細(xì)胞名稱 大長舌果蝠肺細(xì)胞;DBL1
形態(tài)特性: 成纖維細(xì)胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 該細(xì)胞系來源于一雄性大長舌果蝠的肺組織。2006年由中國科學(xué)院昆明細(xì)胞庫建立。
培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)15%NBS
傳代方法: 1:2傳代;3-4天一次
傳代情況: P2
凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 熒光法(-)?
產(chǎn)品名稱 | 大長舌果蝠肺細(xì)胞;DBL1 |
生長特性 | 貼壁生長 |
貨號 | EY-X63746 |
產(chǎn)品特點(diǎn):
1、 使用方便:不需昂貴設(shè)備。
2、 可以處理各種細(xì)菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。
實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程:
1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長至60%~70%融合時,用0.25%消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生的細(xì)胞,以0.25%消化成單細(xì)胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生的細(xì)胞用消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計算平均值。
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Quercetin 3-O-sophoroside
CAS No.:18609-17-1
中文名:槲皮素-3-O-槐糖苷
分子式:C27H30O17
川芎嗪;2,3,5,6四基嗪 訂購|咨詢 窖蛋白(CAV1) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
長春質(zhì) 訂購|咨詢 窖蛋白(CAV1) 規(guī)格: HPLC≥98%;20mg/支
紫菀 訂購|咨詢 窖蛋白(CAV1) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
牡荊素; 5, 7, 4'三羥基黃 訂購|咨詢 窖蛋白(CAV1) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
金石蠶苷; 金石蠶甙 訂購|咨詢 窖蛋白(CAV1) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
姜 訂購|咨詢 窖蛋白(CAV1) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
表兒茶素 訂購|咨詢 窖蛋白2(CAV2) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
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柚皮苷 訂購|咨詢 強(qiáng)肽(Dyn) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
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脫水內(nèi)酯; 素 訂購|咨詢 強(qiáng)肽(Dyn) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
金絲桃苷;槲皮素3半乳糖甙 訂購|咨詢 強(qiáng)肽原(PDYN) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支
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()新 訂購|咨詢 巰基轉(zhuǎn)移酶(MPST) 規(guī)格: 200mg
2基4,6雙環(huán)基三嗪 對照品 訂購|咨詢 緩激肽(BK) 規(guī)格: 200mg
辛葡 對照品 訂購|咨詢 緩激肽(BK) 規(guī)格: 200mg;99.9%
抗?fàn)钕龠^氧物酶抗體 訂購|咨詢 緩激肽(BK) 規(guī)格: 430IU
棕櫚;Palmitic acid 訂購|咨詢 緩激肽(BK) 規(guī)格: 200mg
Relaxin 1 松弛肽/松弛素抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml 1Aminohydantoin Hydrochloride
Renalase 腎酶抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml ACTH (124), human
SLC12A3/NCCT 離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Bradykinin
VNN1 血管非炎癥分子1抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Bradykinin acetate
AXUD1 轉(zhuǎn)生長因子β誘導(dǎo)蛋白3抗體(半胱和絲富含核蛋白1) 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml αMSH
BS69/Adenovirus 5 E1A binding protein 腺病5結(jié)合蛋白BS69抗體(骨形態(tài)發(fā)生蛋白受體相關(guān)分子1) 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Endothelin1, human,porcine
BTG3 高表達(dá)神經(jīng)上皮蛋白BTG3抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Bombesin
BTG4 B細(xì)胞遷移基因4抗體 現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml VIP, human, porcine, rat; VIP (28 amino acids)
直接剛果紅 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Congored 含量:超純,99%
直接黑EX 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:DirectBlack38 含量:生物技術(shù)級,98%
植物細(xì)胞分裂素 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Zeatin 含量:USP級,98.5%
植物血凝素 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:PHA 含量:BR,0.5u/mg,馬鈴薯,粉末
植物血球凝集素PHAP 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:PHAP 含量:BR,10u/mg,甘薯,液體
制真 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Nystatin 含量:BR,魚鱗提取
質(zhì)譜級銀染試劑 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Masssilverstain 含量:生物技術(shù)級,98%
中分子量標(biāo)準(zhǔn)蛋白 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:MiddlerangeproteinMWmarker 含量:BR,100u/mg
中溫 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:糊精酶 含量:BR,4000u/g
中性樹膠 進(jìn)口、國產(chǎn) 英文名稱:Neutralbalsam 含量:BR,99.5%
大長舌果蝠肺細(xì)胞;DBL1三糖鐵瓊脂對照培養(yǎng)基規(guī)格:12.7g/200mL,30袋/盒用途:培養(yǎng)基適用性實(shí)驗(yàn)
四硫磺鹽煌綠增菌液(TTB肉湯)規(guī)格:10ml*20支/包用途:用于沙門氏菌選擇性增菌培養(yǎng)
改良Y培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于分離小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌 (GB標(biāo)準(zhǔn))
含0.6%酵母膏的胰酪胨大豆瓊脂(TSA-YE)規(guī)格:250g用途:用于單增李氏菌的分純,培養(yǎng),可用于做7%羊血瓊脂
瓷珠菌種保存管規(guī)格:50支/盒用途:用于菌種保存(瓷珠法)
肉湯培養(yǎng)基D規(guī)格:250g用途:用于大腸菌群,糞大腸菌群,大腸桿菌的測定