公司細胞廣泛用于國內(nèi)院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產(chǎn)品詳細介紹:
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
乳腺癌細胞;MDA-MB-435S | 貼壁生長 | EY-X63539 |
細胞名稱 乳腺癌細胞;MDA-MB-435S
形態(tài)特性: 紡錘形
生長特性: 貼壁生長
特征特性: MDA-MB-435S是一種紡錘形的細胞,1976年由其親本(435)中篩選得到。435是從31歲的轉(zhuǎn)移性乳腺導管腺癌女性患者胸水中分離得到。當用熒光染料對微管蛋白進行染色時親本細胞顯現(xiàn)散布特征(II型)。最近通過cDNA陣列研究表明,親本(MDA-MB-435)可歸入黑素瘤起源。
培養(yǎng)條件: L15:LeibovitzMedium優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;0.01mg/ml胰島素
傳代方法: 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況: P(239+5)
凍存條件: 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 陰性
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冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Listonella pelagia (Baumann et al.) MacDone ..細胞名稱: 小鼠雜交瘤細胞;
交瘤株;MA-4G8注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用N,N-二乙基-2-甲基-1,4-苯uman SUPV3L1 ELISA Kit
小鼠雜交瘤株;MA-1G2用途: 試驗栽培N,N-二乙基-2-甲基-1,4-鹽Human SURF1 ELISA Kit
小鼠雜交瘤株;DN-2H5拉丁屬名: Bacillus subtilisN,N-二乙基-2-甲基-1,4-Human SURF2 ELISA Kit
小鼠雜交瘤株;DN-H12拉丁屬名: Polyangium fumosum 蘇丹橙GHuman FKBP8(Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase FKBP8) ELISA Kit
小鼠雜交瘤株;MA-3G6拉丁屬名: Bacillus psychrosaccharolyticus蘇丹橙GHuman SUV39H1 ELISA Kit
小鼠雜交瘤株;2-1拉丁屬名: Prevola copri2-溴代異丁酸Human SUV39H2 ELISA Kit
小鼠雜交瘤株;HB NV26注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用2-溴代異丁酸Human SUZ12 ELISA Kit
小鼠雜交瘤株;SAH301拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae2-溴代異丁酸Human STT3A ELISA Kit
小鼠雜交瘤株;mAb D7拉丁屬名: Rhizopus arrhizus2-溴聯(lián)苯Human STXBP2 ELISA Kit
小鼠雜交瘤株;C1/307拉丁屬名: Pichia jadinii2-溴聯(lián)苯Human STT3B ELISA Kit
小鼠雜交瘤株;HYBASVIGL-1注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用2-溴聯(lián)苯Human STXBP1(Syntaxin-binding protein 1) ELISA Kit
小鼠雜交瘤株;WV-SPA-03注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用水楊酸丁酯Human STOML1 ELISA Kit
小鼠雜交瘤株;WV-TT-05拉丁屬名: Sediminibacillus albus水楊酸丁酯Human STK4 ELISA Kit
小鼠雜交瘤株;4-5注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,乳腺癌細胞;MDA-MB-435S人抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)ELISA試劑盒RabbitLebtospiraIgGELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
人抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-FodrinIgG/IgA)ELISA試劑盒RabbitReninELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
人抗蛋白酶3抗體IgG(PR3Ab-IgG)ELISA試劑盒RAG-1ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
人髓過氧化物酶特異性抗中性粒細胞胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCAIgG)ELISA試劑盒RAG-2ELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
人抗腎小球基底膜抗體(GBM)ELISA試劑盒RAGE/AGERELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
人抗殺菌通透性增高蛋白抗體(BPI-Ab)ELISA試劑盒RANAELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白抗體IgG(LF/LTFAb-Ig)ELISA試劑盒RANKLELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
人組織蛋白酶抗體(CathAb)ELISA試劑盒RANKLELISAKit產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T。
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。