產(chǎn)品特點:
1、 使用方便:不需昂貴設備。
2、 可以處理各種細菌菌體,包括新鮮菌液和冰凍菌體。
3、 將蛋白提取的時間縮短至30分鐘-1小時。
4、 采用溫和的中性裂解組分,保持蛋白活性。
5、 含蛋白穩(wěn)定劑,提取的蛋白穩(wěn)定。
6、 紫外檢測蛋白濃度時,背景干擾低。
7、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解,蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨立的蛋白酶抑制劑;每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性,包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等。
8、 本試劑盒中不有EDTA,與金屬螯和層析等兼容。
細胞名稱 小鼠胰島素瘤胰島β細胞;Beta-TC-6
形態(tài)特性: 上皮細胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 這株細胞來源于轉(zhuǎn)基因小鼠中生長的一個胰腫瘤(胰島素瘤)。這種小鼠攜帶了大鼠胰島素II基因啟動子調(diào)控的SV40早期基因的假基因結(jié)構(gòu)。細胞包含豐富的胰島素和小量的胰高血糖素及。響應葡萄糖而分泌胰島素。
培養(yǎng)條件: DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)優(yōu)質(zhì)熱滅活胎牛血清,15%
傳代方法: 消化10-15分鐘。1:2。5-6天長滿。
傳代情況: P(24+5)
凍存條件: 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 陰性?
產(chǎn)品名稱 | 小鼠胰島素瘤胰島β細胞;Beta-TC-6 |
生長特性 | 貼壁生長 |
貨號 | EY-X63944 |
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,超低比價,產(chǎn)品名稱貨期短,價格優(yōu),售后齊全。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
操作流程:
1.1主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生的細胞,以0.25%消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數(shù)生的細胞用消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時;
4.將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。
磷葡萄糖變位酶檢測試劑盒細胞名稱: 人食管鱗癌細胞系;ZEC-118形態(tài)特性: 上皮樣Phosphoglucomutase
谷氨酰tRNA還原酶檢測試劑盒細胞名稱: 人源化PD-L1MC-38細胞;PD-L1MC-38形態(tài)特性: 上皮樣glutamine tRNA synthetase
5-氨基乙酰丙合成酶檢測試劑盒細胞名稱: 兔正常宮頸上皮細胞;RNCEC/HL-031RabbitNormalCervicalEpithelialCellsRNCEC/HL-031形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣5-aminolevulinic acid synthetase
茉莉檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞株;AEG-1-P形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Jasmonate
蕓苔素內(nèi)酯檢測試劑盒細胞名稱: 兔正常肺上皮細胞;RNLEC/HL-029RabbitNormalLungEpithelialCellsRNLEC/HL-029形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Brassinolide
丙脫羧酶檢測試劑盒細胞名稱: 轉(zhuǎn)基因小鼠細胞;MMHRL3形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Pyruvate decarboxylase
總糖檢測試劑盒細胞名稱: 大鼠正常膀胱上皮細胞;RNBEC/HL-033RatNormalBladderEpithelialCellsRNBEC/HL-033形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Total Sugar
4-香豆檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞株;3G2形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣4-coumarate coenzyme A
赤霉素4檢測試劑盒細胞名稱: 轉(zhuǎn)基因小鼠細胞;MMHRL1形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Gibberellic Acid 4
赤霉素7檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞株;1G9形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Gibberellic Acid 7
二氫玉米素核苷檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞株;1C1形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣DZR
纖維素檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞株;1B6形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣cellulose
1,5-二磷核糖檢測試劑盒細胞名稱: 兔正常食管上皮細胞;RNLEC/HL-030RabbitNormalEsophagealEpithelialCellsRNEEC/HL-030形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Diphosphate ribulose
螯合肽檢測試劑盒細胞名稱: 人肺腺癌細胞系;ZLC-001形態(tài)特性: 上皮樣phytochelatins
金屬忍耐蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 人食管鱗癌細胞系;ZEC-134形態(tài)特性: 上皮樣MTP
類粘蛋白檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞株;XA272-919形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣APR
亞硫還原酶檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞株;XA272-907形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣sulfite reductase
小鼠胰島素瘤胰島β細胞;Beta-TC-6去氫鉤藤630-94-4中文別名:柯諾辛因
英文名:Corynoxeine
CAS登錄號:630-94-4
分子式:C22H26N2O4
分子量:382.19
分子結(jié)構(gòu):
外觀:白色至淺黃色或者灰色結(jié)晶性粉末或者粉末
規(guī)格:20mg/支
純度:≥ 98%
用途:用于含量測定/鑒定/藥理實驗等。
提取來源:茜草科植物鉤藤[Uncaria rhynchophylla (Miq. ) Jacks.]等植物
溶解性:溶于,尚可溶于、乙醇、,微溶于和,不溶于。
熔點:216℃
旋光度:-14.7°(c=2.5,)
藥理藥效:本品有抑制呼吸中樞和離體腸管及興奮大鼠離體,降低血壓,抗血小板聚集并有促進已聚集血小板解聚的作用。還能改善紅細胞的變形能力,抑制不良因素對紅細胞變形能力的損害。臨床用于治療高血壓病,對I、II期高血壓有一定的療效。
貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光
有效期: 2年