產(chǎn)品及特點:
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,使每個循環(huán)變得“可見”。本產(chǎn)品就是以探針法熒光定量 RT-PCR 技術(shù)為基礎(chǔ)開發(fā)的專門檢測探針法熒光定量PCR試劑盒的試劑盒。
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
兔源性成分探針法PCR熒光定量試劑盒 | 50次 | EY00P9563 |
運輸及保存: 低溫運輸,-20℃保存,保存期限為12個月。
自備試劑:樣品 RNA。
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實驗報告給您。
染料法
探針法
可進(jìn)行相對,定量表達(dá)分析,定性分析,SNP檢測等
實驗報告
電泳圖 ·標(biāo)準(zhǔn)曲線
溶解曲線 ·擴(kuò)增曲線
完整的實驗過程、試劑、儀器及分析報告
?
使用方法
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供無傳染性的 DNA 段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個樣品,設(shè)置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是 NC(樣品制備陰性對照)??梢杂?0μL陽性對照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費贈送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝,該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板,省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9. 如果做定量分析并且只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個PCR 管,其中N+2個用于上步得到的 N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照(用水做模板),6個用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+4 個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1個用于PCR陽性對照(用第4號管的陽性對照稀釋液做模板)。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
RS結(jié)構(gòu)域衍生肽溴磷 分析標(biāo)準(zhǔn)品Human TARSL2 ELISA Kit
診斷S6激酶底物,S6(231-239)V 分析標(biāo)準(zhǔn)品Human TAF1L ELISA Kit
RSV M (187 - 195)氯化苯基汞 分析標(biāo)準(zhǔn)品Human TAF1 ELISA Kit
S-I-G-S-L-A-K腐霉利 分析標(biāo)準(zhǔn)品Human TAF3 ELISA Kit
S-F-L-L-R二氯鹽 分析標(biāo)準(zhǔn)品Human TAF6L ELISA Kit
S6-1除蟲菊酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品Human TAF5L ELISA Kit
SALMF 酰 1 (S1)戊炔草 分析標(biāo)準(zhǔn)品Human TBCD ELISA Kit
SALMF 酰 2 (S2)4-氯聯(lián)苯 分析標(biāo)準(zhǔn)品Human TAF7 ELISA Kit
Salusin-α硅酮OV-1 GCHuman MTTP(Microsomal triglyceride transfer protein large subunit) ELISA Kit
Salusin- β硅酮 DC-550 GCHuman TASP1 ELISA Kit
SAMs肽磺醋酰 分析標(biāo)準(zhǔn)品Human TARSL2 ELISA Kit
激活蛋白C12磺氯吡 分析標(biāo)準(zhǔn)品Human TARS2 ELISA Kit
激活蛋白C18磺吡啶 分析標(biāo)準(zhǔn)品Human TAX1BP1 ELISA Kit
激活蛋白C22西瑪津 分析標(biāo)準(zhǔn)品Human TAX1BP3 ELISA Kit
角蝰素 6c 噻苯隆 分析標(biāo)準(zhǔn)品Human TBC1D17 ELISA Kit
兔源性成分探針法PCR熒光定量試劑盒吡哆磷酸磷酸酶(PDXP)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)石油(AR,bp 90-120 °C) 質(zhì)量規(guī)格:1/60mol/L(0.1N)
異戊烯半氧化酶1(PCYOX1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)1,1,2-三氯三氟乙烷(CFC-113)(99.5%) 質(zhì)量規(guī)格:AR
酮酸羧化酶(PC)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)1,1,2-三氯三氟乙烷(CFC-113)(99.5%) 質(zhì)量規(guī)格:指示劑級
Polybromo 1蛋白(PBRM1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)滑石粉(800目) 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.96%
小細(xì)胞蛋白γ(PARVγ)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)滑石粉(800目) 質(zhì)量規(guī)格:IND
小細(xì)胞蛋白β(PARVβ)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)滑石粉(800目) 質(zhì)量規(guī)格:ACS reagent,95 %
小細(xì)胞蛋白α(PARVα)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)滑石粉(藥用級,325目) 質(zhì)量規(guī)格:AR
Papilin蛋白(PAPLN)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)滑石粉(藥用級,325目) 質(zhì)量規(guī)格:>98%