g用途:微生物指示劑
馬鈴薯葡萄糖水規(guī)格:250g用途:用于椰假單胞酵米面亞種和真菌的增菌培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))
疊氮葡萄糖肉湯規(guī)格:250g用途:用于鏈球菌增菌培養(yǎng)
G藥敏紙片規(guī)格:10IU/片,20片/瓶用途:抗菌藥物體外敏感性試驗
操作步驟:
1、貼壁細(xì)胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細(xì)胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來,吸除細(xì)胞消化液。加入含血清的 *細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時間過長,未及吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細(xì)胞,盡量去除細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。