產(chǎn)品特點(diǎn):
1、 使用方便:不需昂貴設(shè)備。
2、 可以處理各種細(xì)菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時(shí)間縮短至30分鐘-1小時(shí)。
4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時(shí),背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。
細(xì)胞名稱 大長舌果蝠肌肉細(xì)胞;DBM1
形態(tài)特性: 上皮樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細(xì)胞系來源于一雄性大長舌果蝠的肌肉組織。2006年由中國科學(xué)院昆明細(xì)胞庫建立。
培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)15%NBS
傳代方法: 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況: P2
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 熒光法(-)?
產(chǎn)品名稱 | 大長舌果蝠肌肉細(xì)胞;DBM1 |
生長特性 | 貼壁生長 |
貨號 | EY-X63748 |
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,超低比價(jià),產(chǎn)品名稱貨期短,價(jià)格優(yōu),售后齊全。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程:
1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長至60%~70%融合時(shí),用0.25%消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生的細(xì)胞,以0.25%消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ,計(jì)算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生的細(xì)胞用消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
3"-O-Desmethylspinorhamnoside
CAS No.:2220243-41-2
中文名:
分子式:C33H38O15
可可;Theobromine 訂購|咨詢 ?;人饷?AOAH) 規(guī)格: 50mg
基異茜草素1 ;Rubiadi 訂購|咨詢 酯酶D(ESD) 規(guī)格: 10mg
黃腐; Xanthohumo 訂購|咨詢 酪3/色5單加氧酶激活蛋白ζ(YWHAζ) 規(guī)格: 20mg
;Palmatine chlori 訂購|咨詢 酪3/色5單加氧酶激活蛋白ζ(YWHAζ) 規(guī)格: 20mg
甘草二銨;Diammonium gly 訂購|咨詢 酪轉(zhuǎn)酶(TAT) 規(guī)格: 20mg
芳樟;Linalool 訂購|咨詢 酪羥酶(TH) 規(guī)格: 0.5ml
二氫楊梅素;Dihydromyricet 訂購|咨詢 酪羥酶(TH) 規(guī)格: 20mg
豆甾;Stigmasterol 訂購|咨詢 酪羥酶(TH) 規(guī)格: 20mg
長春瑞濱;Virelbine 訂購|咨詢 酪磺基轉(zhuǎn)移酶1(TPST1) 規(guī)格: 20mg
新苷 ;Neoandrograph 訂購|咨詢 酪磺基轉(zhuǎn)移酶2(TPST2) 規(guī)格: 20mg
白果雙黃;Bilobetin 訂購|咨詢 酪激酶2(Tyk2) 規(guī)格: 20mg
補(bǔ)骨脂素;Coryfolin 訂購|咨詢 酪酶(TYR) 規(guī)格: 20mg
巴豆苷;2Hydroxyadesi 訂購|咨詢 酪酶(TYR) 規(guī)格: 20mg
磺二基;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 訂購|咨詢 酪蛋白α(CSN1) 規(guī)格: 0.25g
α丹;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 訂購|咨詢 酪蛋白α(CSN1) 規(guī)格: 0.1g
五磺草;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 訂購|咨詢 酪蛋白β(CSN2) 規(guī)格: 0.1g
三羧草;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 訂購|咨詢 酪蛋白β(CSN2) 規(guī)格: 0.1g
代森鋅;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 訂購|咨詢 酪蛋白κ(CSN3) 規(guī)格: 0.1g
phosphoAMPK alpha1(Ser485+Ser491) 腺苷單活蛋白激酶α1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Yeast extract
VRK1 牛痘病相關(guān)激酶1抗體(絲/蘇蛋白激酶VRK1) 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml RNase A Solution
phosphoAMPK alpha1/PRKAA1(Thr198) 腺苷單活蛋白激酶α1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml DGlucose, monohydrate
ZBTB2 鋅指蛋白437抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml SDS
PRKAA2/AMPK alpha 2 腺苷單活蛋白激酶α2抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml PEG 6000
ZNF415 鋅指蛋白415抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Tween 20
Retinoic acid induced 17 維誘導(dǎo)蛋白17抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Triton X100
CENPP 著絲粒蛋白P抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Tryptone
重組螞蟥素 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Hirudinrecombinant 含量:BR,98%
受體拮抗劑 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:rhILra 含量:BR
重組人甲狀旁腺激素14 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:PTH14 含量:BR,95%
重組人甲狀旁腺激素14 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:PTH14 含量:BR,98%
重組人粒細(xì)胞集落刺激因子 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:rhGCSF 含量:BR,98.5%
進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Chinesered 含量:CP
珠光脂 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Heptadecanoicacid 含量:SP,99.8%
豬膽 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:CholicaicdsodiumSalt 含量:CP,98%
助壯素 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Mepiquatchloride 含量:高純,99%
轉(zhuǎn)移核糖核(酵母) 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:tRNA 含量:ACS級,99%
大長舌果蝠肌肉細(xì)胞;DBM1MC培養(yǎng)基(不含瓊脂)規(guī)格:250g用途:用于嗜熱鏈球菌增菌培養(yǎng)
卵黃化鈉瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ)規(guī)格:BR250g詳情介紹
培養(yǎng)基P規(guī)格:250g用途:用于梭菌的分離培養(yǎng)
亞硫鹽瓊脂規(guī)格:250g用途:用于厭氧亞硫鹽還原桿菌的試管計(jì)數(shù)(SN標(biāo)準(zhǔn))
化K氏培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于果汁或濃縮果汁中脂環(huán)芽孢桿菌和其他耐熱耐菌檢測
抗生素檢定培養(yǎng)基4號(pH6.5-6.6)規(guī)格:250g用途:用于等的效價(jià)測定